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中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)C型凝集素的抗菌功能研究

發(fā)布時間:2022-06-28 09:14
  作為模式識別受體,C型凝集素家族(CTLs)在識別和清除病原物的過程中扮演重要角色。在本研究中,在中華絨螯蟹中發(fā)現(xiàn)一種新的CTL。根據(jù)從肝胰腺cDNA文庫里分離得到的ESTs克隆得到該基因的全長。該基因全長為685bp含開放閱讀框(ORF)468bp,可編碼155個氨基酸。氮端含有信號肽和糖類識別結(jié)構(gòu)功能域(CRD)。通過實時定量PCR技術(shù),檢測該基因mRNA大量存在于肝胰腺中,在其他組織中很少甚至沒有。經(jīng)過脂多糖(LPS)的免疫刺激,該基因mRNA水平明顯上調(diào)。該重組蛋白(rEsLecD)可以結(jié)合多種微生物,包括革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌和真菌。同時,鈣離子的存在可以增強該重組蛋白對細(xì)菌的結(jié)合能力,但鈣離子在結(jié)合實驗中不是必須的。該重組蛋白與細(xì)菌的結(jié)合繼而誘導(dǎo)病原微生物的凝集。另外我們檢測到這種重組蛋白能夠抑制細(xì)菌的生長,并且有一定的殺菌作用。更有趣的是,該重組蛋白可以引發(fā)血細(xì)胞體外包裹?傊狙芯拷Y(jié)果預(yù)示著,該凝集素蛋白作為抗菌模式識別受體分子,在無脊椎動物的非特異性免疫系統(tǒng)中,扮演重要角色。Lectins作為一種模式識別受體(PRR),以細(xì)胞表面受體或者游離的可溶蛋白存在。在識別... 

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
論文摘要
ABSTRACT
第一章 綜述
    第一節(jié) 甲殼動物動物免疫系統(tǒng)
    第二節(jié) C型凝集素簡介
    第三節(jié) 本研究的意義及技術(shù)路線
第二章 EsLecD基因的序列以及表達(dá)模式分析
    第一節(jié) EsLecD基因全長的克隆
    第二節(jié) EsLecD基因的序列分析
    第三節(jié) EsLecD表達(dá)模式分析
第三章 EsLecD的抗菌機制探討
    第一節(jié) 重組載體構(gòu)建以及重組蛋白的表達(dá)和純化
    第二節(jié) rEsLecD與細(xì)菌的結(jié)合以及鈣離子依賴性分析
    第三節(jié) rEsLecD抑菌和殺菌活性的分析
    第四節(jié) rEsLecD凝集細(xì)菌活性分析
    第五節(jié) rEsLecD參與血細(xì)胞包裹作用的分析
第四章 總結(jié)及展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號:3653944

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