大黃魚(yú)（Larimichthys crocea）,隸屬鱸形目、石首魚(yú)科（Sciaenidae）,曾廣泛分布于中國(guó)東海、南海以及黃海南部,是我國(guó)特有的地方性魚(yú)類。大黃魚(yú)現(xiàn)已發(fā)展成為我國(guó)海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖量最大的魚(yú)種,具有很高的經(jīng)濟(jì)效益。近年來(lái),由弧菌屬細(xì)菌引起的弧菌病呈爆發(fā)趨勢(shì)。該病傳播速度快、死亡率高,對(duì)大黃魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重沖擊。補(bǔ)體是魚(yú)類免疫系統(tǒng)最重要的組成部分,具有識(shí)別和消除外來(lái)病原體,激活免疫細(xì)胞,調(diào)控獲得性免疫等功能。在免疫組織中,補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子大約占據(jù)了補(bǔ)體成分的二分之一,當(dāng)受到外界病原刺激時(shí)會(huì)迅速活化為補(bǔ)體成分,并且進(jìn)一步聚合形成酶復(fù)合物發(fā)揮一系列免疫效應(yīng)。本文以大黃魚(yú)為對(duì)象研究補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子CFH、CFHR1、CFHR2在大黃魚(yú)組織中的表達(dá)特異性,并通過(guò)溶藻弧菌侵染大黃魚(yú)實(shí)驗(yàn)研究補(bǔ)體調(diào)節(jié)基因的急相反應(yīng),對(duì)基因序列進(jìn)行了生物信息學(xué)和系統(tǒng)進(jìn)化分析,并對(duì)功能進(jìn)行初步探索。一、從大黃魚(yú)基因數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得三種補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子cDNA序列:L.c-cfh cDNA全長(zhǎng)1332bp,編碼443個(gè)氨基酸,多肽相對(duì)分子質(zhì)量為49.96KDa,等電點(diǎn)為6.66,GenBank登錄號(hào)為KP710858;L.... 

【文章來(lái)源】：浙江海洋大學(xué)浙江省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

魚(yú)類補(bǔ)體系統(tǒng)的激活途徑（引自王志平）

圖 1-2 RCA 家族主要成員及分類（引自王菲）Fig. 1-2 The RCA family genes and their classify.1.4.2 CFH 及其相關(guān)蛋白的研究進(jìn)展CFH 是 RCA 家族的重要成員，也是替代途徑中最重要的鑒別成分，CFH 能與胞膜結(jié)合形成膜結(jié)合蛋白識(shí)別自身與外源細(xì)胞[53]。它在 C3b 的表面有多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)在體液中和細(xì)胞表面都能發(fā)揮作用，能夠有效地抑制 factor B 與 C3b 結(jié)合形成 C3 化酶。它既可以在液相中發(fā)揮作用，還能在細(xì)胞表面調(diào)節(jié)補(bǔ)體的激活。此外在替代徑中還可以促進(jìn) CFI 有效酶解 C3b，進(jìn)一步阻止 C3 轉(zhuǎn)化酶的形成[54]。在人體中，些補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子的基因都緊密連鎖在 1 號(hào)染色體的長(zhǎng)臂上(1q32)[55]，CFHR1-5 基因位于 CFH 基因下游，相互之間具有很高的同源性，而且它們主要都在肝臟中表達(dá)受到外源病菌侵襲后，魚(yú)類肝臟能快速作出免疫應(yīng)答，大量合成補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子 CF

圖 2-1 用于序列擴(kuò)增的肝組織的總 RNA 電泳圖ctrophoresis of extracted total RNA from the liver of L體調(diào)節(jié)因子 CFH(Lc-cfh)基因全長(zhǎng) CDNA 的全基因組數(shù)據(jù)庫(kù)，獲得了 L.c-cfh 序列，基因’端的起始密碼子(ATG)和 3’端的終止密碼子k 數(shù)據(jù)庫(kù)，數(shù)據(jù)庫(kù)的登錄號(hào)為 KP710858。利讀框進(jìn)行搜索，發(fā)現(xiàn)其 ORF(open reading fra端含有 24 個(gè)氨基酸的信號(hào)肽序列(用紅色下劃 預(yù)測(cè)的多肽的分子量約為 49.96kDa，編碼一，等電點(diǎn)為 6.66。使用 DNAMAN 得到其多肽 2-2 所示，其中含有 100 個(gè)疏水氨基酸 64 個(gè)列存在 1 個(gè)潛在的 N-糖基化位點(diǎn)(Asn237)。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：2980301