鯽腸道潛在益生菌的篩選與功能研究
發(fā)布時間:2022-02-24 13:59
當前水產(chǎn)業(yè)面臨細菌性疾病的嚴重威脅,使用抗生素是防治水產(chǎn)動物細菌性疾病的主要手段,而濫用抗生素會導致病原菌產(chǎn)生耐藥性,也會對環(huán)境造成污染。因此,使用一些新的方法來替代抗生素的使用成為當前防治細菌性疾病的熱點研究。有研究表明,益生菌具有促進水產(chǎn)動物的生長和提高免疫力的作用。內(nèi)源益生菌具有在機體中的定植能力強、對宿主和環(huán)境安全、改善腸道菌群結(jié)構、調(diào)節(jié)機體免疫等特性。因此,新型內(nèi)源性益生菌的開發(fā)研究對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展具有重要促進作用。本研究初步分析了鯽腸道菌群結(jié)構特征,并篩選和分離出無溶血性和對嗜水氣單胞菌具有體外抑制作用的潛在益生菌,進一步通過在體安全試驗予以安全性評估。后期通過潛在益生菌拌飼投喂鯽,研究其對鯽生長、生理、免疫抗病力及其腸道菌群結(jié)構的影響。取得結(jié)果如下:1.使用FWA培養(yǎng)基從鯽腸道分離菌株,根據(jù)菌落形態(tài)特征,按比例隨機挑選36株進行16S rDNA測序鑒定,發(fā)現(xiàn)其中優(yōu)勢菌為氣單胞菌屬、芽孢桿菌屬、鄰單胞菌屬、土芽孢桿菌屬和腸桿菌屬,所占比例分別為46.88%、34.38%、6.25%、6.25%和6.25%。36株從鯽分離的菌株中共16株菌無溶血性,其中有三株菌維氏氣單胞菌...
【文章來源】:西南大學重慶市211工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 文獻綜述
1.1 益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應用
1.1.1 水產(chǎn)益生菌的來源
1.1.2 水產(chǎn)益生菌的應用
1.1.3 益生菌的作用機制
1.2 魚類腸道菌群研究進展
1.2.1 腸道菌群結(jié)構的影響因素
1.2.2 腸道菌群結(jié)構的調(diào)控
1.2.3 宿主-腸道菌群相互作用
1.3 研究目的及意義
第2章 腸道優(yōu)勢菌的分離與篩選
2.1 試驗材料
2.1.1 主要儀器
2.1.2 試驗魚和菌株
2.1.3 試驗試劑
2.2 試驗方法
2.2.1 腸道細菌的分離
2.2.2 腸道細菌的分子生物學鑒定
2.2.3 潛在病原菌的剔除
2.2.4 潛在益生菌的篩選
2.2.5 潛在益生菌的安全性檢驗
2.2.6 潛在益生菌的生理生化鑒定和系統(tǒng)發(fā)育樹構建
2.2.7 數(shù)據(jù)分析
2.3 結(jié)果
2.3.1 鯽腸道細菌數(shù)量與組成
2.3.2 潛在病原菌的剔除
2.3.3 潛在益生菌的篩選
2.3.4 潛在益生菌的安全性檢驗
2.3.5 潛在益生菌的鑒定
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第3章 潛在益生菌對鯽生長、免疫及抗病力的影響
3.1 試驗材料
3.1.1 試驗菌株
3.1.2 試驗飼料
3.1.3 試驗動物
3.2 試驗方法
3.2.1 試驗設計
3.2.2 生長指標的測定
3.2.3 血清樣品采集
3.2.4 抗凝血采集與血液指標的測定
3.2.5 血清生化指標的測定
3.2.6 肝臟樣品采集及其生化指標的測定
3.2.7 攻毒試驗
3.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 生長指標
3.3.2 血常規(guī)指標
3.3.3 血清生化指標
3.3.4 肝臟生化指標
3.3.5 攻毒試驗
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第4章 潛在益生菌對鯽腸道健康的影響
4.1 試驗材料
4.1.1 主要儀器
4.1.2 藥品試劑
4.2 試驗方法
4.2.1 試驗設計
4.2.2 腸道樣品采集
4.2.3 腸道消化酶活性
4.2.4 腸道石蠟切片制作和形態(tài)觀察
4.2.5 微生物DNA提取、擴增與測序
4.2.6 測序數(shù)據(jù)處理
4.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 腸道消化酶活性
4.3.2 中腸組織形態(tài)
4.3.3 腸道菌群
4.4 討論
4.5 小結(jié)
第5章 結(jié)論
參考文獻
致謝
碩士期間發(fā)表論文
【參考文獻】:
期刊論文
[1]益生菌和復合營養(yǎng)劑對魚蝦混養(yǎng)池塘水質(zhì)及細菌群落結(jié)構的影響[J]. 陳錦豪,鄭錦濱,毛勇,蘇永全,王軍. 熱帶生物學報. 2019(01)
[2]漁源乳酸菌降解養(yǎng)殖水體氨氮的效果研究[J]. 李詠梅,任貽超,姜森灝,王金葉,王仁杰,李超. 水產(chǎn)科學. 2018(04)
[3]尼羅羅非魚致病性類志賀鄰單胞菌(Plesiomonas shigelloides)的分離鑒定及其病理學觀察[J]. 劉志剛,可小麗,盧邁新,高風英,曹建萌,朱華平,王淼. 微生物學報. 2015(01)
[4]中國對蝦成蝦腸道微生物區(qū)系(英文)[J]. 王祥紅,李會榮,張曉華,李筠,紀偉尚,徐懷恕. 青島海洋大學學報(自然科學版). 2000(03)
本文編號:3642868
【文章來源】:西南大學重慶市211工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 文獻綜述
1.1 益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應用
1.1.1 水產(chǎn)益生菌的來源
1.1.2 水產(chǎn)益生菌的應用
1.1.3 益生菌的作用機制
1.2 魚類腸道菌群研究進展
1.2.1 腸道菌群結(jié)構的影響因素
1.2.2 腸道菌群結(jié)構的調(diào)控
1.2.3 宿主-腸道菌群相互作用
1.3 研究目的及意義
第2章 腸道優(yōu)勢菌的分離與篩選
2.1 試驗材料
2.1.1 主要儀器
2.1.2 試驗魚和菌株
2.1.3 試驗試劑
2.2 試驗方法
2.2.1 腸道細菌的分離
2.2.2 腸道細菌的分子生物學鑒定
2.2.3 潛在病原菌的剔除
2.2.4 潛在益生菌的篩選
2.2.5 潛在益生菌的安全性檢驗
2.2.6 潛在益生菌的生理生化鑒定和系統(tǒng)發(fā)育樹構建
2.2.7 數(shù)據(jù)分析
2.3 結(jié)果
2.3.1 鯽腸道細菌數(shù)量與組成
2.3.2 潛在病原菌的剔除
2.3.3 潛在益生菌的篩選
2.3.4 潛在益生菌的安全性檢驗
2.3.5 潛在益生菌的鑒定
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第3章 潛在益生菌對鯽生長、免疫及抗病力的影響
3.1 試驗材料
3.1.1 試驗菌株
3.1.2 試驗飼料
3.1.3 試驗動物
3.2 試驗方法
3.2.1 試驗設計
3.2.2 生長指標的測定
3.2.3 血清樣品采集
3.2.4 抗凝血采集與血液指標的測定
3.2.5 血清生化指標的測定
3.2.6 肝臟樣品采集及其生化指標的測定
3.2.7 攻毒試驗
3.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 生長指標
3.3.2 血常規(guī)指標
3.3.3 血清生化指標
3.3.4 肝臟生化指標
3.3.5 攻毒試驗
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第4章 潛在益生菌對鯽腸道健康的影響
4.1 試驗材料
4.1.1 主要儀器
4.1.2 藥品試劑
4.2 試驗方法
4.2.1 試驗設計
4.2.2 腸道樣品采集
4.2.3 腸道消化酶活性
4.2.4 腸道石蠟切片制作和形態(tài)觀察
4.2.5 微生物DNA提取、擴增與測序
4.2.6 測序數(shù)據(jù)處理
4.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 腸道消化酶活性
4.3.2 中腸組織形態(tài)
4.3.3 腸道菌群
4.4 討論
4.5 小結(jié)
第5章 結(jié)論
參考文獻
致謝
碩士期間發(fā)表論文
【參考文獻】:
期刊論文
[1]益生菌和復合營養(yǎng)劑對魚蝦混養(yǎng)池塘水質(zhì)及細菌群落結(jié)構的影響[J]. 陳錦豪,鄭錦濱,毛勇,蘇永全,王軍. 熱帶生物學報. 2019(01)
[2]漁源乳酸菌降解養(yǎng)殖水體氨氮的效果研究[J]. 李詠梅,任貽超,姜森灝,王金葉,王仁杰,李超. 水產(chǎn)科學. 2018(04)
[3]尼羅羅非魚致病性類志賀鄰單胞菌(Plesiomonas shigelloides)的分離鑒定及其病理學觀察[J]. 劉志剛,可小麗,盧邁新,高風英,曹建萌,朱華平,王淼. 微生物學報. 2015(01)
[4]中國對蝦成蝦腸道微生物區(qū)系(英文)[J]. 王祥紅,李會榮,張曉華,李筠,紀偉尚,徐懷恕. 青島海洋大學學報(自然科學版). 2000(03)
本文編號:3642868
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