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鱘魚(yú)嗜水氣單胞菌滅活疫苗研制及其免疫效果分析

發(fā)布時(shí)間:2022-02-21 04:28
  鱘魚(yú)是我國(guó)淡水養(yǎng)殖重要品種之一,在我國(guó)淡水養(yǎng)殖業(yè)中占重要地位。目前鱘魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì),但隨著鱘魚(yú)養(yǎng)殖集約化和規(guī);潭炔粩嗵岣,細(xì)菌性疾病不斷發(fā)生。嗜水氣單胞菌是弧菌科氣單胞菌屬成員,廣泛存活在淡水、淤泥、土壤等環(huán)境,常常引起魚(yú)類(lèi)包括鱘魚(yú)等以及兩犧動(dòng)物發(fā)生病死亡。當(dāng)前,細(xì)菌性疾病防治多用抗生素及化學(xué)藥物,但若長(zhǎng)期不合理或不規(guī)范使用,引起細(xì)菌耐藥現(xiàn)象出現(xiàn),導(dǎo)致環(huán)境細(xì)菌污染嚴(yán)重等問(wèn)題,而疫苗預(yù)防具有效果好和低污染等優(yōu)點(diǎn),已在鱘魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)中廣泛應(yīng)用。本研究在前期分離得到鱘魚(yú)源嗜水氣單胞菌的基礎(chǔ)上,通過(guò)比較滅活條件包括甲醛濃度(0.05%、0.1%、0.2%、0.3%和0.4%)、滅活溫度(4℃、28℃、30℃和37℃)和滅活時(shí)間(4h、8h、12h和24h),制備鱘魚(yú)用嗜水氣單胞菌滅活疫苗。然后選取鱘魚(yú)140尾,隨機(jī)分為對(duì)照組、疫苗組、佐劑組和疫苗+佐劑組,每組35尾,相應(yīng)以無(wú)菌PBS溶液、滅活疫苗、黃芪多糖和滅活疫苗+黃芪多糖進(jìn)行注射。于注射后第1d、7d、14d、21d和28d時(shí),隨機(jī)采集試驗(yàn)鱘尾靜脈血液樣本,5尾/組,采用ELISA測(cè)定鱘魚(yú)血液常規(guī)生化指標(biāo)(谷草轉(zhuǎn)氨酶AST、谷丙轉(zhuǎn)... 

【文章來(lái)源】:貴州大學(xué)貴州省211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
文獻(xiàn)綜述
    1 嗜水氣單胞菌病概述
        1.1 病原菌形態(tài)特征
        1.2 病原菌致病因子
    2 嗜水氣單胞菌疫苗種類(lèi)
        2.1 滅活疫苗
        2.2 弱毒疫苗
        2.3 核酸疫苗
        2.4 亞單位疫苗
    3 免疫佐劑種類(lèi)
        3.1 免疫佐劑分類(lèi)
        3.2 黃芪多糖
    4 魚(yú)類(lèi)免疫系統(tǒng)
        4.1 魚(yú)類(lèi)免疫系統(tǒng)的組成
        4.2 魚(yú)類(lèi)免疫相關(guān)評(píng)價(jià)指標(biāo)
    5 研究目的與意義
前言
1 材料
    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與菌株
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
2 方法
    2.1 滅活疫苗的制備
        2.1.1 菌株復(fù)蘇及菌液配制
        2.1.2 滅活條件篩選
        2.1.3 滅活疫苗的制備具體過(guò)程
        2.1.4 滅活疫苗無(wú)菌及安全性檢驗(yàn)
    2.2 試驗(yàn)分組管理及相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)
        2.2.1 黃芪多糖溶液的制備
        2.2.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組飼養(yǎng)管理及免疫接種
        2.2.3 試驗(yàn)樣品采集及處理
        2.2.4 常規(guī)生化指標(biāo)測(cè)定
        2.2.5 相關(guān)免疫指標(biāo)測(cè)定
    2.3 免疫保護(hù)效果
        2.3.1 攻毒試驗(yàn)
        2.3.2 免疫保護(hù)率
        2.3.3 對(duì)組織細(xì)胞的影響
    2.4 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果
    3.1 滅活疫苗制備結(jié)果
        3.1.1 滅活條件篩選結(jié)果
        3.1.2 滅活疫苗無(wú)菌檢驗(yàn)及安全性檢驗(yàn)結(jié)果
    3.2 相關(guān)免疫指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
        3.2.1 常規(guī)生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
        3.2.2 血清免疫指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
    3.3 免疫保護(hù)效果
        3.3.1 免疫保護(hù)率
        3.3.2 對(duì)組織細(xì)胞影響的結(jié)果
4 討論
    4.1 滅活疫苗制備結(jié)果分析
    4.2 相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果分析
        4.2.1 常規(guī)生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果分析
        4.2.2 相關(guān)免疫指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果分析
    4.3 免疫保護(hù)效果分析
        4.3.1 免疫保護(hù)率結(jié)果分析
        4.3.2 對(duì)組織細(xì)胞影響結(jié)果分析
5 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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[2]中華絨螯蟹常見(jiàn)病原的分離鑒定、致病及免疫機(jī)制研究[D]. 徐海圣.浙江大學(xué) 2004

碩士論文
[1]嗜水氣單胞菌滅活疫苗浸泡水溫對(duì)異育銀鯽免疫應(yīng)答的影響研究[D]. 劉恩秀.西南大學(xué) 2018
[2]GCRV弱毒疫苗與黃芪多糖免疫草魚(yú)母本的免疫因子代間傳遞與表達(dá)特性[D]. 周智愚.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]兩種佐劑對(duì)虹鱒殺鮭氣單胞菌滅活疫苗免疫效果的影響[D]. 劉帥.上海海洋大學(xué) 2017
[4]俄羅斯鱘性腺潰爛病的免疫效果研究及膿包病病原的分離鑒定[D]. 肖艷翼.上海海洋大學(xué) 2016
[5]大鯢細(xì)菌病原的分離鑒定與嗜水氣單胞菌滅活疫苗的免疫應(yīng)答研究[D]. 楊星.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[6]加州鱸嗜水氣單胞菌滅活疫苗免疫效果及免疫學(xué)評(píng)價(jià)[D]. 付亞成.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]黃芪多糖增強(qiáng)疫苗免疫效力及機(jī)理研究[D]. 高艷艷.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2006



本文編號(hào):3636498

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