利用反向點(diǎn)雜交技術(shù),研制靈敏度較高的南美白對(duì)蝦4種病原體檢測(cè)試劑盒,其檢測(cè)指標(biāo)包括致對(duì)蝦急性肝胰腺壞死病副溶血弧菌（VpAHPND）、對(duì)蝦白斑綜合征病毒（WSSV）、對(duì)蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）、對(duì)蝦肝腸胞蟲(chóng)（EHP）,用重組質(zhì)粒分別對(duì)其進(jìn)行了最低檢測(cè)限測(cè)試,并與現(xiàn)有推薦方法進(jìn)行比較。本研究研發(fā)的檢測(cè)試劑盒對(duì)4種病原體的最低檢測(cè)限為1μl 10～100拷貝。特異性檢測(cè)結(jié)果表明,4種病原體彼此不產(chǎn)生交叉反應(yīng),特異性良好,與各病原體推薦檢測(cè)方法的結(jié)果相比,陽(yáng)性符合率完全一致。本研究研發(fā)的檢測(cè)試劑盒具有操作方便,靈敏度高,特異性好,檢測(cè)時(shí)間短,設(shè)備要求簡(jiǎn)單等特點(diǎn),適合應(yīng)用于南美白對(duì)蝦VpAHPND、WSSV、IHHNV、EHP的檢測(cè)、篩查工作中。 

【文章來(lái)源】：江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,36(03)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

普通PCR法和生物芯片法對(duì)IHHNV的檢測(cè)結(jié)果

表2 探針及其序列Table 2 Sequences of the probes used in this study 探針名稱 序列 (5′→3′) 探針長(zhǎng)度 (bp) 檢測(cè)對(duì)象 Pir-P AGGAAAACCAACAGCAGGTGA 21 pirB 基因 EHP-P CATCGCTCTCGCAACACCCA 20 對(duì)蝦肝腸胞蟲(chóng) vp28-P TAGAGACGGGGGTGAAGGAG 20 對(duì)蝦白斑綜合征病毒 IHHNV-P CTTTCGGCGTGTTCTTCGTC 20 對(duì)蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒 18S rDNA-P CTAGGGCGGTATCTGATCGC 20 南美白對(duì)蝦 HC TTTTTTTAAATGTTGGGGAA 20 擴(kuò)增產(chǎn)物1.2.5 對(duì)蝦組織樣本提取

圖5顯示,將最低檢測(cè)限濃度的質(zhì)粒與陰性蝦基因組混合,VpAHPND、WSSV、IHHNV的最低檢測(cè)限可達(dá)到1 μl 10拷貝,EHP的最低檢測(cè)限為1 μl 100拷貝,VpAHPND、IHHNV、WSSV、EHP在最低檢測(cè)限下的信號(hào)均明顯增強(qiáng)。圖3 生物芯片檢測(cè)體系雜交時(shí)間的優(yōu)化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3075580