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錦鯉皰疹病毒的分離鑒定及急性和潛伏感染檢測方法的建立

發(fā)布時間:2021-01-04 05:30
  錦鯉皰疹病毒(Koi herpesvirus[KHV]),2005年重新命名為鯉皰疹病毒Ⅲ型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3),屬于Allloherpesviridae科,自然宿主為普通鯉魚和錦鯉,死亡率高達80%-100%。1998年報道至今,短短十幾年,除了北非,全世界都有KHVD暴發(fā)引起大面積鯉魚死亡的報道。因此,KHV已成為全球進出口貿(mào)易重點檢測對象,KHV疾病也是OIE要求必須上報的重大疾病,我國農(nóng)業(yè)部將其定為Ⅱ類動物疫病。KHV致病性強,發(fā)病急,死亡率高,傳播速度快,嚴重威脅著鯉魚和錦鯉養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,給全世界的淡水養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。錦鯉皰疹病毒感染的表現(xiàn)形式可以分為急性感染和潛伏感染。急性感染時,病毒大量復制,表現(xiàn)為錦鯉皰疹病毒病臨床癥狀。潛伏感染時,病毒以非整合狀態(tài)的基因組形態(tài)游離在宿主細胞核內(nèi),一定條件下病毒可重新被激活引起宿主臨床癥狀并導致死亡,這是導致KHV呈世界性流行和快速傳播的一個重要原因。因此,建立快速準確檢測KHV的方法在防控疾病的流行和傳播中具有重要意義。本研究從四川某鯉魚養(yǎng)殖場暴發(fā)的傳染病中分離得到一株KHV病毒,并... 

【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

錦鯉皰疹病毒的分離鑒定及急性和潛伏感染檢測方法的建立


圖2-1鰓組織嚴重壞死??Fig.2-1?Gill?tissue?of?pathogenesis?fish??

病毒,效應,人工感染實驗,漁網(wǎng)


0?3?6?9?12?15?18?21??感染后天數(shù)/d??圖2-3組織懸液人工感染實驗結(jié)果??Fig.2-3?Result?of?artificial?infection?experiment?with?the?tissue?suspension??3.4病毒分離??病魚組織勻漿濾菌并感染CCB細胞后,盲傳3代可以穩(wěn)定地觀察到典型的細胞病??變效應(CPE),細胞融合、聚集、后期呈破漁網(wǎng)狀(圖2-4b),而對照組CCB細胞生長??致密且無空泡出現(xiàn)(圖2-4a),將病毒株分離株暫命名為KHV-SC。??(a)?(b)??圖2-4?CCB細胞接種病毒后產(chǎn)生病變效應??(a)?CCB正常細胞單層(x100)?;?(?b?)接種組織勻漿液6?d后的CCB細胞(x100?)??Fig.2-4?Cytopathogenic?effects?of?the?CCB?cells?infected?with?the?virus??(a)?Negative?control?cells(xlOO);?(b)?CCB?cells?infected?by?virus(xlOO)??27??

人工感染實驗,懸液


3.4病毒分離??病魚組織勻漿濾菌并感染CCB細胞后,盲傳3代可以穩(wěn)定地觀察到典型的細胞病??變效應(CPE),細胞融合、聚集、后期呈破漁網(wǎng)狀(圖2-4b),而對照組CCB細胞生長??致密且無空泡出現(xiàn)(圖2-4a),將病毒株分離株暫命名為KHV-SC。??(a)?(b)??圖2-4?CCB細胞接種病毒后產(chǎn)生病變效應??(a)?CCB正常細胞單層(x100)?;?(?b?)接種組織勻漿液6?d后的CCB細胞(x100?)??Fig.2-4?Cytopathogenic?effects?of?the?CCB?cells?infected?with?the?virus??(a)?Negative?control?cells(xlOO);?(b)?CCB?cells?infected?by?virus(xlOO)??27??

【參考文獻】:
期刊論文
[1]桉液對錦鯉皰疹病毒細胞內(nèi)復制影響的試驗[J]. 王好,劉麗凡,于丹,王友超,周井祥.  中國獸醫(yī)雜志. 2016(10)
[2]鯉皰疹病毒3型研究進展[J]. 鄭樹城,王慶,李瑩瑩,曾偉偉,王英英,劉春,梁紅茹,石存斌.  病毒學報. 2016(01)
[3]錦鯉皰疹病毒病鯉組織病理觀察[J]. 張濤,宋文華,富麗靜,胡宗云,李赫,閆有利,杜華,張健,張繼飛.  水產(chǎn)學雜志. 2015(04)
[4]錦鯉皰疹病毒GZ1301株的分離與鑒定[J]. 李瑩瑩,王慶,曾偉偉,潘厚軍,王英英,劉春,梁紅茹,石存斌,吳淑勤.  水產(chǎn)學報. 2014(08)
[5]抗錦鯉皰疹病毒的植物藥物篩選及其效果比較[J]. 李俊超,馬杰,曾令兵,范玉頂,徐進,周勇,張輝.  淡水漁業(yè). 2014(03)
[6]液相芯片技術(shù)同時檢測真鯛虹彩病毒和錦鯉皰疹病毒方法的建立[J]. 尹偉力,耿金培,劉寧,岳志芹,鄭小龍,劉葒,許紅巖.  水產(chǎn)科學. 2014(03)
[7]一株錦鯉皰疹病毒的分離與鑒定[J]. 朱霞,李新偉,王好,呂文亮,周井祥.  中國預防獸醫(yī)學報. 2011(05)

博士論文
[1]錦鯉皰疹病毒(KHV-hIj)株的分離與表達載體構(gòu)建[D]. 薛淑群.東北林業(yè)大學 2012

碩士論文
[1]錦鯉皰疹病毒Nested-PCR檢測方法的建立及初步應用[D]. 劉世超.南京農(nóng)業(yè)大學 2012



本文編號:2956241

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