中華鱉（Pelodiscus sinensis）屬于爬行綱（Reptilia），龜鱉目（Testudines），鱉科（Trionychidae），鱉屬（Pelodiscus），是我國傳統(tǒng)的名貴水產(chǎn)品。其雄性個體不僅生長快，而且裙邊較雌性個體寬厚，具有更高的經(jīng)濟(jì)價值和營養(yǎng)價值。研究發(fā)現(xiàn)中華鱉無異型性染色體，性別決定為溫度依賴型，目前中華鱉性腺分化機(jī)制尚未闡明，有關(guān)性別決定基因Dmrt1的研究尚未見報道。Dmrt1基因是DMRT基因家族的成員之一，是目前已知性別決定和性別分化相關(guān)基因中最為保守的一個。為研究Dmrt1基因?qū)χ腥A鱉性別分化的影響，采用RACE方法獲得該基因的cDNA全長序列，并利用熒光定量PCR技術(shù)分析了Dmrt1基因在中華鱉不同齡期及不同組織的表達(dá)情況。研究表明：中華鱉Dmrt1基因的cDNA序列全長為2335bp，包括164bp的5′非編碼區(qū)（5′UTR）、1064bp的3′端非編碼區(qū)（3′UTR），1107bp的開放閱讀框（ORF），編碼368個氨基酸，預(yù)測分子量為39.20kDa，理論等電點（pI）為7.58。同源性分析發(fā)現(xiàn)中華鱉Dmrt1基因的氨基酸序列與部分物種的... 

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 性別決定與性別分化
        1.1.1 性別決定的幾種方式
        1.1.2 性別分化的相關(guān)基因
    1.2 爬行動物 TSD 機(jī)制
    1.3 Dmrt 基因家族
        1.3.1 Dmrt1 基因
        1.3.2 Dmrt 家族其他基因的功能
    1.4 中華鱉的性別決定
    1.5 研究目的和意義
第2章 中華鱉 Dmrt1 基因的克隆及生物信息學(xué)分析
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 材料
        2.1.2 實驗儀器及試劑
    2.2 方法
        2.2.1 總 RNA 的提取
        2.2.2 cDNA 第一鏈的合成
        2.2.3 Dmrt1 基因 cDNA 全序列的克隆
        2.2.4 中華鱉 Dmrt1 基因序列全長驗證
        2.2.5 生物信息學(xué)分析
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 中華鱉精巢總 RNA
        2.3.2 中華鱉 Dmrt1 基因全長 cDNA 的克隆
        2.3.3 中華鱉 Dmrt1 基因 cDNA 序列分析
    2.4 討論
第3章 中華鱉 Dmrt1 基因的表達(dá)分析
    3.1 材料與試劑
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 主要試劑及儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 引物設(shè)計
        3.2.2 各組織總 RNA 的提取
        3.2.3 cDNA 第一鏈的合成
        3.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        3.2.5 Dmrt1 基因的熒光定量 PCR
    3.3 結(jié)果分析
    3.4 討論
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]DMRT基因家族研究進(jìn)展[J]. 張月圓,王昌留.  中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2013(11)
[2]脊椎動物性別決定基因與性染色體演化機(jī)制[J]. 邵長偉,陳松林.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2012(12)
[3]溫度依賴型性別決定在爬行動物中的研究進(jìn)展[J]. 劉智棋,李婉,唐森威,李劍勇,楊東波,楊毅.  四川動物. 2012(04)
[4]脊椎動物Dmrt基因的研究進(jìn)展[J]. 汪海,王婷茹,袁靜,楊超,于祥國,李明輝,王德壽.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(05)
[5]黃顙魚DMRT1基因cDNA全長克隆及其表達(dá)分析[J]. 李林,梁宏偉,李忠,羅相忠,張志偉,朱媛媛,鄒桂偉.  華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2012(02)
[6]爬行動物溫度決定性別的現(xiàn)象與機(jī)制[J]. 杜衛(wèi)國,孫寶珺.  生物學(xué)通報. 2012(03)
[7]兩棲動物性別決定相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 劉佳,李忻怡,張育輝.  動物學(xué)雜志. 2011(06)
[8]孵化溫度對中華鱉性別分化的影響[J]. 巫旗生,王曉清,曾亞英,馬曉,何橫忠.  飼料博覽. 2011(02)
[9]Dmrt基因家族的研究進(jìn)展[J]. 楊洪雁,寧方勇,杜智恒,楊春山,白秀娟.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2010(01)
[10]龜鱉類溫度依賴型性別決定機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 賀斌,史海濤,廖廣橋.  動物學(xué)雜志. 2009(05)

碩士論文
[1]DMRT家族生物信息學(xué)分析及Dmrt4/Dmrt6表達(dá)與功能初步研究[D]. 汪海.西南大學(xué) 2013
[2]孵化溫度對烏龜性別分化影響的研究[D]. 李珊.湖南師范大學(xué) 2002



本文編號：3646371