近些年來,紅鰭東方純{Takifugu rubripes)作為重要的海水養(yǎng)殖經(jīng)濟魚類,由于其肉質(zhì)細嫩、味道鮮美、蛋白質(zhì)含量高以及營養(yǎng)含量豐富等優(yōu)點,而素有“魚類之王”的美稱。地理位置多分布于黃海、渤海和日本海域。是一種可以進行養(yǎng)殖的鲀科魚類中的優(yōu)良品種。然而隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大,各種疾病所造成的傷害也就越來越大,從而導(dǎo)致大量化學(xué)的藥物的濫用,其后果是藥物殘留、病蟲害的耐藥性和大片海域藥物的擴散直接影響食品安全和環(huán)境公共衛(wèi)生安全。因此迫切需要研制出對環(huán)境無污染、不具有耐藥性的藥物。同時對紅鰭東方鮑免疫機制的研究,期望在疾病爆發(fā)時,也可以通過免疫機制進行防御。刺激隱核蟲�。–ryptocaryon irritans Brown 1951）作為養(yǎng)殖紅鰭東方鮑的主要寄生蟲病,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失,關(guān)于防治刺激隱核蟲病的方法主要是通過化學(xué)藥物進行防治,但是給魚體本身和環(huán)境都造成很大的副作用。本實驗主要是通過對刺激隱核蟲的觀察和從中草藥方面進行篩選,從而得到最有效殺滅刺激隱核蟲的中草藥。同時也了解到當紅鰭東方魷感染刺激隱核蟲時,其免疫系統(tǒng)發(fā)揮著重要作用,因此對免疫反應(yīng)中最直接起到作用的... 

【文章來源】：中國海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 刺激隱核蟲的流行病學(xué)及防治措施
        1.1.1 刺激隱核蟲病原學(xué)
        1.1.2 刺激隱核蟲生活史
        1.1.3 刺激隱核蟲的宿主及發(fā)病特征
        1.1.4 刺激隱核蟲的危害及防治
            1.1.4.1 “白點病”的危害
            1.1.4.2 刺激隱核蟲的防治措施
    1.2 魚類免疫系統(tǒng)的研究進展
        1.2.1 魚類的免疫器官和組織
        1.2.2 魚類的非特異性免疫應(yīng)答
        1.2.3 魚類的特異性免疫應(yīng)答
            1.2.3.1 淋巴細胞
            1.2.3.2 免疫球蛋白（Ig）
    1.3 本實驗研究的目的及意義
2 刺激隱核蟲病的防治研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 刺激隱核蟲滋養(yǎng)體的收集、包囊和幼蟲的培養(yǎng)以及形態(tài)學(xué)觀察
        2.1.2 實驗用中草藥
        2.1.3 中草藥藥液制備
        2.1.4 中草藥殺滅滋養(yǎng)體、幼蟲
        2.1.5 溫度和鹽度對包囊破裂、幼蟲脫包產(chǎn)出的影響
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 癥狀及蟲體形態(tài)
        2.2.2 中草藥對滋養(yǎng)體殺滅效果
        2.2.3 中草藥對幼蟲殺滅效果
        2.2.4 溫度、鹽度對包囊破裂幼蟲產(chǎn)出的影響
    2.3 討論
3 紅鰭東方鲀免疫球蛋白的純化及特性分析
    3.1 實驗材料與試劑
        3.1.1 實驗用魚
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 紅鰭東方鲀血清制備
        3.2.2 飽和硫酸銨粗提IgM
        3.2.3 層析
            3.2.3.1 HiTrap IgM Purification Column親和層析
            3.2.3.2 HiTrap Protein A Sepharose Column親和層析
            3.2.3.3 HiTrap DEAE Sepharose Fast Flow Column離子交換層析
        3.2.4 濃縮
        3.2.5 純度分析
        3.2.6 分子量測定
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 飽和硫酸銨粗提純化IgM的結(jié)果
        3.3.2 SDS-PAGE電泳分析的結(jié)果
        3.3.3 紅鰭東方鲀血清蛋白濃度
        3.3.4 紅鰭東方鲀與其他4種海水魚的igM的比較
    3.4 討論
4 紅鰭東方純免疫球蛋白IgM多克隆抗體的制備及其與其他4種海水魚類的免疫交叉反應(yīng)
    4.1 實驗材料與試劑
        4.1.1 實驗動物
        4.1.2 主要試劑
    4.2 實驗方法
        4.2.1 鼠抗血清IgM的制備
        4.2.2 鼠抗紅鰭東方鲀血清IgM效價的測定
        4.2.3 鼠抗血清IgM的Western Blot檢測
        4.2.4 鼠抗血清IgM交叉反應(yīng)檢測
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 鼠抗紅鰭東方鲀IgM血清效價
        4.3.2 鼠抗IgM血清的Western Blot檢測
        4.3.3 鼠抗IgM血清交叉反應(yīng)檢測
    4.4 討論
總結(jié)
參考文獻
致謝
個人簡歷
碩士期間發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]龍膽石斑刺激隱核蟲病防治技術(shù)研究[J]. 王大鵬,何安尤,謝達祥,李長伙,陳曉漢.  水產(chǎn)科技情報. 2013(01)
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[5]大黃魚刺激隱核蟲病繼發(fā)細菌感染致死原因的研究[J]. 劉振勇,林小金,謝友佺,吳寧江,范希軍.  福建水產(chǎn). 2012(01)
[6]養(yǎng)殖大菱鲆隱核蟲病及其治療[J]. 王印庚,劉志偉,林春媛,陳霞,王玲,李華.  水產(chǎn)學(xué)報. 2011(07)
[7]花鱸免疫球蛋白的分離純化及部分特性分析[J]. 許娜娜,錢冬,趙海泉.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2011(01)
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[9]20種中草藥殺滅離體小瓜蟲的藥效研究[J]. 鉏超,張其中,羅芬.  淡水漁業(yè). 2010(01)
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博士論文
[1]牙鲆免疫球蛋白單克隆抗體的研制及其在牙鲆淋巴囊腫病研究中的應(yīng)用[D]. 李強.中國海洋大學(xué) 2007

碩士論文
[1]主要經(jīng)濟魚類血清免疫球蛋白的共同表位研究[D]. 鄭惠.福建農(nóng)林大學(xué) 2012



本文編號：2937316