本實驗旨在研究持續(xù)性和非持續(xù)投喂枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌及其復合菌對軍曹魚幼魚生長性能、免疫酶、消化酶、腸道菌群結(jié)構(gòu)及TLR9基因表達量的影響,為益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用提供指導。選取平均體重為22.0±0.15g的健康軍曹魚幼魚840尾,隨機分成7個處理（組號:T0、T1、T2、T3、T4、T5、T6）,每處理3重復,重復40尾魚。T0組投喂基礎(chǔ)飼料,T1、T2、T3組前30d分別投喂含枯草芽孢桿菌1×107cfu/g、嗜酸乳桿菌1×107cfu/g、含枯草芽孢桿菌+嗜酸乳桿菌（1:1）2×107cfu/g的飼料,后20d投喂基礎(chǔ)飼料;T4、T5和T6組分別投喂T1、T2、T3組飼料50d,分別在0d、10d、20d、30d、40d、50d檢測各實驗組血清LZM、SOD、ACP和AKP活性;在0d、30d、50d時獲取軍曹魚的腸道,通過高通量測序技術(shù)和PCR-DGGE技術(shù)分析其腸道菌群結(jié)構(gòu)與多樣性,并對優(yōu)勢菌群進行物種注釋。在實驗結(jié)束時稱重,計算各處理組的生長性能,并測定肝臟和腸道淀粉酶、蛋白酶活性,測定軍曹魚TLR9基因在肝臟、腎臟、脾臟和腸道中的表達量。結(jié)果表明:T0、T1和T... 

【文章來源】：廣東海洋大學廣東省

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 軍曹魚生物學特征及養(yǎng)殖概況
        1.1.1 軍曹魚生物學特征
        1.1.2 軍曹魚養(yǎng)殖概況
    1.2 益生菌及其在魚類中的應(yīng)用
        1.2.1 益生菌的定義
        1.2.2 益生菌的特性及生理功能
        1.2.3 益生菌的作用機理
        1.2.4 益生菌在魚類中的應(yīng)用
        1.2.5 益生菌的研究及應(yīng)用中存在的問題
        1.2.6 展望
    1.3 魚類腸道菌群及研究技術(shù)
        1.3.1 魚類腸道菌群的形成
        1.3.2 魚類腸道菌群的數(shù)量和組成
        1.3.3 魚類腸道菌群對魚類機體健康的影響
        1.3.4 腸道菌群的分析技術(shù)
    1.4 研究目的及意義
2 二種益生菌對軍曹魚生長性能、免疫酶及消化酶活性的影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗主要儀器
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 益生菌種類及增殖
        2.1.4 實驗設(shè)計及飼料制作
        2.1.5 實驗用魚及飼養(yǎng)管理
        2.1.6 樣品采集及分析方法
        2.1.7 計算公式及統(tǒng)計分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 益生菌對軍曹魚幼魚生長性能的影響
        2.2.2 益生菌對軍曹魚幼魚血清免疫酶活性的影響
        2.2.3 益生菌對軍曹魚幼魚消化酶活性的影響
    2.3 討論
        2.3.1 益生菌對軍曹魚幼魚生長性能的影響
        2.3.2 益生菌對軍曹魚幼魚血清免疫酶的影響
        2.3.3 益生菌對軍曹魚幼魚肝臟及腸道淀粉酶、蛋白酶活性的影響
    2.4 小結(jié)
3 二種益生菌對軍曹魚腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗設(shè)計及儀器試劑
        3.1.2 樣品采集
        3.1.3 腸道菌群總DNA的提取
        3.1.4 細菌 16S rDNA V3區(qū)PCR擴增
        3.1.5 細菌基因組總DNA 16S rDNA V3區(qū)擴增片段DGGE分析
        3.1.6.數(shù)據(jù)統(tǒng)計與處理
    3.2 實驗結(jié)果
        3.2.1 腸道細菌總DNA瓊脂糖電泳結(jié)果
        3.2.2 細菌 16S rDNA V3區(qū)PCR擴增瓊脂糖電泳
        3.2.3 腸道細菌DGGE電泳圖
        3.2.4 軍曹魚前腸菌群結(jié)構(gòu)分析
        3.2.5 軍曹魚后腸菌群結(jié)構(gòu)分析
    3.3 討論
        3.3.1 不同益生菌對軍曹魚幼魚前腸菌群結(jié)構(gòu)的影響
        3.3.2 不同益生菌對軍曹魚幼魚后腸菌群結(jié)構(gòu)的影響
    3.4 小結(jié)
4 二種益生菌對軍曹魚TLR9基因表達的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實驗設(shè)計及儀器試劑
        4.1.2 樣品組織的獲取
        4.1.3 組織總RNA的抽提
        4.1.4 總RNA完整性及濃度的檢測
        4.1.5 總RNA反轉(zhuǎn)成cDNA第一鏈
        4.1.6 TLR9基因表達量的測定
        4.1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與處理
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 軍曹魚幼魚不同組織總RNA瓊脂糖電泳結(jié)果
        4.2.2 益生菌對軍曹魚幼魚肝臟TLR9基因表達量的影響
        4.2.3 益生菌對軍曹魚幼魚腎臟TLR9基因表達量的影響
        4.2.4 益生菌對軍曹魚幼魚脾臟TLR9基因表達量的影響
        4.2.5 益生菌對軍曹魚幼魚腸道TLR9基因表達量的影響
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
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導師簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]池塘和工廠化養(yǎng)殖牙鲆腸道菌群結(jié)構(gòu)的比較分析[J]. 李存玉,徐永江,柳學周,楊洪軍,史寶,史學營,朱學武.  水產(chǎn)學報. 2015(02)
[2]一種復合益生菌對斜帶石斑魚生長及免疫特性影響的研究[J]. 李小梅,楊麗冬,張家學,舒琥,張海發(fā).  飼料工業(yè). 2015(02)
[3]基于高通量測序的池塘養(yǎng)殖半滑舌鰨消化道菌群的結(jié)構(gòu)特征分析[J]. 張正,李彬,王印庚,廖梅杰,王嵐,榮小軍.  水生生物學報. 2015(01)
[4]基于高通量測序技術(shù)分析腸道菌群及其影響因素的研究進展[J]. 鄭藝,張家超,郭壯,張和平.  中國食品學報. 2014(11)
[5]兩種疾病發(fā)生對養(yǎng)殖半滑舌鰨腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響分析[J]. 張正,廖梅杰,李彬,王印庚,王嵐,榮小軍,陳貴平.  水產(chǎn)學報. 2014(09)
[6]飼料中添加枯草芽孢桿菌對吉富羅非魚幼魚生長性能、免疫力和抗氧化功能的影響[J]. 程遠,黃凱,黃秀蕓,鐘靈香,武林華,黃清,唐麗寧.  動物營養(yǎng)學報. 2014(06)
[7]魚類腸道微生物的研究進展[J]. 楊彬彬,邵慶均.  中國飼料. 2013(23)
[8]不同月份養(yǎng)殖草魚幼魚消化道微生物群落動態(tài)變化研究[J]. 倪加加,余育和.  水產(chǎn)學報. 2013(10)
[9]乳酸菌及其代謝產(chǎn)物對刺參幼體腸道菌群和非特異性免疫的影響[J]. 宮魁,王寶杰,劉梅,蔣克勇,邱楚雯,駱作勇,范瑞用,王雷.  海洋科學. 2013(07)
[10]復合益生菌對草魚養(yǎng)殖水體水質(zhì)和菌群結(jié)構(gòu)的影響[J]. 鄭佳佳,彭麗莎,張小平,孫健棟,傅羅琴,王一冰,胡彩虹,李衛(wèi)芬.  水產(chǎn)學報. 2013(03)

博士論文
[1]養(yǎng)殖半滑舌鰨常見疾病的病理學觀察與感染微生態(tài)分析[D]. 張正.中國海洋大學 2012
[2]對蝦微生態(tài)制劑的研究和應(yīng)用[D]. 李繼秋.中國海洋大學 2004

碩士論文
[1]鮑病原菌的分離、鑒定及微生物群落動態(tài)變化與病害相關(guān)性研究[D]. 侍瀏洋.廈門大學 2014
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[3]地衣芽孢桿菌KL6對鯉魚生產(chǎn)性能及消化酶活性的影響[D]. 劉陽.天津師范大學 2012
[4]魚類腸道可定植乳酸桿菌分子生態(tài)的研究[D]. 王雯雯.中國農(nóng)業(yè)科學院 2011
[5]不同組合益生菌對鯽魚生長性能、免疫功能及腸道菌群結(jié)構(gòu)影響研究[D]. 張強.四川農(nóng)業(yè)大學 2010
[6]果寡糖、甘露寡糖和芽孢桿菌對牙鲆免疫功能和腸道微生態(tài)的影響[D]. 李富東.集美大學 2010
[7]餌料中添加芽孢桿菌對草魚生長的影響及機理探討[D]. 陳南南.浙江大學 2010
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[9]養(yǎng)殖魚腸道菌群分子生態(tài)的研究[D]. 黃光祥.華中農(nóng)業(yè)大學 2008
[10]益生素對異育銀鯽消化酶活性、腸道菌群及生產(chǎn)性能的影響[D]. 劉波.南京農(nóng)業(yè)大學 2004



本文編號：3089980