DHA誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡的作用及其機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-23 17:39
脂肪組織是動(dòng)物機(jī)體主要的儲(chǔ)能器官之一,主要作用是以甘油三酯的形式儲(chǔ)存機(jī)體內(nèi)過(guò)度的能量。脂肪組織主要由脂肪細(xì)胞組成,脂肪細(xì)胞是儲(chǔ)存甘油三酯的基本單位。二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)屬于n-3系列長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(n-3LC-PUFAs)的一種,在生長(zhǎng)發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)、脂質(zhì)代謝等過(guò)程中發(fā)揮重要作用。細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的一種程序性死亡,涉及一系列酶及信號(hào)分子參與。有研究表明DHA能夠調(diào)控草魚脂質(zhì)蓄積,但是潛在的機(jī)制尚不清楚。本研究以草魚為研究對(duì)象,探討DHA對(duì)脂質(zhì)蓄積的作用、對(duì)脂肪細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制,以期為淡水魚類脂代謝提供一定的參考依據(jù)。獲得的主要結(jié)果如下:1、日糧中添加0.52%的DHA降低草魚腹腔脂肪脂質(zhì)蓄積。在日糧中分別添加0%(對(duì)照組)及0.52%(試驗(yàn)組)的DHA,飼喂初始重為22.19±1.76 g的草魚稚魚3周、6周后,解剖得到草魚腹腔脂肪組織,氣相色譜法檢測(cè)脂肪酸相對(duì)含量,蘇木精-伊紅染色觀察脂肪細(xì)胞形態(tài)變化,甘油三酯試劑盒檢測(cè)脂肪組織甘油三酯含量,RT-PCR檢測(cè)脂代謝相關(guān)基因mRNA水平,western blot檢測(cè)脂代謝相關(guān)蛋白表達(dá)水...
【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 二十二碳六烯酸(DHA)
1.1.1 DHA的化學(xué)結(jié)構(gòu)
1.1.2 DHA的來(lái)源
1.1.3 DHA的體內(nèi)合成
1.2 脂肪組織與脂質(zhì)蓄積
1.2.1 脂肪組織
1.2.2 脂肪細(xì)胞
1.2.3 脂質(zhì)代謝
1.2.4 DHA對(duì)脂質(zhì)蓄積調(diào)控的研究進(jìn)展
1.3 細(xì)胞凋亡
1.3.1 細(xì)胞凋亡的生物化學(xué)特征
1.3.2 細(xì)胞凋亡的途徑
1.3.3 脂肪細(xì)胞凋亡及特性
1.4 草魚
1.5 本研究的目的與意義
第二章 DHA影響草魚脂肪細(xì)胞凋亡的在體研究
2.1 材料與方法
2.1.1 試驗(yàn)草魚
2.1.2 試驗(yàn)飼料
2.1.3 飼養(yǎng)及采樣
2.1.4 脂肪酸組成分析
2.1.5 蘇木精-伊紅(HE)染色
2.1.6 甘油三酯含量檢測(cè)
2.1.7 實(shí)時(shí)定量PCR分析
2.1.8 蛋白免疫印跡檢測(cè)
2.1.9 統(tǒng)計(jì)分析
2.2 結(jié)果
2.2.1 日糧中添加DHA對(duì)草魚生長(zhǎng)及生物學(xué)性狀的影響
2.2.2 日糧中添加DHA對(duì)草魚腹腔脂肪組織脂肪酸含量的影響
2.2.3 日糧中添加DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞大小的影響
2.2.4 日糧中添加DHA對(duì)草魚脂肪組織甘油三酯含量的影響
2.2.5 日糧中添加DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞分化相關(guān)基因表達(dá)的影響
2.2.6 日糧中添加DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞凋亡相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 離體探究DHA誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制
3.1 材料與方法
3.1.1 試驗(yàn)草魚
3.1.2 草魚前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)
3.1.3 細(xì)胞活力檢測(cè)
3.1.4 脂肪細(xì)胞凋亡率檢測(cè)
3.1.5 Real-timePCR檢測(cè)相關(guān)基因mRNA的表達(dá)水平
3.1.6 WesternBlot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)情況
3.1.7 凋亡相關(guān)蛋白酶活性的變化
3.1.8 數(shù)據(jù)分析
3.2 結(jié)果
3.2.1 DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞活力的影響
3.2.2 DHA以劑量依賴的方式誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡
3.2.3 DHA以時(shí)間依賴的方式誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡
3.2.4 DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響
3.2.5 DHA上調(diào)了草魚脂肪細(xì)胞中PPARγ的表達(dá)水平
3.2.6 DHA以PPARγ依賴的方式促進(jìn)草魚脂肪細(xì)胞凋亡
3.2.7 DHA誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡可能通過(guò)內(nèi)源性途徑
3.3 討論
3.4 小結(jié)
第四章 綜合討論與結(jié)論
4.1 綜合討論
4.2 結(jié)論
4.3 創(chuàng)新點(diǎn)
4.4 下一步研究計(jì)劃
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不同來(lái)源DHA提取技術(shù)及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 李鶴,胡文忠,姜愛麗,于雪,王倩影. 食品工業(yè)科技. 2017(07)
[2]DHA對(duì)宮頸癌細(xì)胞株凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移的影響[J]. 楊翠,張廣平,陳詠寧,孟凡良,劉士三,龔時(shí)鵬. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)
[3]高不飽和脂肪酸(HUFAs)在淡水魚類中的營(yíng)養(yǎng)作用研究進(jìn)展[J]. 吉紅,田晶晶. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2014(09)
[4]煙酰胺削弱羅格列酮誘導(dǎo)豬前體脂肪細(xì)胞凋亡的作用與分子機(jī)制[J]. 龐衛(wèi)軍,許儒祥,熊燕,孫世鐸,楊公社. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(18)
[5]羅格列酮對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期及蛋白質(zhì)表達(dá)的影響[J]. 彭利,徐卓,周燁,楊濤,梁占強(qiáng),張萌. 中華肝臟病雜志. 2010 (02)
[6]飼料中HUFA影響草魚脂質(zhì)代謝的研究[J]. 吉紅,曹艷姿,劉品,蘇尚順,林亞秋,曹福余,奧宏海,周繼術(shù),葉元土. 水生生物學(xué)報(bào). 2009(05)
[7]n-3高不飽和脂肪酸對(duì)黑鯛幼魚生長(zhǎng)及脂肪代謝的影響[J]. 馬晶晶,邵慶均,許梓榮,周凡,鐘觀運(yùn),宋文新,Owari Ngandeali Bergo. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2009(04)
[8]二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸研究進(jìn)展(1)[J]. 許友卿,張海柱,丁兆坤. 生物學(xué)通報(bào). 2007(11)
[9]n-3多不飽和脂肪酸DHA、EPA研究進(jìn)展[J]. 朱路英,張學(xué)成,宋曉金,況成宏,孫遠(yuǎn)征. 海洋科學(xué). 2007(11)
[10]淺議DHA、EPA及其應(yīng)用[J]. 張道雷,陳瑤,周廣田,李敬龍. 中國(guó)調(diào)味品. 2007(10)
碩士論文
[1]EGCG通過(guò)抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑減輕高糖致足細(xì)胞損傷[D]. 項(xiàng)春紅.山東大學(xué) 2017
本文編號(hào):3155752
【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 二十二碳六烯酸(DHA)
1.1.1 DHA的化學(xué)結(jié)構(gòu)
1.1.2 DHA的來(lái)源
1.1.3 DHA的體內(nèi)合成
1.2 脂肪組織與脂質(zhì)蓄積
1.2.1 脂肪組織
1.2.2 脂肪細(xì)胞
1.2.3 脂質(zhì)代謝
1.2.4 DHA對(duì)脂質(zhì)蓄積調(diào)控的研究進(jìn)展
1.3 細(xì)胞凋亡
1.3.1 細(xì)胞凋亡的生物化學(xué)特征
1.3.2 細(xì)胞凋亡的途徑
1.3.3 脂肪細(xì)胞凋亡及特性
1.4 草魚
1.5 本研究的目的與意義
第二章 DHA影響草魚脂肪細(xì)胞凋亡的在體研究
2.1 材料與方法
2.1.1 試驗(yàn)草魚
2.1.2 試驗(yàn)飼料
2.1.3 飼養(yǎng)及采樣
2.1.4 脂肪酸組成分析
2.1.5 蘇木精-伊紅(HE)染色
2.1.6 甘油三酯含量檢測(cè)
2.1.7 實(shí)時(shí)定量PCR分析
2.1.8 蛋白免疫印跡檢測(cè)
2.1.9 統(tǒng)計(jì)分析
2.2 結(jié)果
2.2.1 日糧中添加DHA對(duì)草魚生長(zhǎng)及生物學(xué)性狀的影響
2.2.2 日糧中添加DHA對(duì)草魚腹腔脂肪組織脂肪酸含量的影響
2.2.3 日糧中添加DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞大小的影響
2.2.4 日糧中添加DHA對(duì)草魚脂肪組織甘油三酯含量的影響
2.2.5 日糧中添加DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞分化相關(guān)基因表達(dá)的影響
2.2.6 日糧中添加DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞凋亡相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 離體探究DHA誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制
3.1 材料與方法
3.1.1 試驗(yàn)草魚
3.1.2 草魚前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)
3.1.3 細(xì)胞活力檢測(cè)
3.1.4 脂肪細(xì)胞凋亡率檢測(cè)
3.1.5 Real-timePCR檢測(cè)相關(guān)基因mRNA的表達(dá)水平
3.1.6 WesternBlot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)情況
3.1.7 凋亡相關(guān)蛋白酶活性的變化
3.1.8 數(shù)據(jù)分析
3.2 結(jié)果
3.2.1 DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞活力的影響
3.2.2 DHA以劑量依賴的方式誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡
3.2.3 DHA以時(shí)間依賴的方式誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡
3.2.4 DHA對(duì)草魚脂肪細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響
3.2.5 DHA上調(diào)了草魚脂肪細(xì)胞中PPARγ的表達(dá)水平
3.2.6 DHA以PPARγ依賴的方式促進(jìn)草魚脂肪細(xì)胞凋亡
3.2.7 DHA誘導(dǎo)草魚脂肪細(xì)胞凋亡可能通過(guò)內(nèi)源性途徑
3.3 討論
3.4 小結(jié)
第四章 綜合討論與結(jié)論
4.1 綜合討論
4.2 結(jié)論
4.3 創(chuàng)新點(diǎn)
4.4 下一步研究計(jì)劃
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不同來(lái)源DHA提取技術(shù)及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 李鶴,胡文忠,姜愛麗,于雪,王倩影. 食品工業(yè)科技. 2017(07)
[2]DHA對(duì)宮頸癌細(xì)胞株凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移的影響[J]. 楊翠,張廣平,陳詠寧,孟凡良,劉士三,龔時(shí)鵬. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)
[3]高不飽和脂肪酸(HUFAs)在淡水魚類中的營(yíng)養(yǎng)作用研究進(jìn)展[J]. 吉紅,田晶晶. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2014(09)
[4]煙酰胺削弱羅格列酮誘導(dǎo)豬前體脂肪細(xì)胞凋亡的作用與分子機(jī)制[J]. 龐衛(wèi)軍,許儒祥,熊燕,孫世鐸,楊公社. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(18)
[5]羅格列酮對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期及蛋白質(zhì)表達(dá)的影響[J]. 彭利,徐卓,周燁,楊濤,梁占強(qiáng),張萌. 中華肝臟病雜志. 2010 (02)
[6]飼料中HUFA影響草魚脂質(zhì)代謝的研究[J]. 吉紅,曹艷姿,劉品,蘇尚順,林亞秋,曹福余,奧宏海,周繼術(shù),葉元土. 水生生物學(xué)報(bào). 2009(05)
[7]n-3高不飽和脂肪酸對(duì)黑鯛幼魚生長(zhǎng)及脂肪代謝的影響[J]. 馬晶晶,邵慶均,許梓榮,周凡,鐘觀運(yùn),宋文新,Owari Ngandeali Bergo. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2009(04)
[8]二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸研究進(jìn)展(1)[J]. 許友卿,張海柱,丁兆坤. 生物學(xué)通報(bào). 2007(11)
[9]n-3多不飽和脂肪酸DHA、EPA研究進(jìn)展[J]. 朱路英,張學(xué)成,宋曉金,況成宏,孫遠(yuǎn)征. 海洋科學(xué). 2007(11)
[10]淺議DHA、EPA及其應(yīng)用[J]. 張道雷,陳瑤,周廣田,李敬龍. 中國(guó)調(diào)味品. 2007(10)
碩士論文
[1]EGCG通過(guò)抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑減輕高糖致足細(xì)胞損傷[D]. 項(xiàng)春紅.山東大學(xué) 2017
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