凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)是我國對蝦的主養(yǎng)殖品種,隨著養(yǎng)殖的深入開展,其產(chǎn)量近幾年高居世界首位,為我國沿海乃至內(nèi)陸地區(qū)的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展做出了突出貢獻(xiàn)。然而,產(chǎn)業(yè)的發(fā)展也伴隨著病害的發(fā)生。本文主要針對一種新型的對蝦細(xì)菌性白斑病(Bacterial white spot disease,BWSD)進(jìn)行了深入研究。2015~2016年,對浙江、河北、山東、江蘇、天津五省市共9地區(qū)出現(xiàn)白斑癥狀的凡納濱對蝦150余口養(yǎng)殖池進(jìn)行了調(diào)查,出現(xiàn)白斑癥狀的對蝦檢出率達(dá)84.7%。對調(diào)查中存在白斑癥狀的對蝦進(jìn)行取樣,參照GB/T 28630.2-2012白斑綜合癥(WSD)診斷規(guī)程中套式PCR檢測法,進(jìn)行WSSV檢測排查,各地甲殼上具有明顯白斑的患病對蝦均未被WSSV感染。調(diào)查發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖水溫在26℃以上均有細(xì)菌性白斑病的發(fā)生,其發(fā)生不受養(yǎng)殖模式的影響,室外大塘、室外高位池、室外保溫棚以及室內(nèi)循環(huán)水工廠化四種主要養(yǎng)殖模式中均有檢出。由于凡納濱對蝦一年四季均有養(yǎng)殖,養(yǎng)殖水溫在26℃以上,故細(xì)菌性白斑病在一年四季均可發(fā)生。肉眼觀察下,患細(xì)菌性白斑病(BWSD)對蝦頭胸甲出現(xiàn)的白色斑點與對蝦白斑綜合征病毒(WSSV)感染后的白斑極為相似,但不同的是,患細(xì)菌性白斑病初期,對蝦健康狀況良好,生長基本正常,活力比較旺盛,未出現(xiàn)明顯死亡現(xiàn)象,而患病毒性對蝦白斑綜合征屬急性死亡,2~3天內(nèi)死亡率可達(dá)100%。由于養(yǎng)殖業(yè)者缺少區(qū)分細(xì)菌性白斑病和病毒性白斑綜合征的技術(shù),當(dāng)白斑發(fā)生時往往采取消極措施,甚至緊急排塘,結(jié)束養(yǎng)殖,造成不必要的損失。本文對細(xì)菌性白斑病的組織病理學(xué)進(jìn)行了研究。光學(xué)顯微鏡下觀察,細(xì)菌性白斑呈圓形,具明顯輻射肋,由白斑中心延伸至鋸齒狀的邊緣;白斑的中心處通常呈暗褐色,后期此處蝦殼被侵蝕穿孔;而由WSSV感染引起的白斑呈圓形,邊緣光滑、規(guī)則,圓形中密集分布大量黑色小斑點,無明顯中心。細(xì)菌性白斑病白斑處的組織病理學(xué)研究顯示,白斑中心蝦殼被細(xì)菌破壞、分解,殼下充滿大量組織碎片和細(xì)菌,上皮組織以及結(jié)締組織被嚴(yán)重破壞、侵蝕,出現(xiàn)斷裂,最終在整體結(jié)構(gòu)上形成明顯凹陷與斷層;高倍鏡下觀察發(fā)現(xiàn),斷裂的上皮組織與結(jié)締組織得細(xì)胞核呈嗜堿性深染,殼下上皮組織與結(jié)締組織伴有炎癥、甚至壞死。電子顯微鏡下,細(xì)菌性白斑中心區(qū)域甲殼被細(xì)菌侵蝕,出現(xiàn)穿孔,穿孔四周甲殼呈絮狀,并有大量的桿狀細(xì)菌黏著、積聚。同時,白斑周圍的健康甲殼也有大量桿狀細(xì)菌附著。研究結(jié)果為區(qū)分細(xì)菌性和病毒性白斑奠定了基礎(chǔ)。本研究從浙江、山東(2015年)、河北、天津、江蘇和山東(2016年)患病對蝦樣品中的頭胸甲白斑中心區(qū)域分離獲得6株優(yōu)勢度達(dá)80%以上的優(yōu)勢菌,編號分別為ZJ201506、SD201508、HB201509、TJ201509、JS201510、SD201601。通過革蘭氏染色、生理生化反應(yīng)以及基于16s rDNA與基于gyr B的序列分析最終確定6株優(yōu)勢菌為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)或其后期異型菌貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis);藥敏實驗結(jié)果為:6株優(yōu)勢菌對氧氟沙星、菌必治、頭孢氨芐、蓋博斯林、苯唑青霉素、頭孢噻肟高度敏感;對青霉素、利福平、阿奇霉素、乙酰螺旋霉素不敏感。利用菌株JS201506對健康的凡納濱對蝦進(jìn)行浸浴感染,浸浴濃度為5×102~5×106cfu/mL。同時設(shè)置創(chuàng)傷浸浴感染實驗組,使用解剖刀對受試對蝦甲殼進(jìn)行創(chuàng)傷處理,以留下劃痕不穿透為原則,創(chuàng)傷實驗組浸浴濃度為5×104cfu/mL和5×105cfu/mL。結(jié)果顯示,實際檢測濃度為2×104cfu/mL感染組的受試對蝦于27d出現(xiàn)與自然患病對蝦相同的早期細(xì)菌性白斑;檢測濃度為6.7×105cfu/mL感染組和9.1×105cfu/mL感染組分別在12d和10d出現(xiàn)早期白斑,在29d和25d時出現(xiàn)中、后期白斑。創(chuàng)傷實驗組對蝦頭胸甲上均出現(xiàn)了沿創(chuàng)傷部位生長的白斑,且白斑較為明顯,以上患病對蝦均表現(xiàn)出活力正常,攝食狀況良好,未出現(xiàn)明顯死亡。因此,當(dāng)水體中的解淀粉芽孢桿菌濃度高于104cfu/mL時,對蝦存在感染細(xì)菌性白斑病的風(fēng)險。從回感患病對蝦白斑中心區(qū)域進(jìn)行細(xì)菌分離得到一株優(yōu)勢度為87.1%的細(xì)菌,該菌革蘭氏陽性,桿狀,具芽孢。通過生理生化和16s r DNA的序列分析得出結(jié)論,分離的優(yōu)勢菌與菌株JS201506為同一株菌。本研究使用市場銷售的3種不同品牌的以芽孢桿菌為主要成分菌的微生態(tài)制劑粉末充氧活化后,對健康凡納濱對蝦進(jìn)行高濃度浸浴實驗,施用量按照指導(dǎo)用量的4~5倍。結(jié)果顯示:3種微生態(tài)制劑感染受試健康對蝦分別在16d、20d和18d時,甲殼出現(xiàn)了典型的細(xì)菌性白斑癥狀,而受試對蝦攝食狀態(tài)良好,未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。因此,市售以芽孢桿菌為主要成分菌的微生態(tài)制劑高濃度施用會導(dǎo)致細(xì)菌性白斑病,故養(yǎng)殖過程中應(yīng)合理的使用微生態(tài)制劑。綜上,本文研究病毒和細(xì)菌兩種對蝦白斑癥狀的不同,正確的區(qū)分了細(xì)菌性白斑病與病毒性白斑綜合征,對開展對蝦健康養(yǎng)殖和相關(guān)病害防控具有重要的指導(dǎo)意義。通過對浙江、山東、河北、天津、江蘇五省市對蝦細(xì)菌性白斑病調(diào)查和致病原分析,發(fā)現(xiàn)解淀粉芽孢桿菌或其后期異型菌貝萊斯芽孢桿菌是的主要致病原,并且該病的發(fā)生與以芽孢桿菌為主要成分菌的微生態(tài)制劑過量施用存在關(guān)聯(lián)。同時,本論文所得結(jié)論也為提高水產(chǎn)養(yǎng)殖的生態(tài)安全意識和正確使用微生態(tài)制劑提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：S945.49

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;凡納濱對蝦“正金陽1號”[J];海洋與漁業(yè);2018年09期

2 張鐵;邢澤宇;梁艷;曹英昆;高廣;王森琪;;凡納濱對蝦肝腸胞蟲病的概述[J];科學(xué)養(yǎng)魚;2018年07期

3 郝俊;張振奎;邵蓬;丁子元;蔡琰;;天津濱海新區(qū)凡納濱對蝦養(yǎng)殖池塘水質(zhì)變化特征[J];科學(xué)養(yǎng)魚;2017年04期

4 ;凡納濱對蝦喜添新品種[J];水產(chǎn)養(yǎng)殖;2017年06期

5 ;凡納濱對蝦“海興農(nóng)2號”[J];海洋與漁業(yè);2017年06期

6 方楊建;;凡納濱對蝦苗種挑選重要性及挑選運輸技術(shù)[J];水產(chǎn)養(yǎng)殖;2016年03期

7 陳學(xué)洲;李苗;李健;曲克明;何玉英;;漁業(yè)主推品種“凡納濱對蝦”的推廣應(yīng)用情況研究[J];中國水產(chǎn);2016年07期

8 張元;;凡納濱對蝦養(yǎng)殖池塘中青苔的危害與防控[J];黑龍江水產(chǎn);2016年04期

9 何樹金;王鳳敏;左德順;閆立君;宋凱;;凡納濱對蝦新品種與當(dāng)?shù)亍巴撩纭睂Ρ仍囼瀃J];河北漁業(yè);2014年12期

10 何樹金;王鳳敏;;凡納濱對蝦“科海1號”新品種試驗報告[J];河北漁業(yè);2014年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 丁賢;陳永青;李卓佳;;芽孢桿菌特性及其對凡納濱對蝦的免疫效應(yīng)[A];2008年中國水產(chǎn)學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2008年

2 黃皓;劉小林;吳長功;陳錨;張樹勇;;海南省凡納濱對蝦的引種和選育[A];中國動物學(xué)會甲殼動物學(xué)分會、中國海洋與湖沼學(xué)會甲殼動物學(xué)分會2004年甲殼動物學(xué)分會會員代表大會暨學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2004年

3 管越強(qiáng);王慧春;康現(xiàn)江;;蝦青素對凡納濱對蝦的免疫防護(hù)和抗氧化酶基因轉(zhuǎn)錄的影響[A];中國甲殼動物學(xué)會第十一屆年會暨學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

4 張家松;李卓佳;羅亮;;不同碳源在凡納濱對蝦不換水養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究[A];中國甲殼動物學(xué)會第十一屆年會暨學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

5 陳傳道;黃潤慶;路群山;章躍陵;;凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白抗腫瘤活性的研究[A];2012年中國水產(chǎn)學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2012年

6 張曉軍;張同武;趙翠;張兵;柳承璋;李富花;胡松年;相建海;;凡納濱對蝦基因組的初步分析[A];中國甲殼動物學(xué)會第十一屆年會暨學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

7 嚴(yán)芳;陳傳道;黃錫望;張佩;章躍陵;;凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白糖基修飾水平多態(tài)性的研究[A];2012年中國水產(chǎn)學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2012年

8 汪元梅;習(xí)欠云;葉瑞松;熊接華;高萍;朱曉彤;束剛;王麗娜;王松波;江青艷;劉麗;張永亮;;飼料中添加人參多糖對凡納濱對蝦miRNA的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物營養(yǎng)學(xué)分會第十一次全國動物營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

9 詹春蘭;王慈;翁凌;蔡秋鳳;劉光明;曹敏杰;;凡納濱對蝦絲氨酸蛋白酶抑制劑的原核表達(dá)及性質(zhì)研究[A];全國第九屆海洋生物技術(shù)與創(chuàng)新藥物學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2014年

10 劉小龍;楊林;習(xí)欠云;熊接華;江青艷;張永亮;;復(fù)合植物多糖對凡納濱對蝦免疫及抗氧化功能的影響[A];全國動物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 徐�！±顫嵨�;南海涌動創(chuàng)新潮[N];科學(xué)時報;2011年

2 記者 王建高 通訊員 王敏;我科學(xué)家成功破譯凡納濱對蝦基因組[N];科技日報;2019年

3 記者 張寶全;美國凡納濱對蝦在我市繁育成功[N];營口日報;2016年

4 南方日報記者 曹斯　林亞茗 通訊員 李潔尉 實習(xí)生 羅恒;凡納濱對蝦從南美游到中國[N];南方日報;2013年

5 繆翼;“低鹽凡納濱對蝦飼料風(fēng)味改良劑”獲國家專利[N];中國漁業(yè)報;2010年

6 吳凡;“低鹽養(yǎng)殖凡納濱對蝦食味劣化及調(diào)控”通過鑒定[N];中國漁業(yè)報;2010年

7 本報記者 張建列 通訊員 陳忠;科技讓對蝦“跳上”百姓餐桌[N];廣東科技報;2013年

8 福聞;凡納濱對蝦選育技術(shù)通過驗收[N];中國漁業(yè)報;2012年

9 本報記者 毛永彬;求真務(wù)實勤探索 海洋養(yǎng)殖煥生機(jī)[N];廣東科技報;2012年

10 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院;“凡納濱對蝦工程化高效健康養(yǎng)殖技術(shù)集成與示范”項目取得階段性成果[N];中國漁業(yè)報;2014年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王興強(qiáng);凡納濱對蝦（Litopenaeus Vannamei）生長和生物能量學(xué)的初步研究[D];中國海洋大學(xué);2004年

2 張志懷;高位蝦池水色及其它環(huán)境因子變化對凡納濱對蝦生長的影響[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2005年

3 張留所;凡納濱對蝦分子標(biāo)記篩選、連鎖圖譜構(gòu)建和QTL定位[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2006年

4 于赫男;環(huán)境脅迫對羅氏沼蝦和凡納濱對蝦行為、生長及生理活動的影響[D];暨南大學(xué);2007年

5 胡毅;凡納濱對蝦飼料配方優(yōu)化及幾種飼料添加劑的應(yīng)用[D];中國海洋大學(xué);2007年

6 張洋;扇貝、對蝦基因組BAC文庫構(gòu)建及其重要功能基因的初步篩選和分析[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2008年

7 李二超;鹽度對凡納濱對蝦的生理影響及其營養(yǎng)調(diào)節(jié)[D];華東師范大學(xué);2008年

8 史英力;以凡納濱對蝦β-actin基因啟動子為元件的重組昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的建立[D];中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所);2016年

9 于明超;芽孢桿菌和中草藥在凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）飼料中的應(yīng)用研究[D];中國海洋大學(xué);2007年

10 李喜蓮;凡納濱對蝦肌肉組織中體重調(diào)控相關(guān)基因的篩選、克隆鑒定及功能研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 崔浩;養(yǎng)殖凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）細(xì)菌性白斑病的發(fā)生及其病原學(xué)病理學(xué)研究[D];上海海洋大學(xué);2017年

2 袁衛(wèi);芽孢桿菌篩選及其對凡納濱對蝦生長、免疫力和抗逆性的影響研究[D];海南大學(xué);2016年

3 宋增磊;蝦肝腸胞蟲的流行病學(xué)及防控技術(shù)的研究[D];上海海洋大學(xué);2018年

4 閆明磊;飼料中膽固醇、大豆卵磷脂及其交互作用對淡水養(yǎng)殖凡納濱對蝦抗逆性的影響[D];上海海洋大學(xué);2018年

5 宋泰;二種不同溶解態(tài)的銅對凡納濱對蝦生長、代謝、免疫功能的影響[D];上海海洋大學(xué);2018年

6 孫博超;復(fù)合益生菌在凡納濱對蝦苗種培育中的應(yīng)用及評價[D];上海海洋大學(xué);2018年

7 朱亦晨;硝化型生物絮團(tuán)系統(tǒng)在凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）養(yǎng)殖中的應(yīng)用探究[D];上海海洋大學(xué);2018年

8 武和英;一凡納濱對蝦養(yǎng)殖場的蝦病原跟蹤檢測及脫氮菌在對蝦養(yǎng)殖中的應(yīng)用[D];上海海洋大學(xué);2018年

9 楊帆;棉籽糖和裂壺藻在凡納濱對蝦飼料中的應(yīng)用研究[D];中山大學(xué);2018年

10 秦菲;凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）工廠化養(yǎng)殖光照環(huán)境優(yōu)化技術(shù)研究[D];青島理工大學(xué);2018年

本文編號：2813561