鯉春病毒（Spring Viremia of Carp Virus,SVCV）是一種彈狀病毒,主要發(fā)生于春季,它可以引起鯉科魚類的魚苗或成魚大規(guī)模暴發(fā)鯉春病毒血癥（SVC）。傳染性胰臟壞死病毒（Infectious Pancreatic Necrosis Virus,IPNV）為雙片段 RNA 病毒,引起傳染性胰臟壞死�。↖PN）,該病屬于世界性魚病,主要危害虹鱒、大西洋鮭、大菱鉀大西洋鱈等十余種常見養(yǎng)殖魚類的魚苗。兩種病毒均屬于傳染性病毒,疫情一旦發(fā)生,對(duì)漁業(yè)養(yǎng)殖造成嚴(yán)重危害。本研究中首先用海水鯉科魚類細(xì)胞系（FHM）對(duì)經(jīng)過純化的SVCV和IPNV凍存樣品進(jìn)行增殖培養(yǎng)直至出現(xiàn)典型病變并收毒。通過設(shè)計(jì)的引物對(duì)兩種病毒進(jìn)行基因擴(kuò)增,得到片段大小為714bp的SVCV、224bp的IPNV。然后連接到pMD18-T載體上構(gòu)建重組質(zhì)粒并進(jìn)行測(cè)序,測(cè)序結(jié)果經(jīng)NCBI在線nucleotide blast分析,再利用DNAStar構(gòu)建核酸進(jìn)化樹,序列與SVCV糖蛋白核酸序列相似性高達(dá)99%,IPNV核苷酸同源率為79.9%-98.2%。將適量SVCV、IPNV細(xì)胞培養(yǎng)液喂養(yǎng)并注射進(jìn)行人工感染。對(duì)出... 

【文章來源】：大連工業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１患ＳＶＣＶ魚病癥??Ｆｉｇ．?１－１?Ｃｌｉｎｉｃａｌ?ｓｉｇｎｓ?ｏｆ?ＳＶＣＶ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃａｒｐ??

第一章文獻(xiàn)綜述緊接著較小的魚苗中就會(huì)出現(xiàn)急性或者慢性發(fā)病癥狀，病集隊(duì)游動(dòng)。發(fā)病后期，有時(shí)病魚表現(xiàn)出漫無目的急游、翻邊緣或者進(jìn)出水口附近，反復(fù)如此運(yùn)動(dòng)直至死亡。病魚胸、基部有出血點(diǎn)。將被感染ＩＰＮＶ的死魚進(jìn)行解剖，魚的肝和腺有出血以及少量壞死病灶，消化道內(nèi)沒有存留食物，有

⑵提�。遥危粒�??①分別取一支２０（ＶＬ病毒擴(kuò)增液，兩支病魚樣品，和一支作為陰性對(duì)照的滅菌水。??②按照２．２．２．１提�。遥危�。??（３）ＰＣＲ?檢測(cè)：??應(yīng)用ＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)ＳＶＣＶ、ＩＰＮＶ，反應(yīng)體系以及條件見２．２．２．２。反應(yīng)結(jié)束后，ＲＴ－ＰＣＲ??產(chǎn)物經(jīng)１．５％瓊脂糖凝膠電泳鑒定。觀察是否出現(xiàn)的目的片段。??３結(jié)果與討論??．?１病毒增殖結(jié)果??在本次試驗(yàn)中選用了ＥＰＣ，?ＦＨＭ，?ＣＨＳＥ這三種不同的接毒細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和接毒來??在不同的細(xì)胞中ＳＶＣＶ、ＩＰＮＶ感染情況。在這對(duì)三種細(xì)胞的培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)ＥＰＣ和??Ｍ的長(zhǎng)勢(shì)比較良好，剛開始，一般在傳代之后的２ｄ左右細(xì)胞可以單層鋪滿培養(yǎng)瓶的??，可以再次進(jìn)行傳代，而ＣＨＳＥ—般在４ｄ左右。但隨著傳代次數(shù)的增加細(xì)胞鋪滿底??時(shí)間則會(huì)加長(zhǎng)。以下是ＥＰＣ，?ＦＨＭ，?ＣＨＳＥ這三種細(xì)胞單層鋪滿狀態(tài)的圖片。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和基因芯片技術(shù)的研究及在主要水生動(dòng)物病毒檢疫和監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用[D]. 劉葒.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004



本文編號(hào)：3101894