貽貝隸屬于軟體動物門(Mollusca)，是一種常見的海洋雙殼貝類，主要生長在海島的東北面有海浪沖擊的巖礁上，以浙江舟山海域分布最多。貽貝之所以能夠牢固的粘附在潮濕和動蕩的環(huán)境中的固體基質(zhì)表面，是由于貽貝足絲蛋白極強的粘附性能,這對于理解足絲蛋白分子間的相互作用機制具有基礎(chǔ)性和現(xiàn)實性的意義。貽貝粘附力強可以黏附在固體表面，如石頭、木材、金屬、混凝土、聚氯乙烯（PVC），聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）、聚四氟乙烯（PTFE）。足絲的黏附強度取決于粘附蛋白的種類，蛋白彼此之間的相互作用，黏附基質(zhì)的性質(zhì)，黏附發(fā)生時的環(huán)境條件（例如鹽度、溫度、pH、季節(jié)），機體所處的生物學(xué)狀態(tài)（年齡與代謝狀況）以及貽貝的種類等。貽貝足絲中的蛋白質(zhì)種類應(yīng)該在35種以上，尚有大量的貽貝足絲蛋白分子未被鑒定。以厚殼貽貝（Mytilus coruscus）為研究對象，采取了蛋白質(zhì)增溶抽提技術(shù)，利用醋酸-尿素抽提液和醋酸-鹽酸胍抽提液，盡可能溶解貽貝足絲蛋白；同時采取shotgun質(zhì)譜技術(shù)分析上述抽提后的可溶性蛋白和不溶性足絲蛋白；獲得的質(zhì)譜數(shù)據(jù)搜索貽貝的EST庫。通過上述方法我們總計獲得了14種新型貽貝足絲蛋白及其匹配...

【文章頁數(shù)】：129 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 貽貝足絲蛋白和抗菌肽的研究進展
    1.1 貽貝足絲蛋白
        1.1.1 背景
        1.1.2 貽貝足絲蛋白粘附機制
        1.1.3 貽貝足絲蛋白的相互作用
            1.1.3.1 一般表面分析技術(shù)
            1.1.3.2 貽貝足絲蛋白-基質(zhì)和蛋白-蛋白的相互作用
            1.1.3.3 貽貝足絲蛋白仿生材料
    1.2 貽貝抗菌肽
        1.2.1 背景
        1.2.2 四種貽貝抗菌肽
            1.2.2.1 防御素（defensins）
            1.2.2.2 貽貝肽（myticins）
            1.2.2.3 貽貝素（mytilins）
            1.2.2.4 貽貝霉素（mytimycins）
        1.2.3 抗菌肽純化技術(shù)
第二章 利用質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合貽貝 EST 庫搜索鑒定厚殼貽貝新型足絲蛋白
    2.1 實驗材料與實驗方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗方法
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 質(zhì)譜分析及 EST 數(shù)據(jù)庫搜索結(jié)果
    2.3 結(jié)論
        2.3.1 膠原蛋白類似分子
        2.3.2 參與形成分子交聯(lián)的新型足絲蛋白
        2.3.3 參與足絲保護的新型足絲蛋白
        2.3.4 其他未知功能的新型足絲蛋白
第三章 厚殼貽貝抗菌肽 Mytichitin-1 的全長 cDNA 克隆及序列分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 動物與試劑
        3.1.2 厚殼貽貝抗菌肽 Mytichitin-1 全長基因克隆
    3.2 實驗結(jié)果
        3.2.1 貽貝性腺總 RNA 的提取
        3.2.2 貽貝 Mytichitin-1 基因的 5'RACE
        3.2.3 貽貝 Mytichitin-1 的序列分析
        3.2.4 Mytichitin-1 的亞細胞定位及信號肽預(yù)測
        3.2.5 Mytichitin-1 的序列比對及進化樹分析
    3.3 討論
參考文獻
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
致謝



本文編號：3796839