【摘要】：鯽是一種經(jīng)濟(jì)效益高的淡水養(yǎng)殖品種,我國主要養(yǎng)殖的鯽魚多為三倍體,如彭澤鯽、異育銀鯽等,自然界中僅有少數(shù)四倍體鯽存在。我們在三倍體異育銀鯽選育工作中,發(fā)現(xiàn)一種具有顯著生長優(yōu)勢的異育銀鯽,對其進(jìn)行連續(xù)六代的系統(tǒng)選育,已得到具有穩(wěn)定形態(tài)特征新品種,經(jīng)倍性分析和DNA含量檢測證明選育異育銀鯽是染色體數(shù)為208條的四倍體鯽。然而,目前對于這種四倍體銀鯽的形成機(jī)制以及它額外染色體形成的原因尚不清楚,是由于染色體加倍而來還是外源染色體的整合需要確切的證據(jù)。本實驗主要運用分子生物學(xué)手段對新選育異育銀鯽四倍體染色體來源進(jìn)行鑒定,其鑒定方法及結(jié)果如下:1、微衛(wèi)星DNA(SSR),是一種可作為跟蹤鑒定親本、子代中等位基因傳遞的理想分子標(biāo)記。本實驗選用98對鯉微衛(wèi)星引物和20對鯽微衛(wèi)星引物,檢測三倍體鯽、四倍體異育銀鯽和鯉,篩選出只在四倍體異育銀鯽中和鯉有相同大小特異條帶的引物有9對。對這些引物擴(kuò)增后的部分條帶進(jìn)行測序,經(jīng)比對分析,結(jié)果顯示在四倍體銀鯽和鯉魚中的特異片段幾乎相同,大部分相似度高達(dá)99%、100%。在其中的3個微衛(wèi)星位點對這三種魚相同大小條帶進(jìn)行測序結(jié)果比對,結(jié)果也顯示四倍體異育銀鯽與鯉的相似度高于三倍體鯽。由此可說明異育銀鯽四倍體中額外的染色體極可能來源于鯉。2、核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS),通常用來區(qū)分種和研究種群間關(guān)系,以及用于種質(zhì)鑒定和遺傳多樣性的分子標(biāo)記。本實驗分離了 20個選育四倍體異育銀鯽的ITS1、ITS2區(qū)序列,每個樣品ITS1、ITS2區(qū)分別測序3次,結(jié)果顯示,所測20個樣品中的60個ITS1區(qū)擴(kuò)增序列有兩種類型,長度為364bp的鯽魚型和長度為395bp的鯉魚型,其中的5個鯽魚型ITS1序列分別存在于5個樣品中,出現(xiàn)幾率為8.3%,其余的55個序列為鯉魚型,出現(xiàn)幾率為91.7%;而ITS2區(qū)的60擴(kuò)增序列長度一致,均為513bp的鯉魚型。由此可表明異育銀鯽四倍體在ITS1這個位點混入了鯉魚的基因,初步證明了異育銀鯽四倍體額外的染色體來源于鯉。
【學(xué)位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S917.4
【圖文】：

用雄性紅趣精子刺激這些四倍體卿的雌核發(fā)育建立了種群。選育己經(jīng)連續(xù)進(jìn)逡逑行了邋６代，目前得到了性狀穩(wěn)定的四倍體卿種群。對其進(jìn)行染色體倍性分析和ＤＮＡ逡逑含量測定，已表明它們是有２０８條染色體的四倍體卿（如圖１）。逡逑、八、譯ｉ＊靴逡逑邱把~枩W逡逑、、２ｎ＝１００邐４ｎ＝２Ｕ８逡逑圖１－１：普通}卿（左）與新選育異育銀愾四倍體（右〉中期染色體逡逑Ｆｉｇ．邋１－１：邋Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ邋ｓｐｒｅａｄｓ邋ａｔ邋ｍｅｔａｐｈａｓｅ邋ｉｎ邋ｒｅｄ邋ｃｒｕｃｉａｎ邋ｃａｒｐｓ邋（ｌｅｆｔ）邋ａｎｄ邋ｔｈｅ邋ｎｅｗ邋化ｔｒａｐｌｏｉｄ邋ｇ化ｅｌ逡逑ｃａｒｐ（邋ｒｉｇｈｔ）．逡逑１２逡逑

ＭＦＷ０２邐ＨＵ１２１１邐２４１６逡逑圖２－１；邋Ｈ倍體頌１、異育銀站Ｐ四倍體及繩魚個體在９個微衛(wèi)星位點擴(kuò)X椊峁義希疲椋紓玻保哄澹危椋睿邋澹恚椋悖潁錚螅嶧歟歟椋簦邋澹歟錚悖殄澹幔恚穡歟榍桑悖幔簦椋錚鑠澹潁澹螅酰歟簦簀澹錚駑澹裕潁椋穡歟錚椋溴澹悖潁酰悖椋幔鑠澹悖幔潁穡澹歟唬澹簦椋幔穡歟錚椋溴澹紓椋猓溴澹悖幔潁皰澹幔睿溴義希悖錚恚恚锎蟈澹悖幔潁皰澹椋睿洌椋觶椋洌酰幔歟螅義希常誨澹穎短迥齲唬伲簘撚悖唬矗灰煊鴫謀短�。箭头所指为所矎T蚍治齙模模危撂醮ｅ義

本文編號：2727894