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草魚(yú)HMGB2蛋白抗病毒功能及其動(dòng)態(tài)亞細(xì)胞定位誘導(dǎo)機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-12-17 13:34
  高遷移率族蛋白2(High-mobility group box 2,HMGB2)是一類非組蛋白染色質(zhì)結(jié)合蛋白。其參與很多生理過(guò)程,如轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)、重組、分化以及胞外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。新近的研究表明,哺乳動(dòng)物HMGB2可識(shí)別病毒DNA,從而在核酸調(diào)節(jié)的抗病毒先天免疫應(yīng)答中發(fā)揮“哨兵”作用。然而,到目前為止,對(duì)于魚(yú)類HMGB2在抗病毒免疫應(yīng)答中的作用知之甚少。草魚(yú)(Ctenopharyngodon idella)是我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖魚(yú)類,然而,由草魚(yú)出血病病毒(Grass carp reovirus,GCRV)引起的草魚(yú)出血病給草魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了重大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究克隆了Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的c DNA全長(zhǎng)序列,初步研究了其抗病毒免疫功能并揭示了其動(dòng)態(tài)亞細(xì)胞定位調(diào)控機(jī)制。取得的主要結(jié)果包括:1.Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的c DNA均編碼213個(gè)氨基酸,包含2個(gè)N端的box結(jié)構(gòu)域和1個(gè)C端尾巴結(jié)構(gòu)域。2.Ci HMGB2a和Ci HMGB2b在草魚(yú)組織中廣泛表達(dá);而GCRV感染引起了Ci HMGB2a和Ci HMGB2b在脾臟和頭腎組織中顯著上調(diào)。3.在C... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 草魚(yú)出血病概述
        1.1.1 草魚(yú)養(yǎng)殖概況
        1.1.2 草魚(yú)養(yǎng)殖概況草魚(yú)出血病及其防治策略
    1.2 魚(yú)類先天性免疫概述
        1.2.1 先天性免疫的模式識(shí)別受體
        1.2.2 IFN調(diào)節(jié)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.2.3 HMGBs
    1.3 研究的目的和意義
        1.3.1 本研究的目的
        1.3.2 本研究的意義
第二章 草魚(yú)HMGB2蛋白抗病毒功能及其動(dòng)態(tài)亞細(xì)胞定位誘導(dǎo)機(jī)制研究
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 RNA提取與c DNA合成
        2.2.3 引物設(shè)計(jì)
        2.2.4 Ci HMGB2a/b全長(zhǎng)c DNA克隆
        2.2.5 組織樣品采集
        2.2.6 載體構(gòu)建
        2.2.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染、篩選與病毒刺激
        2.2.8 實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)相應(yīng)基因的表達(dá)
        2.2.9 抗病毒活性試驗(yàn)
        2.2.10 實(shí)驗(yàn)材料共聚焦熒光顯微鏡檢測(cè)亞細(xì)胞定位
        2.2.11 實(shí)驗(yàn)材料活細(xì)胞工作站檢測(cè)
        2.2.12 實(shí)驗(yàn)材料蛋白提取和WB試驗(yàn)
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 全長(zhǎng)Ci HMGB2a、Ci HMGB2b的序列分析
        2.3.2 Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的組織分布
        2.3.3 GCRV感染后Ci HMGB2a和Ci HMGB2b在脾臟和頭腎組織中的時(shí)序表達(dá)
        2.3.4 Ci HMGB2a和Ci HMGB2b過(guò)表達(dá)對(duì)Ci TRIF, Ci IPS-1, Ci My D88, Ci IFN-I, Ci Mx1應(yīng)對(duì)GCRV刺激的影響
        2.3.5 Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的抗病毒活性
        2.3.6 Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的亞細(xì)胞定位
        2.3.7 GCRV感染引起Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的核質(zhì)遷移
        2.3.8 活細(xì)胞工作站檢測(cè)Ci HMGB2b的核質(zhì)遷移現(xiàn)象
        2.3.9 Ci HMGB2b結(jié)構(gòu)域及其嵌合體的亞細(xì)胞定位
        2.3.10 GCRV刺激對(duì)Ci HMGB2b結(jié)構(gòu)域和嵌合體蛋白亞細(xì)胞定位的影響
    2.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
縮略詞
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]草魚(yú)呼腸孤病毒分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 李永剛,曾偉偉,王慶,殷亮,王英英,石存斌,吳淑勤.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(04)
[2]草魚(yú)出血病基因疫苗的免疫效果[J]. 鄒勇,徐詩(shī)英,李婧慧,薛仁宇.  水產(chǎn)養(yǎng)殖. 2011(10)
[3]化學(xué)合成小干擾RNA分子高效抑制草魚(yú)呼腸孤病毒復(fù)制[J]. 李兵,范玉頂,李艷秋,徐進(jìn),周勇,曾令兵.  病毒學(xué)報(bào). 2009(05)
[4]C型凝集素受體CLRs與固有免疫[J]. 楊婷,唐麗,賀福初.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2009(05)
[5]魚(yú)類抗病毒非特異性免疫機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 王亞楠,孔曉瑜,史成銀.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2008(05)
[6]核酸疫苗的研究進(jìn)展及其在魚(yú)類免疫中的應(yīng)用[J]. 郝貴杰,沈錦玉,潘曉義.  大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(02)
[7]天然免疫系統(tǒng)的“分子模式識(shí)別作用”及其免疫生物學(xué)意義[J]. 陳政良,朱錫華.  免疫學(xué)雜志. 2000(03)
[8]草魚(yú)出血病細(xì)胞培養(yǎng)弱毒疫苗的制備及其免疫效果[J]. 許淑英,李煥林,鄧國(guó)成,姜蘭.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 1994(02)
[9]草魚(yú)出血病細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗的研究:疫苗的穩(wěn)定性及佐劑和加強(qiáng)免疫對(duì)草魚(yú)免疫應(yīng)答的影響[J]. 楊先樂(lè),左文功.  水生生物學(xué)報(bào). 1993(01)

碩士論文
[1]草魚(yú)RIG-I基因應(yīng)對(duì)GCRV感染及病毒和細(xì)菌類似物刺激的功能研究[D]. 陳利軍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013



本文編號(hào):3540226

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