病害問題已經(jīng)嚴重制約了大黃魚（Larimichthys crocea）養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。大黃魚病原復雜多變,因此深入了解其免疫識別及激活機制,對于大黃魚病害防控、促進養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展具有重要意義。本研究利用RT-PCR及RACE-PCR技術(shù)克隆了大黃魚Toll樣受體（TLR）家族中的TLR1、TLR2與TLR21,核因子NF-κB家族中的p65、p52、c-rel與IκB,以及白細胞介素家族的IL-11與IL-21基因的全長cDNA序列,分析了它們的分子結(jié)構(gòu);利用定量PCR技術(shù)或半定量PCR技術(shù),研究了它們在大黃魚不同組織的表達譜,解析了病原或病原相關(guān)分子模式（PAMPs）刺激后,大黃魚脾臟、肝臟、頭腎以及LCK細胞系中上述基因的轉(zhuǎn)錄表達變化;重組表達了TLR途徑中關(guān)鍵接頭分子MyD88,并采用GST-pulldown技術(shù)研究了與MyD88相互作用的蛋白;獲得了IL-1β、IL-21的原核重組表達產(chǎn)物。結(jié)果如下:（1）TLR家族部分基因TLR1全長3216 bp,5’UTR為39 bp,3’UTR為768 bp,ORF為2409 bp,編碼802個氨基酸,包含LRR、跨膜區(qū)和TIR結(jié)構(gòu)域。T... 

【文章來源】：集美大學福建省

【文章頁數(shù)】：129 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大黃魚外部性特征

未對NF-κB下游基因的表達進行分析。以上說明魚類中NF-κB信號通路可能存在其特有的調(diào)控方式。圖1.2 推測的魚類TLR信號通路，灰色底紋表示負調(diào)控因子1.2.3.5 炎癥反應與干擾素反應哺乳動物的研究中，病原菌及病毒等病原刺激物激活TLR信號途徑后，通過NF-κB、IRF3、IRF7等信號途徑實現(xiàn)對干擾素和白介素等細胞因子的轉(zhuǎn)錄和表達，最終引發(fā)機體對入侵病原的免疫反應，這其中包括IL-1、IL-2、IL-6、IL-12等前炎癥細胞因子的表達和分泌，促進機體合成和分泌大量急性期蛋白，促進B細胞的分化并加強免疫活性等；I 型IFN

0×Taq buffer 2μL，dNTP( 倍的 cDNA）1μL，Taq 酶 3 min；93℃ 30 s，56℃in。反應完成后將 PCR 產(chǎn)R2 全長 cDNA 克隆與、腎臟總 RNA 進行 1.5%S 與 18S rRNA 兩條帶清晰

【參考文獻】：
期刊論文
[1]香魚（Plecoglossus altivelis）NFκB抑制因子α基因PaIκBα克隆及表達[J]. 張文青,龔一富,章麗,李軍,劉曉丹.  動物學研究. 2013(04)
[2]大黃魚地理種群劃分的探討[J]. 張其永,洪萬樹,楊圣云,劉敏.  現(xiàn)代漁業(yè)信息. 2011(02)
[3]網(wǎng)箱養(yǎng)殖大黃魚與天然大黃魚營養(yǎng)成分的比較分析[J]. 段青源,鐘惠英,斯列鋼,麥康森.  浙江海洋學院學報(自然科學版). 2000(02)



本文編號：3229396