絲氨酸蛋白酶抑制因子在日本囊對(duì)蝦中的克隆與功能研究
發(fā)布時(shí)間:2023-05-13 16:26
甲殼動(dòng)物占有水生節(jié)肢動(dòng)物中最大的比例,其經(jīng)濟(jì)價(jià)值不可估量。其中對(duì)蝦是甲殼類中最重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物,然而由于多種細(xì)菌和病毒入侵蝦體導(dǎo)致疾病甚至死亡,使對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)遭受巨大損失。其中鰻弧菌(Vibrio anguillarum)是海水養(yǎng)殖對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)的主要病原菌之一。因此,對(duì)于對(duì)蝦先天免疫機(jī)理的研究,不僅可以為防治蝦病提供新方法及基礎(chǔ)理論指導(dǎo),同時(shí)還可以豐富無(wú)脊椎動(dòng)物的先天免疫理論,與模式生物的研究互為印證,具有重要的實(shí)際意義和科學(xué)意義。絲氨酸蛋白酶抑制因子(Serpin)能夠特異性的抑制絲氨酸蛋白酶,參與到對(duì)蝦的酚氧化酶原激活系統(tǒng)中,調(diào)控機(jī)體的黑化作用,從而參與對(duì)蝦的抗病原體免疫過(guò)程。目前對(duì)于絲氨酸蛋白酶抑制因子的其他生物學(xué)功能目前了解仍不多。因此,對(duì)Serpin的研究不僅可以獲得對(duì)該基因功能的新認(rèn)識(shí),為闡明其在對(duì)蝦先天免疫中的作用奠定基礎(chǔ);還可以豐富絲氨酸蛋白酶抑制因子的理論體系,為對(duì)蝦養(yǎng)殖實(shí)踐中蝦病的防治提供理論依據(jù),具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。 我們從日本囊對(duì)蝦中鑒定出九種絲氨酸蛋白酶抑制因子,分別命名為MjSerp1-9,它們的組織分布模式各有不同,在受到鰻弧菌和白斑病毒刺激后,部分絲氨...
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞說(shuō)明
第一章 綜述
一.甲殼動(dòng)物的疾病
1. 甲殼動(dòng)物的研究意義
2. 侵害對(duì)蝦的主要病原菌
二.甲殼動(dòng)物的先天免疫系統(tǒng)
1. 先天免疫概述
2. 先天免疫的模式識(shí)別
3. 免疫信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)
4. 細(xì)胞免疫
5. 體液免疫
三.絲氨酸蛋白酶抑制因子的研究進(jìn)展
1. 絲氨酸蛋白酶
2. 絲氨酸蛋白酶抑制因子
四.本論文研究的目的、意義與技術(shù)路線
第二章 絲氨酸蛋白酶抑制因子在日本囊對(duì)蝦先天免疫中的功能研究
一.前言
二.材料方法
1. 試劑和儀器
2. 菌株與載體
3. 實(shí)驗(yàn)材料和免疫刺激
4. RNA提取和DNA合成
5. MjSerp1 cDNA全長(zhǎng)克隆
6. 序列分析
7. MjSerp1 mRNA水平組織分布和表達(dá)模式
8. 重組蛋白表達(dá)和純化
9. 前酚氧化酶抑制實(shí)驗(yàn)
10. 微生物結(jié)合實(shí)驗(yàn)
11. 抗菌活性檢測(cè)
12. 蛋白酶抑制實(shí)驗(yàn)
13. 細(xì)菌清除實(shí)驗(yàn)
14. 體內(nèi)RNA干擾與細(xì)菌清除實(shí)驗(yàn)
15. 免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)蛋白的核質(zhì)定位
16. 免疫共沉淀檢測(cè)蛋白相互作用
三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1. MjSerp1-9的組織分布和表達(dá)模式
2. MjSerp1的序列分析
3. MjSerp1的組織分布和表達(dá)模式
4. MjSerp1的重組表達(dá)、純化和功能研究
5. MjSerp1的抗菌活性及細(xì)菌結(jié)合實(shí)驗(yàn)
6. MjSerp1的蛋白酶抑制實(shí)驗(yàn)
7. MjSerp1促進(jìn)了日本囊對(duì)蝦的體內(nèi)清除鰻弧菌作用
四.討論
創(chuàng)新點(diǎn)總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表文章
學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表
本文編號(hào):3816158
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一.甲殼動(dòng)物的疾病
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2. 侵害對(duì)蝦的主要病原菌
二.甲殼動(dòng)物的先天免疫系統(tǒng)
1. 先天免疫概述
2. 先天免疫的模式識(shí)別
3. 免疫信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)
4. 細(xì)胞免疫
5. 體液免疫
三.絲氨酸蛋白酶抑制因子的研究進(jìn)展
1. 絲氨酸蛋白酶
2. 絲氨酸蛋白酶抑制因子
四.本論文研究的目的、意義與技術(shù)路線
第二章 絲氨酸蛋白酶抑制因子在日本囊對(duì)蝦先天免疫中的功能研究
一.前言
二.材料方法
1. 試劑和儀器
2. 菌株與載體
3. 實(shí)驗(yàn)材料和免疫刺激
4. RNA提取和DNA合成
5. MjSerp1 cDNA全長(zhǎng)克隆
6. 序列分析
7. MjSerp1 mRNA水平組織分布和表達(dá)模式
8. 重組蛋白表達(dá)和純化
9. 前酚氧化酶抑制實(shí)驗(yàn)
10. 微生物結(jié)合實(shí)驗(yàn)
11. 抗菌活性檢測(cè)
12. 蛋白酶抑制實(shí)驗(yàn)
13. 細(xì)菌清除實(shí)驗(yàn)
14. 體內(nèi)RNA干擾與細(xì)菌清除實(shí)驗(yàn)
15. 免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)蛋白的核質(zhì)定位
16. 免疫共沉淀檢測(cè)蛋白相互作用
三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1. MjSerp1-9的組織分布和表達(dá)模式
2. MjSerp1的序列分析
3. MjSerp1的組織分布和表達(dá)模式
4. MjSerp1的重組表達(dá)、純化和功能研究
5. MjSerp1的抗菌活性及細(xì)菌結(jié)合實(shí)驗(yàn)
6. MjSerp1的蛋白酶抑制實(shí)驗(yàn)
7. MjSerp1促進(jìn)了日本囊對(duì)蝦的體內(nèi)清除鰻弧菌作用
四.討論
創(chuàng)新點(diǎn)總結(jié)
參考文獻(xiàn)
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