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棕點石斑魚中草藥免疫增強(qiáng)劑的篩選及其非特異性免疫增強(qiáng)效果研究

發(fā)布時間:2021-12-11 07:42
  近年來,海南、福建、廣東等地養(yǎng)殖棕點石斑魚(Epinephelus fuscoguttatus)發(fā)生了較嚴(yán)重的暴發(fā)性疾病,制約了其可持續(xù)健康發(fā)展。篩選和使用合適的免疫增強(qiáng)劑以提高水產(chǎn)動物的整體抗病力已成為當(dāng)前水產(chǎn)病害預(yù)防的有效手段之一。目前,在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的免疫增強(qiáng)劑類型包括糖類、維生素、微量元素、核苷酸、微生態(tài)制劑、中草藥等,其中,中草藥具有天然性、多功能性、低殘留、資源豐富等優(yōu)點,已成為魚類等水產(chǎn)養(yǎng)殖動物免疫增強(qiáng)劑的重要來源之一。本文先采用離體外周血白細(xì)胞與中草藥提取液共孵育的方法快速篩選棕點石斑魚中草藥免疫增強(qiáng)劑,再通過體內(nèi)投喂實驗,檢測所篩選中草藥對棕點石斑魚非特異免疫功能的影響,獲得安全高效的棕點石斑魚中草藥免疫增強(qiáng)劑。根據(jù)已有的文獻(xiàn)資料,選擇39種已報道對水產(chǎn)養(yǎng)殖動物具有較好免疫增強(qiáng)效果的中草藥用于棕點石斑魚免疫增強(qiáng)劑篩選。采用常溫浸泡提取法分別制備39種中草藥提取液,與棕點石斑魚白細(xì)胞于體外共同孵育后,采用氮藍(lán)四唑(NBT)還原法檢測了生藥量濃度為100mg/mL的39種單方中草藥水提液和添加了5.0mg/mL酵母聚糖的中草藥水提液對棕點石斑魚外周血白細(xì)胞氧呼吸爆發(fā)活性... 

【文章來源】:海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一章 綜述
    1 棕點石斑魚研究進(jìn)展
        1.1 棕點石斑魚概述
        1.2 棕點石斑魚養(yǎng)殖現(xiàn)狀
    2 養(yǎng)殖魚類疾病及其防治研究進(jìn)展
        2.1 養(yǎng)殖魚類疾病的發(fā)生及流行概況
        2.2 石斑魚疾病的發(fā)生及流行概況
        2.3 魚類疾病的防治
    3 魚類免疫研究進(jìn)展
        3.1 魚類免疫器官及組織
        3.2 魚類免疫細(xì)胞
        3.3 非特異性免疫因子
        3.4 魚類主要免疫相關(guān)因子
    4 魚用免疫增強(qiáng)劑研究進(jìn)展
        4.1 魚用多聚糖類免疫增強(qiáng)劑
        4.2 魚用中草藥免疫增強(qiáng)劑
    5 本研究的目的及意義
    6 本研究的技術(shù)路線
第二章 棕點石斑魚免疫增強(qiáng)劑的體外快速篩選
    1 實驗材料與儀器
        1.1 實驗儀器設(shè)備
        1.2 主要試驗試劑及配制方法
    2 試驗方法
        2.1 實驗中草藥
        2.2 實驗用魚
        2.3 中草藥提取液樣品制備
        2.4 棕點石斑魚血液樣品制備
        2.5 外周血白細(xì)胞分離混合液選擇及外周血白細(xì)胞樣品制備
        2.6 中草藥對外周血白細(xì)胞呼吸爆發(fā)活性的影響
        2.7 中草藥對外周血白細(xì)胞吞噬活性的影響
        2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3 結(jié)果
        3.1 棕點石斑魚外周血白細(xì)胞分離液的篩選
        3.2 提高棕點石斑魚白細(xì)胞氧呼吸爆發(fā)活性中草藥篩選
        3.3 提高棕點石斑魚白細(xì)胞吞噬活性中草藥篩選
    4 討論
        4.1 細(xì)胞分離液對外周血白細(xì)胞分離效果的影響
        4.2 中草藥免疫增強(qiáng)劑篩選
第三章 中草藥對棕點石斑魚生長及非特異性免疫功能的影響
    1 實驗材料與藥品
        1.1 實驗器材
        1.2 實驗試劑及配制方法
    2 實驗方法
        2.1 棕點石斑魚的準(zhǔn)備
        2.2 中草藥提取液樣品準(zhǔn)備
        2.3 飼料制備
        2.4 取樣
        2.5 體重測定
        2.6 抗凝血樣品的采集及細(xì)胞免疫學(xué)指標(biāo)的測定
        2.7 血清樣品的采集及血清免疫學(xué)指標(biāo)的測定
        2.8 脾臟體指數(shù)測定
        2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 投喂三種中草藥對棕點石斑魚體重增長率的影響
        3.2 投喂三種中草藥對脾臟體指數(shù)的影響
        3.3 三種中草藥對棕點石斑魚血液紅細(xì)胞數(shù)量的影響
        3.4 三種中草藥對棕點石斑魚血液白細(xì)胞數(shù)量的影響
        3.5 三種中草藥對棕點石斑魚外周血白細(xì)胞氧呼吸爆發(fā)活性的影響
        3.6 三種中草藥對棕點石斑魚外周血白細(xì)胞吞噬活性的影響
        3.7 三種中草藥對棕點石斑魚堿性磷酸酶活性(AKP)的影響
        3.8 三種中草藥對棕點石斑魚血清超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的影響
        3.9 三種中草藥對棕點石斑魚血清溶菌酶活性(LSZ)的影響
        3.10 三種中草藥對棕點石斑魚血清總蛋白含量的影響
    4 討論
        4.1 中草藥促生長作用
        4.2 中草藥對脾臟體指數(shù)的影響
        4.3 中草藥對血細(xì)胞數(shù)量的影響
        4.4 中草藥對白細(xì)胞氧呼吸爆發(fā)活性和吞噬活性的影響
        4.5 中草藥對血清非特異性免疫學(xué)功能的影響
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者攻讀學(xué)位期間論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]牙鲆免疫系統(tǒng)形態(tài)結(jié)構(gòu)、發(fā)育和感染病理反應(yīng)的研究[D]. 劉云.中國海洋大學(xué) 2003

碩士論文
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[2]草魚體內(nèi)三種氟喹諾酮類藥物的殘留檢測研究[D]. 劉莉莉.西南大學(xué) 2008
[3]復(fù)方中草藥對香魚部分免疫生化指標(biāo)的影響[D]. 馬維波.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[4]魚類ILF2和IL-21基因克隆與表達(dá)研究[D]. 王惠菊.浙江大學(xué) 2006



本文編號:3534278

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