草魚（Ctenopharyngodon idellus）是我國重要的淡水養(yǎng)殖魚類,其產(chǎn)量及產(chǎn)值在最近幾年一直位于淡水養(yǎng)殖魚類前列。然而當前病害問題已成為制約草魚養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的瓶頸,其中由嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）引發(fā)的敗血癥一直是草魚養(yǎng)殖過程中的重要疾病。本研究從理論和實際兩方面考慮,立足我國國情,以草魚腎細胞（C.idellus kidney,CIK）為研究對象,開展以發(fā)掘草魚免疫相關基因為目標的轉錄組研究。以期為今后草魚相關基因的克隆和草魚免疫學研究,尤其是草魚細菌性敗血癥的發(fā)病機理提供重要的基礎理念。本研究采用CCK-8和ELISA檢測試劑盒分別測定CIK細胞經(jīng)熱滅活嗜水氣單胞菌刺激后的細胞活力和相關酶活指標;依據(jù)半定量RT-PCR技術確定滅活病原菌刺激CIK細胞的最適濃度和最佳時長,并對該刺激條件下的細胞樣品進行轉錄組測序;利用Illumina測序技術構建了CIK細胞經(jīng)滅活病原菌刺激后的轉錄組文庫,結合生物信息學分析的方法,探究CIK細胞的抗菌免疫應答機制。主要結果如下:1.在細胞活力測定中,隨著刺激時間的延長,CIK細胞數(shù)目逐漸減少,細胞活性逐漸減... 

【文章來源】：西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

滅活病原菌刺激對CIK細胞形態(tài)的影響（10×）

第2章嗜水氣單胞菌對草魚腎細胞致病性研究21不清，細胞逐漸裂解（圖2-2C），當孵育時間為3h時，細胞裂解程度進一步加強，部分細菌被消化（圖2-2D）。圖2-2CIK細胞體外吞噬現(xiàn)象觀察孵育時長：（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h。Figure2-2ObservationofphagocytosisofC.kidneycellinvitroDurationofincubation:（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h.2.3.2細胞活性檢測結果經(jīng)滅活嗜水氣單胞菌刺激處理的CIK細胞活性檢測情況如圖2-3所示。圖2-3滅活嗜水氣單胞菌刺激對CIK細胞活性的影響Figure2-3EffectsofActivatedA.hydrophilaStimulationonC.idelluskidneycell’sviabilityindex

第2章嗜水氣單胞菌對草魚腎細胞致病性研究21不清，細胞逐漸裂解（圖2-2C），當孵育時間為3h時，細胞裂解程度進一步加強，部分細菌被消化（圖2-2D）。圖2-2CIK細胞體外吞噬現(xiàn)象觀察孵育時長：（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h。Figure2-2ObservationofphagocytosisofC.kidneycellinvitroDurationofincubation:（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h.2.3.2細胞活性檢測結果經(jīng)滅活嗜水氣單胞菌刺激處理的CIK細胞活性檢測情況如圖2-3所示。圖2-3滅活嗜水氣單胞菌刺激對CIK細胞活性的影響Figure2-3EffectsofActivatedA.hydrophilaStimulationonC.idelluskidneycell’sviabilityindex

【參考文獻】：
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本文編號：3577840