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齊口裂腹魚MCH、CRH和GnRH2基因的克

發(fā)布時間:2021-05-25 19:45
  為研究黑色素聚集激素(melanin-concentrating hormone,MCH)、促腎上腺皮質激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone, CRH)和促性腺激素釋放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)基因在齊口裂腹魚攝食調控中發(fā)揮的作用,本試驗首先利用RT-PCR和RACE技術首次克隆了齊口裂腹魚(Schizothorax prenanti)MCH、CRH和GnRH2的cDNA全序列;隨后運用熒光定量PCR技術對MCH、CRH和GnRH2在不同組織的分布進行了檢測;最后研究在不同攝食狀態(tài)下MCH、CRH和GnRH2 mRNA在下丘腦表達的影響變化。研究結果表明:齊口裂腹魚MCH cDNA全長序列為589bp,其中5’非編碼區(qū)(5’-UTR)66bp,3’非編碼區(qū)(3’-UTR)148 bp,開放閱讀框(ORF)375bp,編碼124個氨基酸包括N末端24個氨基酸的信號肽、C末端17個氨基酸的成熟肽和13個氨基酸的神經肽Mgrp,與金魚(Carassius auratus)的MCH的序列同源性最高,相似... 

【文章來源】:四川農業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
一、文獻綜述
    1. MCH、CRH和GNRH2的結構
        1.1 MCH的結構
        1.2 CRH的結構
        1.3 GnRH2的結構
    2. MCH、CRH和GNRH2的分布
        2.1 MCH的分布
        2.2 CRH的分布
        2.3 GnRH2的分布
    3. MCH、CRH和GNRH2的生物學功能
        3.1 MCH的生物學功能
        3.2 CRH的生物學功能
        3.3 GnRH2的生物學功能
    4 本論文研究的目的和意義
二、齊口裂腹魚MCH、CRH和GNRH2基因的克隆
    1 材料
        1.1 動物材料
        1.2 試劑
        1.3 主要儀器設備
    2 方法
        2.1 總RNA的抽提
        2.2 RACE擴增
        2.3 目的片段的分離和回收
        2.4 連接和轉化
        2.5 菌落PCR及測序
        2.6 基因序列分析
    3 結果
        3.1 MCH基因的克隆和序列分析
        3.2 CRH基因的克隆和序列分析
        3.3 GnRH2基因的克隆和序列分析
    4 分析與討論
        4.1 MCH基因的系統(tǒng)分析
        4.2 CRH基因的系統(tǒng)分析
        4.3 GnRH2基因的系統(tǒng)分析
三 齊口裂腹魚MCH、CRH和GNRH2基因的分布
    1 動物材料
    2 方法
        2.1 引物設計與檢測
        2.2 實時熒光定量
        2.3 數(shù)據分析
    3 結果
    4 分析與討論
        4.1 MCH在不同組織的表達
        4.2 CRH在不同組織的表達
        4.3 GnRH2在不同組織的表達
四 不同攝食水平對MCH、CRH和GNRH2表達水平的影響
    1 動物材料
    2 方法
        2.1 餐前餐后對MCH、CRH和GnRH2表達水平的影響
        2.2 長期禁食對MCH、CRH和GnRH2表達水平的影響
    3 結果
        3.1 禁食對MCH表達的影響
        3.2 禁食對CRH表達的影響
        3.3 禁食對GnRH2表達的影響
    4 分析與討論
結論
參考文獻
致謝
附錄
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本文編號:3205905

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