以輪蟲弧菌的單拷貝基因toxR基因的高保守區(qū)域為目的片段,設(shè)計特異性引物,構(gòu)建重組質(zhì)粒標準品,建立針對該菌的熒光定量PCR檢測方法。以此為基礎(chǔ),實驗選用UF-150 Genechecker微流控?zé)晒舛縋CR儀,通過優(yōu)化反應(yīng)體系和反應(yīng)條件,建立了輪蟲弧菌的微流控?zé)晒舛縋CR檢測方法。結(jié)果顯示,該方法能特異性擴增toxR基因目的片段,對輪蟲弧菌純培養(yǎng)物檢測下限為1.34×100拷貝/μL。在人工感染樣品中的應(yīng)用結(jié)果顯示,對魚體組織中輪蟲弧菌的檢測下限為1.34×103 CFU/g,檢測結(jié)果可以目視判讀,檢測時間縮短至42 min以內(nèi)。研究表明,該檢測方法具有特異性強、敏感度高、場地要求低等突出優(yōu)勢,適于開發(fā)水產(chǎn)病原實用性的現(xiàn)場快速檢測技術(shù)。 

【文章來源】：水產(chǎn)學(xué)報. 2020,44(12)北大核心CSCD

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【參考文獻】：
期刊論文
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