【摘要】：三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)、中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)、中國對蝦(Penaeus orientalis)和克氏原螯蝦(Procambarus clarkii)都是我國主要的經(jīng)濟蝦蟹類,年齡鑒定是其漁業(yè)資源和漁業(yè)管理研究的基礎(chǔ)。但是,目前還沒有精確有效的甲殼類鑒齡方法,使用硬組織研究甲殼類的年齡和生長在我國屬空白,國外以往的研究中,大多數(shù)也只針對甲殼類眼柄生長紋寬帶和其年齡的關(guān)系,沒有確定最適合的眼柄和胃磨預(yù)處理和研磨方法。因此,本文對比了不同的預(yù)處理和研磨方法來選擇最佳方法。并且分別檢測了三疣梭子蟹、中華絨螯蟹、中國對蝦和克氏原螯蝦四種蝦蟹類的眼柄微結(jié)構(gòu)特征,并結(jié)合四者生長規(guī)律,使用硬組織分析法研究這幾種經(jīng)濟蝦蟹類甲長甲寬體重與紋數(shù)的對應(yīng)關(guān)系。此外,本文還初步對生長紋進行周期性驗證,提出相應(yīng)假設(shè),為以后的研究提供可用的方法和奠定基礎(chǔ),在甲殼類的年齡鑒定方面也為以后的研究者提供一些思路和借鑒。本研究對148只三疣梭子蟹、42只中華絨螯蟹、69只中國對蝦和180只克氏原螯蝦樣本的眼柄進行了研磨,觀察了四種蝦蟹類的眼柄微結(jié)構(gòu),初步研究了眼柄生長紋與其基礎(chǔ)生物學(xué)特征的關(guān)系。研究主要結(jié)論如下:(1)在選擇研磨眼柄的方法時,根據(jù)研究的甲殼類種類和想要得到的效果,選擇最適的研究方法。在清洗蟹類眼柄之前,不適宜對其進行煮沸的預(yù)處理。研磨甲殼比較硬的物種眼柄時,將眼柄內(nèi)部處理干凈后可以直接立在包埋盒里,但是對于甲殼比較軟的物種眼柄時,應(yīng)該先將眼柄剪開,小心剔除附著在眼柄上的有機物,并且在研磨時,應(yīng)更加謹慎小心。就三疣梭子蟹眼柄的研磨來說,橫磨更容易觀察生長紋細紋,豎磨更容易觀察生長紋寬帶。(2)三疣梭子蟹、中華絨螯蟹、中國對蝦和克氏原螯蝦的眼柄都分為4層:表層、色素層、鈣化層和膜層。三疣梭子蟹、三疣梭子蟹、中華絨螯蟹和中國對蝦鈣化區(qū)邊緣部分生長紋間距小,而鈣化區(qū)中央部分生長紋間距大,但是克氏原螯蝦的眼柄生長紋從色素層與鈣化層的交界處到鈣化層與膜層的交界處呈現(xiàn)出由寬到窄的變化趨勢。4種蝦蟹類的眼柄生長紋細紋間距的大小排序為:克氏原螯蝦中華絨螯蟹三疣梭子蟹中國對蝦,細紋間距的變化和大小都跟該物種的生長速度的變化和大小正相關(guān)。(3)本研究中,三疣梭子蟹和中華絨螯蟹的甲長與甲寬呈線性關(guān)系,關(guān)系式為:雄性三疣梭子蟹:LCW=2.069×LCL+2.004(R_2=0.945)雌性三疣梭子蟹:LCW=1.988×LCL+2.121(R_2=0.961)中華絨螯蟹:LCW=1.147×LCL-1.167(R_2=0.998)三疣梭子蟹和中華絨螯蟹的體重都隨著其甲長和甲寬的增加而增加,甲寬與體重呈冪函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式分別為:雄性三疣梭子蟹:W=0.00003×LCW~(3.14991)(R_2=0.875)雌性三疣梭子蟹:W=0.00003×LCW~(3.08819)(R_2=0.978)中華絨螯蟹:W=0.0006×LCW~(2.947)(R_2=0.9839)中國對蝦和克氏原螯蝦的體長與體重均呈冪函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:中國對蝦:W=0.00002×L~(2.718)(R_2=0.866)克氏原螯蝦:W=6×10-11×L~(5.792)(R_2=0.820)(4)生長紋與甲長關(guān)系根據(jù)最小AIC法則,雄性三疣梭子蟹眼柄生長紋細紋與甲長呈對數(shù)函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCL=27.812×LN(t)-59.431(R_2=0.591);眼柄生長紋細紋與甲寬呈Logistic函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCW=108.459/1+e-0.130×(t-23.341)(R_2=0.634);眼柄生長紋細紋個數(shù)與體重的關(guān)系呈對數(shù)函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:W=72.345×LN(t)-219.994(R_2=0.583)。雌性三疣梭子蟹生長紋細紋個數(shù)與甲長的關(guān)系呈Gompertz函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCL=28.561×e-0.0515(t-23.856)(R_2=0.781);眼柄生長紋細紋個數(shù)與甲寬呈Gompertz函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCW=58.296×e-0.0493(t-23.693)(R_2=0.778);眼柄生長紋細紋個數(shù)與體重的關(guān)系呈對數(shù)函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:W=155.137×LN(t)-503.955(R_2=0.711)。三疣梭子蟹生長紋寬帶數(shù)目與退殼次數(shù)呈線性相關(guān)關(guān)系,關(guān)系式為:M=1.055s-0.812(R_2=0.610)。中華絨螯蟹眼柄生長紋細紋與甲長、甲寬的關(guān)系均呈Logistic函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCL=61.53/1+e-0.066×(t-42.59)(R_2=0.969)、LCW=70.01/1+e-0.063×(t-44.49)(R_2=0.971),眼柄生長紋細紋與體重呈Gompertz函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:W=55.14×e-0.080(t-47.89)(R_2=0.895)。中國對蝦眼柄生長紋細紋與體長和體重的關(guān)系均呈Logistic函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:L=333.84/1+e-0.04(t-39.46)(R_2=0.747)、W=92.74/1+e-0.09(t-58.11)(R_2=0.623)�？耸显r眼柄生長紋細紋與體長和體重的關(guān)系均呈Logistic函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:L=96.66/1+e-0.25(t-2.54)(R_2=0.461)、W=22.48/1+e-0.41(t-11.78)(R_2=0.454)。三疣梭子蟹和中華絨螯蟹細紋個數(shù)與其甲長、甲寬和體重生長關(guān)系都是前期快,后期慢,符合其生長規(guī)律,細紋個數(shù)增長速度與三疣梭子蟹和中華絨螯蟹的生長速率一致,隨著時間的增長而逐漸變慢,三疣梭子蟹的寬帶個數(shù)與其退殼次數(shù)一致。中國對蝦和克氏原螯蝦眼柄生長紋細紋與體長和體重的關(guān)系變化情況和其生長速率的變化情況一致,中國對蝦眼柄寬紋數(shù)目與其年齡相關(guān),即1齡對應(yīng)1個寬帶,1個細紋的形成則需要9.9~14.6(12.3±1.5)天,在克氏原螯蝦眼柄內(nèi)部暫時沒有發(fā)現(xiàn)寬帶。
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S917.4
【圖文】：

圖 1-1 (a)三疣梭子蟹眼柄 的生長紋；(b) 華絨螯蟹眼柄 的生長紋；(c眼柄 的生長紋Fig.1-1 The growth bands of eyestalk of (a) Portunus trituberculatus，(b) Eriocheir(c) Penaeus orientalis表 1-1 甲 類年齡鑒定方法

蝦眼柄質(zhì)地較為柔軟，不便于下一步固定，因此將其沿縱軸線剪開后再去除有機物，然后置于 75%酒精的離心管中保存。三疣梭子蟹、中華絨螯蟹和克氏原螯蝦眼柄的眼柄基部按圖 1 剪平，垂直放模具中（三疣梭子蟹樣本選擇要磨的平面，橫磨圖 2-2 或者豎磨圖 2-3），倒好的冷埋樹脂溶液（壓克力粉和液體固化劑按體積比 1：1.5）包埋（圖 2-2-B3-B）。由于中國對蝦眼柄較軟，無法豎直放置，故將眼柄剪開后，平放于模圖 2-4-B）。包埋好的樹脂模具放在陰涼通風(fēng)處 24h 待其硬化（圖 2-2-C、、圖 2-4-C），硬化后將包有眼柄的模具依次用 120、240、600、1200、2400 目的水磨砂紙打磨（圖 2-2-D、圖 2-3-D、圖 2-4-D），打磨過程中不斷在下檢查，直到打磨到需要的平面，將經(jīng)打磨的樹脂薄片拋光研磨面（圖 2-2-E3-E、圖 2-4-E）。然后將拋光過的截面朝下，用熱熔膠粘在載玻片上（圖 2-2-F3-F、圖 2-4-F），使用同樣的方法對另一面進行打磨（圖 2-2-G、圖 2-3-G、），直至在顯微鏡下模具截面的生長紋清晰可見（圖 2-2-H、圖 2-3-H、圖 2-4-H光得到眼柄切片（圖 2-2-I、圖 2-3-I、圖 2-4-I）。最后用密封袋將其密封保存觀察眼柄之用。

圖 2-2 三疣梭子蟹眼柄 磨切片 作示意圖tic of eyestalk cross section slices production of Portunus trid; C: Harden; D: Grind; E: Polish; F: Fix; G: Rough grindingI: Polish

【參考文獻】

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本文編號：2749704