【摘要】：多環(huán)芳烴(PAHs)作為持久性有毒污染物(PTS)的一種,廣泛存在于自然界各種介質(zhì)中。PAHs易附著,難降解,半揮發(fā),可蓄積在生物體內(nèi),危害神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、生殖發(fā)育系統(tǒng)等。歐洲食品安全委員會(huì)(EFSA)建議將苯并(a)蒽(BaA),苯并(a)芘(BaP),苯并(b)熒蒽(BbF)和 (CHR)等四種多環(huán)芳烴納入一個(gè)新的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)(EC 835/2011),并認(rèn)為這四種多環(huán)芳烴的總量是衡量食品中多環(huán)芳烴污染較為合理的指標(biāo)。本論文選擇中國(guó)北方沿海主要經(jīng)濟(jì)貝類之一的櫛孔扇貝Chlamys farreri為研究對(duì)象,進(jìn)行了PAHs肋、迫下扇貝基因表達(dá)譜的高通量分析,PAHs在扇貝體內(nèi)的累積特征的研究以及扇貝在PAHs脅迫下解毒代謝過(guò)程的研究。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)分析了PAHs脅迫對(duì)櫛孔扇貝蓄積能力、解毒代謝酶活力和關(guān)鍵基因表達(dá)量以及損傷指標(biāo)的影響,為我國(guó)近岸海域PAHs虧染監(jiān)測(cè)提供技術(shù)支撐。1.櫛孔扇貝在PAHs脅迫下基因表達(dá)譜的高通量分析本章選取2μg/L PAHs脅迫10天的櫛孔扇貝Chlamys farreri肖化盲囊為研究對(duì)象,利用高通量測(cè)序(RNA-seq)技術(shù),分析了櫛孔扇貝的基因表達(dá)譜。結(jié)果表明：PAHs混合污染物脅迫10天后,櫛孔扇貝消化盲囊共有469個(gè)基因?qū)φ战M相對(duì)差異表達(dá),其中209個(gè)基因上調(diào),260個(gè)基因下調(diào)。解毒代謝,抗氧化等生物過(guò)程相關(guān)的基因發(fā)生了顯著的差異表達(dá),CYP450 2P1比CYP3A2更為適合作為基于櫛孔扇貝的監(jiān)測(cè)PAHs污染的生物標(biāo)志物。并且,本實(shí)驗(yàn)將醌氧化還原酶(Q0)作為監(jiān)測(cè)PAHs污染的生物標(biāo)志物,這在其他文獻(xiàn)中少有報(bào)道。并且本實(shí)驗(yàn)中PAHs混合脅迫抑制了GST的基因表達(dá),這為GST作為雙殼貝類生物標(biāo)志物提供了新的證據(jù)。但是由于海洋生態(tài)系統(tǒng)環(huán)境復(fù)雜,污染物種類繁多,選擇適合的生物標(biāo)志物監(jiān)測(cè)海洋環(huán)境污染,仍需更多的研究。2.PAHs對(duì)櫛孔扇貝毒性效應(yīng)的研究本章研究了櫛孔扇貝Chlamys farreri在4種PAHs(BaP:BbF:CHR:BaA=5:3:1:1)混合脅迫下累積特征、解毒代謝指標(biāo)和損傷效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(自然海水)和染毒組(0.02μg/L 0.2μg/L 2μg/L),取樣時(shí)間點(diǎn)為0、1、3、6、10、15、21d,測(cè)定了扇貝的鰓、消化盲囊、軟體部和閉殼肌中PAHs累積含量、鰓和消化盲囊中Ⅰ相代謝、Ⅱ相代謝和抗氧化防御系統(tǒng)的酶活力、活性物含量以及相關(guān)基因表達(dá)量、損傷指標(biāo)。結(jié)果顯示：櫛孔扇貝組織中累積規(guī)律為：消化盲囊鰓軟體部閉殼�。籔AHs各組分累積規(guī)律為：CHR≈BaABbFBaP。I相代謝指標(biāo)中,EH、DD酶活力趨勢(shì)為先升高后穩(wěn)定,在第6d達(dá)到最大值。染毒組與對(duì)照組差異顯著,中低濃度處理組之間差異不顯著。EH、DD mRNA呈現(xiàn)相似的峰值變化,在第10d達(dá)到最大值。酶活力和基因表達(dá)均無(wú)組織特異性。Ⅱ相代謝指標(biāo)中,中低濃度處理組的GST、UGT各處理組和SULT各處理酶活力先升高后穩(wěn)定,GST于第10天達(dá)到最大值,UGT和SULT在第3d。相關(guān)基因表達(dá)與酶活力變化大致相同,均無(wú)組織特異性�？寡趸烙笜�(biāo)中,SOD酶活力在第10天達(dá)到最大值后逐漸穩(wěn)定,并表現(xiàn)出顯著的時(shí)間劑量效應(yīng),但無(wú)組織間差異。但是基因表達(dá)呈現(xiàn)相反趨勢(shì),表達(dá)先升高后降低,但未恢復(fù)到初始水平。GSH/GSSG除與對(duì)照組差異顯著外,各染毒組均無(wú)時(shí)間-劑量效應(yīng)。損傷指標(biāo)中, F值先降低后升高,并于染毒濃度呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)；MDA含量先升高后降低,高濃度處理組與對(duì)照組差異顯著；PC含量先升高后穩(wěn)定,處理組之間差異顯著。由此可見(jiàn),小分子量的CHR和BaA更容易被扇貝蓄積,扇貝消化盲囊的蓄積能力最強(qiáng)。扇貝GST、SOD和F值可作為監(jiān)測(cè)海洋PAHs污染的評(píng)價(jià)指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S917.4

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本文編號(hào)：2777474