隨著集約化養(yǎng)殖的迅猛發(fā)展, 水產養(yǎng)殖病害問題日益突出。為了防治水產動物疾病,抗生素被大量應用于水產養(yǎng)殖。由于抗生素的大量使用所導致的藥物殘留等問題,抗生素在國外許多國家受到嚴格的限制。一些抗生素在我國也已經被禁止使用,因此尋求能有效防治水產動物疾病、替代或減少抗生素使用的藥物和飼料添加劑顯得非常必要和緊迫。本研究通過體外和體內實驗,探討豬血多肽(Peptides from Swine Blood, PSB)對建鯉抗氧化和免疫功能的影響,為應用豬血多肽防治水產動物疾病提供理論依據。主要研究內容和結果如下：1.體外實驗：采用密度梯度離心技術,分離純化建鯉頭腎細胞、頭腎巨噬細胞和外周血白細胞。將不同濃度的豬血多肽加入到鯉頭腎細胞、頭腎巨噬細胞和外周血白細胞的體外培養(yǎng)體系中作用24 h, WST-1法測定細胞增殖,NBT還原法和Griess試劑顯色法測定巨噬細胞的氧呼吸爆發(fā)活性和氮呼吸爆發(fā)活性。結果表明：濃度為20、40、80μg/mL的豬血多肽能顯著提高外周血白細胞的增殖；濃度為40和80μg/mL的豬血多肽能顯著增強頭腎巨噬細胞的氧呼吸爆發(fā)活性和氮呼吸爆發(fā)活性；另外80μg/mL的豬血多肽...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1 生物活性肽研究進展
        1.1 生物活性肽制備方法
            1.1.1 通過體外酶水解蛋白質獲得
            1.1.2 通過模擬或者取實體動物胃腸道物消化前體蛋白獲得
            1.1.3 通過化學方法以及基因重組技術人工合成生物活性肽
        1.2 生物活性肽的功能
            1.2.1 調節(jié)胃腸道吸收礦物質和營養(yǎng)物質的功能
            1.2.2 調節(jié)神經系統(tǒng)
            1.2.3 調節(jié)心血管系統(tǒng)
            1.2.4 調節(jié)免疫系統(tǒng)
            1.2.5 調節(jié)機體的抗氧化功能
            1.2.6 其他功能
        1.3 生物活性肽在水產養(yǎng)殖中的研究進展應用
            1.3.1 多肽在水產養(yǎng)殖中的研究進展
            1.3.2 動物蛋白源活性肽在水產動物中的研究
    2 豬血的研究進展
        2.1 豬血的成分
        2.2 豬血的開發(fā)和利用
            2.2.1 在飼料上的利用
            2.2.2 食品工業(yè)應用
            2.2.3 在保健食品中的利用
            2.2.4 制取多肽
    3 魚類細胞培養(yǎng)
        3.1 魚類細胞培養(yǎng)研究進展
        3.2 細胞培養(yǎng)的形式
        3.3 影響魚類細胞培養(yǎng)的因素
            3.3.1 溫度
            3.3.2 PH值和滲透壓
            3.3.3 培養(yǎng)基
            3.3.4 添加成分
    4 Toll樣受體在水產動物免疫中的研究進展
    5 實驗目的和意義
第二章 豬血多肽的安全性評價分析
    1 材料和方法
        1.1 試驗材料
        1.2 實驗設計
            1.2.1 建鯉頭腎細胞分離
            1.2.2 豬血多肽體外安全性分析
            1.2.3 豬血多肽體內安全性分析
        1.3 數(shù)據統(tǒng)計
    2 結果與分析
        2.1 豬血多肽對建鯉頭腎細胞活力的影響
        2.2 豬血多肽體內安全性測定
    3 討論
第三章 豬血多肽對建鯉離體培養(yǎng)免疫細胞活性的影響
    1 材料和方法
        1.1 材料
            1.1.1 實驗用魚
            1.1.2 試劑和儀器
        1.2 方法
            1.2.1 建鯉外周血白細胞分離
            1.2.2 建鯉頭腎巨噬細胞的分離
            1.2.3 建鯉頭腎細胞的分離
        1.3 免疫指標的測定
            1.3.1 外周血白細胞增殖的測定
            1.3.2 呼吸爆發(fā)活性測定
            1.3.3 SOD活力的檢測
        1.4 數(shù)據分析
    2 結果與分析
        2.1 豬血多肽對建鯉外周血白細胞增殖的影響
        2.2 豬血蛋白活性肽對建鯉頭腎巨噬細胞氮呼吸爆發(fā)和氧呼吸爆發(fā)活性的影響
        2.3 豬血多肽對建鯉離體頭腎細胞SOD活性的影響
    3 討論
第四章 豬血多肽對鯉血清中免疫因子的影響
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 實驗用魚
            1.1.2 試劑和儀器
        1.2 方法
            1.2.1 試驗組別劃分及處理
            1.2.2 樣品采集
            1.2.3 免疫指標的測定
        1.3 數(shù)據分析
    2 結果與分析
        2.1 豬血多肽對建鯉血清中IL-1β和TNF-α的影響
        2.2 豬血多肽對建鯉血清中C3和C4的影響
        2.3 豬血多肽對建鯉肝臟細胞TLR-4含量變化的影響
    3 討論
第五章 豬血多肽對建鯉抗氧化能力的影響
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 實驗用魚
            1.1.2 試劑和儀器
        1.2 方法
            1.2.1 試驗組別劃分及處理
            1.2.2 血清制備
            1.2.3 血清蛋白含量以及生化指標活力測定
        1.3 數(shù)據分析
    2 結果與分析
        2.1 豬血多肽對建鯉血清中TP和Alb含量的影響
        2.2 豬血蛋白活性肽對建鯉血清中抗氧化能力的影響
        2.3 豬血多肽對建鯉血清中AKP活性的影響
    3 討論
結論
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的論文
附錄



本文編號：3824275