趨化因子是一類具有化學趨化功能的小分子分泌性蛋白(6-14 k Da)。研究者最初從哺乳動物中發(fā)現(xiàn)趨化因子,它能夠趨化白細胞到損傷或者感染的部位,參與免疫調(diào)節(jié)和病理反應(yīng)。趨化因子家族大都具有保守的半胱氨酸序列,基于前兩個半胱氨酸的排列,趨化因子被歸為四種類型:CXC、CC、C和CX3C。CXC趨化因子的前兩個半胱氨酸中間插入了一個其它的氨基酸。趨化因子的受體是具有七個跨膜區(qū)的G蛋白偶聯(lián)受體。趨化因子受體和它們的配體,是啟動和控制免疫細胞轉(zhuǎn)移模式的重要因子,在先天性和獲得性免疫系統(tǒng)的功能中發(fā)揮重要的作用。根據(jù)結(jié)合的趨化因子的不同,將趨化因子受體分為CXCR1-CXCR5(與CXC結(jié)合)、CCR1-CCR9(與CC結(jié)合)、XCR1(與C結(jié)合)、CX3CR(與CX3C結(jié)合)。牙鲆是一種很重要的海產(chǎn)魚類,具有較高的營養(yǎng)價值和經(jīng)濟價值,被廣泛養(yǎng)殖于中國、韓國和日本等亞洲國家。近年來隨著牙鲆高密度工廠化養(yǎng)殖的不斷發(fā)展和養(yǎng)殖環(huán)境的惡化,各種疾病也頻繁爆發(fā),對牙鲆養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。雖然采用了抗菌素等傳統(tǒng)的藥物治療取得了一定的效果,但隨著細菌耐藥性的增強以及藥物在魚體內(nèi)的殘留,給消費者的健康造...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻綜述
    1 趨化因子概況
        1.1 趨化因子結(jié)構(gòu)及其分類
        1.2 CXC趨化因子
    2 趨化因子受體概況
        2.1 趨化因子受體結(jié)構(gòu)及其分類
        2.2 趨化因子受體的信號轉(zhuǎn)導機制
        2.3 趨化因子與趨化因子受體CCL20/CCR6的研究進展
    3 硬骨魚類中趨化因子及其受體的研究
        3.1 魚類中CXC趨化因子的研究
        3.2 魚類中CCR趨化因子受體的研究
    4 趨化因子及其受體的功能
        4.1 趨化因子及其受體在免疫中的作用
        4.2 趨化因子及其受體在生理和病理反應(yīng)中的作用
            4.2.1 趨化因子及其受體在淋巴細胞的生成及歸巢中的作用
            4.2.2 趨化因子及其受體在抗原提呈與T、B淋巴細胞的活化中的作用
            4.2.3 趨化因子及其受體促進T細胞的極化
            4.2.4 在損傷愈合中的作用
            4.2.5 在炎癥反應(yīng)中的作用
            4.2.6 在腫瘤中的作用
            4.2.7 趨化因子及其受體在抗HIV感染中的作用
第二章 牙鲆CXCL9趨化因子的克隆、鑒定與表達分析
    1 實驗材料
        1.1 實驗用魚
        1.2 主要試劑和儀器
    2 實驗方法
        2.1 組織樣本采集
        2.2 牙鲆各組織RNA的提取
        2.3 cDNA第一鏈的合成
        2.4 CXCL9基因cDNA克隆驗證
            2.4.1 中間序列驗證RCP引物和RACE引物合成
            2.4.2 CXCL9中間序列驗證
            2.4.3 PCR產(chǎn)物純化
            2.4.4 目的片段的連接與轉(zhuǎn)化
            2.4.5 陽性克隆的檢測與測序
            2.4.6 3'RACE-ready cDNA和 5'RACE-ready cDNA的制備
            2.4.7 大菱鲆趨化因子cDNA 5'和 3'末端的快速擴增（RACE）
        2.5 序列和進化分析
        2.6 實時熒光相對定量PCR
    3 結(jié)果與分析
        2.1 牙鲆CXCL9基因的克隆
        2.2 牙鲆CXCL9基因的序列比對及同源性分析
        2.3 實時熒光定量PCR檢測結(jié)果
    4 討論
第三章 牙鲆兩種新型單外顯子PoCCR6A和PoCCR6B基因的克隆和表達分析
    1 實驗材料
        1.1 實驗用魚
        1.2 總RNA的提取及cDNA的合成
        1.3 總DNA的提取
        1.4 牙鲆PoCCR6A和PoCCR6B的克隆
        1.5 序列分析和進化樹分析
        1.6 PoCCR6A和PoCCR6B的組織表達
        1.7 PoCCR6A和PoCCR6B在細菌感染后的表達
        1.8 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 牙鲆PoCCR6A和PoCCR6B基因的克隆分析
        2.2 序列分析和進化樹分析
        2.3 牙鲆PoCCR6A和PoCCR6B基因的組織表達分析
        2.4 PoCCR6A和PoCCR6B趨化因子受體在鰻弧菌感染后組織中的表達分析
    3 討論
總結(jié)與展望
參考文獻
碩士期間科研成果
致謝



本文編號：3845831