發(fā)布時間：2020-05-05 17:42

【摘要】：鰻鱺(Anguilla japonica)是一種典型的降海洄游性魚類,是亞洲地區(qū)著名的名貴魚類和重要養(yǎng)殖對象。鰻鱺人工繁殖過程中親魚的選擇尤為重要,關(guān)系到繁殖的成功,而親魚的性別較難通過外部觀察進行鑒定,雌雄魚在外部形態(tài)上難以區(qū)分。本實驗主要從外部形態(tài)學指標,血清生化指標以及SRAP分子標記等三個層面對長江口降海鰻鱺進行性別鑒定。主要研究內(nèi)容如下:1、長江口降海雌雄鰻鱺外部形態(tài)指標分析及建立雌雄鑒別函數(shù)測量60尾降海鰻鱺的17項外部形態(tài)特征數(shù)據(jù),并進行追蹤標記。通過人工繁殖確定雌雄后,發(fā)現(xiàn)30尾雌性,8尾雄性,22尾偽雄。分別對30尾雌性和8尾雄性個體的直接測量指標進行主成分分析及對17項指標標準化處理后的15項指標進行R-聚類分析,并將標準化處理后的15項指標進行單因素方差分析。結(jié)果表明:主成分分析和R-聚類分析發(fā)現(xiàn),個體性狀差異主要集中在體型大小,吻部特征等方面。發(fā)現(xiàn)體寬/體長,體重/體長^3,體高/體長,胸鰭長/頭長,吻寬/頭長,吻端至眼眶后緣垂直距離/頭長,吻長/頭長,眼徑指數(shù)等8個指標存在雌雄差異(p0.05)。在此基礎(chǔ)上進行逐步判別分析,并建立雌雄判定函數(shù)。獲得2個判定函數(shù):Y_(female)=1276.122X_3+366.352X_4+227.44X_7-116.555,(X_4=體重/體長^3;X_3=體寬/體長;X_7=胸鰭長/頭長)。2、長江口降海雌、雄鰻鱺血清生化指標和卵黃蛋白原的差異分析本文比較了長江口降海洄游的鰻鱺雌、雄魚血清中的14項生化指標及卵黃蛋白原含量的差異,并利用血清生化指標建立了相應(yīng)的性別判定函數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),鰻鱺雌魚血清中的甘油三酯、低密度脂蛋白、鈣離子含量顯著低于鰻鱺雄魚(P0.05),白蛋白、葡萄糖含量顯著高于鰻鱺雄魚(P0.05),而谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、總蛋白、肌酐、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和無機磷的含量在鰻鱺雌、雄魚間無明顯差異(P0.05)。此外,鰻鱺雌魚的卵黃蛋白原含量顯著高于鰻鱺雄魚(P0.05)。根據(jù)不同生化指標,采用逐步選擇法建立了兩個鰻鱺性別判定函數(shù)。3、長江口降海鰻鱺雌雄個體SRAP分子標記的篩選及SCAR分子標記的建立以長江口降海雌雄鰻鱺為研究材料,采用SRAP(sequence-related amplified polymorphism)技術(shù),共使用140對引物對鰻鱺基因組進行性別特異表達特征條帶的篩選,研究其性別差異性SRAP標記。通過初步篩選,獲得F5R2雌性特異DNA序列。回收克隆測序,片段長145bp,經(jīng)核苷酸數(shù)據(jù)庫BLAST檢索未發(fā)現(xiàn)其同源序列。根據(jù)測序結(jié)果設(shè)計SCAR(sequence characterized amplified regions)特異引物,將此雌性特異性SRAP標記轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定性和特異性更好的SCAR標記。以此可以對鰻鱺進行性別鑒定。總之,通過對降海鰻鱺的性別鑒定,優(yōu)化人工繁殖親魚的選擇,進而為鰻鱺人工繁殖的成功提供基礎(chǔ)資料。
【圖文】：

上海海洋大學碩士學位論文表2-2 R-聚類分析的標準化處理Tab.2- 2standardized treatment of R- cluster analysis標準化性狀standardized treatment itemsX1=頭長/體長 X6=口裂深/頭長 X11=吻端至眼眶后緣垂直距離/頭長X2=軀干長/體長 X7=胸鰭長/頭長 X12=吻長/頭長X3=體寬/體長 X8=眼眶后緣寬度/頭長 X13= 吻長/吻寬X4=體重/體長^3 X9=眼間距/頭長 X14=吻端至眼眶后緣垂直距離/眼眶X5=體高/體長 X10=吻寬/頭長 X15=眼徑指數(shù)

圖 3-1 鰻鱺雌雄血清卵黃蛋白原Fig.3-1 serum vitellogenin of male and female eel3.2.3 血液中生化指標含量與鰻鱺性別關(guān)系的判別分析3.2.3.1 逐步選擇法建立鰻鱺性別判定函數(shù)對這些生化指標采用逐步選擇法進行篩選。本文采用向前選擇的方式，利用F 統(tǒng)計量決定對某一指標是選入還是剔除，以 F>3.84 作為選入的標準，以 F<2.71作為剔除的標準。共選出 6 項指標，，Wilks ’ Lambda 值代表對判定函數(shù)的貢獻值，與其含量是否在雌雄魚間是否有顯著差異無關(guān)，結(jié)果見表 6。表3-6 逐步判別篩選結(jié)果 Tab.3-6 Result of stepwise discriminant analysis項目Item步驟Step引入指標EnteredvariableF P Wilks ’Lambda
【學位授予單位】：上海海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S917.4

【參考文獻】

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本文編號：2650522