目前在針對魚類神經(jīng)壞死病毒的疫苗研究中,主要是將神經(jīng)壞死病毒某些蛋白作為抗原進(jìn)行注射免疫,但是傳統(tǒng)的注射免疫并不能有效地激發(fā)黏膜免疫。筆者將魚類神經(jīng)壞死病毒的衣殼蛋白(MCP)與鮰愛德華氏菌的跨粘膜蛋白o(hù)mpN1融合表達(dá),擬制備能夠抵抗神經(jīng)壞死病毒的粘膜疫苗;利用從NCBI GenBank庫里獲得的魚類神經(jīng)壞死病毒的外殼蛋白MCP和鮰愛德華氏菌的外膜蛋白o(hù)mpN1的基因序列,將兩者進(jìn)行序列優(yōu)化與全基因合成,分別構(gòu)建原核表達(dá)載體:MCP-ompN1 pET28a和MCP pET28a和ompN1 pET28a,并在大腸桿菌內(nèi)分別誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白MCP-ompN1,MCP,ompN1后,再利用包涵體純化及透析復(fù)性獲得MCPompN1,MCP,ompN1蛋白。SDS-PAGE結(jié)果顯示,原核表達(dá)純化得到了較純的MCP-ompN1融合蛋白,Western Blotting結(jié)果表明,純化得到的MCP-ompN1融合蛋白不僅具有MCP抗原性,還具有ompN1抗原性。本實(shí)驗(yàn)通過原核表達(dá)純化得到了魚類神經(jīng)壞死病毒衣殼蛋白MCP和鮰愛德華氏菌外膜蛋白o(hù)mpN1的融合蛋白MCP-ompN1,為進(jìn)一步驗(yàn)證融合...

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