【摘要】：本論文共分三部分:第一部分將引起俄羅斯鱘性腺潰爛病的兩種致病菌嗜水氣單胞菌與魯氏耶爾森菌制備成二聯(lián)滅活疫苗,探討其對受免俄羅斯鱘的免疫效果,為以后生產(chǎn)實踐中疫苗的開發(fā)打下基礎(chǔ);第二部分在俄羅斯鱘基礎(chǔ)飼料中添加免疫多糖---殼聚糖,研究其對俄羅斯鱘生長性能與免疫功能的影響;第三部分針對養(yǎng)殖場突發(fā)疾病膿包病,找到其致病因子,從分子生物學的角度鑒定它為溫和氣單胞菌,并對其做了藥物敏感性試驗,豐富了鱘疾病理論知識,對生產(chǎn)實踐也有一定的借鑒作用。1 嗜水氣單胞菌與魯氏耶爾森菌二聯(lián)滅活疫苗對俄羅斯鱘的免疫效果研究用嗜水氣單胞菌與魯氏耶爾森菌制成二聯(lián)滅活疫苗,以腹腔注射的方式免疫俄羅斯鱘后,通過檢測免疫俄羅斯鱘血清超氧化物歧化酶活性、溶菌酶活性、補體C3含量、IgM含量、抗體效價及對嗜水氣單胞菌、魯氏耶爾森菌攻毒的免疫保護率,評價該二聯(lián)滅活疫苗對俄羅斯鱘的免疫保護效果。結(jié)果顯示,二聯(lián)滅活疫苗免疫俄羅斯鱘后,血清超氧化物歧化酶活力、溶菌酶活力、補體C3含量及IgM含量相比對照組都有不同程度的升高,且添加佐劑的二聯(lián)滅活疫苗免疫效果更強。二聯(lián)滅活疫苗誘導的抗體效價在一免后的第2周達到峰值,隨后有所下降,加強免疫后抗體效價在第5周再次達到峰值,且添加佐劑的二聯(lián)滅活疫苗組誘導的抗體效價高于未添加佐劑的二聯(lián)滅活疫苗組,而空白對照組在整個試驗期間對兩種菌的抗體效價一直小于4。免疫56天后,分別用兩種病原菌攻毒,佐劑二聯(lián)滅活疫苗對嗜水氣單胞菌與魯氏耶爾森菌的免疫保護率分別為61.54%、60.71%,與無佐劑組相比,分別提高7.69%、7.14%。試驗結(jié)果表明,該二聯(lián)滅活疫苗對引起俄羅斯鱘性腺潰爛病的兩種細菌可起到一定的預(yù)防效果。2 殼聚糖對俄羅斯鱘生長性能及免疫功能的影響在基礎(chǔ)飼料中分別添加濃度為0(對照組)、1.25、2.5、5、7.5、10 g/kg的殼聚糖,投喂12 g左右的俄羅斯鱘50d,每組設(shè)3個重復,每個重復30尾,研究不同濃度的殼聚糖對俄羅斯鱘(Acipenser gueldenstaedti)幼魚的生長性能及免疫力的影響。結(jié)果表明,相比對照組,添加2.5 g/kg、5 g/kg的殼聚糖可顯著降低飼料系數(shù)、提高俄羅斯鱘幼魚的增重率和特定生長率,(P0.05),而當添加量超過10 g/kg時會抑制其生長(P0.05);1.25 g/kg組與2.5 g/kg組血清超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組(P0.05),其它試驗組則顯著低于對照組(P0.05);2.5 g/kg與5 g/kg組溶菌酶活性顯著高于對照組,當殼聚糖添加量超過7.5 g/kg時則會抑制血清溶菌酶活性(P0.05);1.25 g/kg~5 g/kg組酸性磷酸酶活性、堿性磷酸酶活性和補體C3含量都顯著高于對照組(P0.05);各試驗組IgM含量不受殼聚糖含量的影響,與對照組差異不顯著(P0.05)。在本試驗條件下,添加適量的殼聚糖能提高俄羅斯鱘幼魚的生長性能,增強其免疫能力,綜合評價增重率、特定生長率及非特異性免疫等指標,殼聚糖添加量以2.5 g/kg為宜。3 鱘膿包病病原的分離鑒定及藥敏試驗從瀕死的鱘魚身上分離到3株優(yōu)勢菌株,命名為BX0814、BX0815、BX0816,回歸感染健康試驗鱘,發(fā)現(xiàn)BX0815有致病性,且試驗鱘發(fā)病癥狀與自然發(fā)病鱘癥狀相似,并從試驗鱘體內(nèi)再次分離到此菌,說明BX0815為致病菌。通過對此致病菌的形態(tài)學、生理生化特征、分子生物學以及藥敏特性分析,結(jié)果顯示BX0815為革蘭氏陰性菌,其16S r DNA的序列與溫和氣單胞菌(GenBank登錄號:FJ461353.1)的同源性高達100%;經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育進化樹分析發(fā)現(xiàn),BX0815菌株與溫和氣單胞菌FJ461353.1自然聚類為一支,進一步表明BX0815菌株為溫和氣單胞菌。藥敏特性試驗結(jié)果顯示,諾氟沙星、慶大霉素、氟苯尼考等15種藥物對菌株BX0815有很好的抑菌效果。由試驗結(jié)果分析可知,引起鱘魚患膿包病癥的病原是溫和氣單胞菌,病原菌的鑒定及其藥敏試驗結(jié)果為鱘魚養(yǎng)殖過程中,合理選擇藥物防治疾病提供了理論依據(jù)。
【圖文】：

圖 1-1 血清中超氧化物歧化酶的活力Fig. 1-1 Activity of SOD in serum注：相同時間，，肩注不同小寫字母表示差異顯著（P<0.05)，肩注不同大寫字母表示差異極著（P<0.01)，肩注相同表示差異不顯著（P>0.05)，下同。Note: In the same time, different small letters superscripts means significant difference (P<0.0

圖 1-2 血清中溶菌酶的活力Fig.1- 2 Activity of lysozyme in serum2.3 血清補體 C3 的含量從圖 1-3 看出，在免疫不同時間后，免疫組的俄羅斯鱘血清補體 C3 含量均有
【學位授予單位】：上海海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S943

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 趙玉康;田振中;;雞傳染性法氏囊病滅活苗與基因工程亞單位疫苗免疫效果比較[J];新疆畜牧業(yè);2013年11期

2 師東方,李一經(jīng),賈永清,王君偉,馬波,劉寶全;豬輪狀病毒核酸免疫的研究[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學報;2004年06期

3 嚴克霞;劉建杰;周銳;吳斌;劉維紅;陳煥春;;重組豬胸膜肺炎放線桿菌毒素ApxI對小鼠的急性毒性和免疫保護性研究[J];生物工程學報;2006年01期

4 李巖偉;楊鳳寶;宋立華;馬桂花;朱虹;端青;;鸚鵡熱衣原體基因工程亞單位疫苗免疫羊抗體產(chǎn)生動力曲線[J];中國人獸共患病學報;2010年09期

5 吳運譜;喬傳玲;楊煥良;展小過;陳艷;辛曉光;陳化蘭;;重組腺病毒rAd-H5HA-EGFP對小鼠免疫保護性的研究[J];中國獸醫(yī)學報;2011年01期

6 張偉信,張西臣,喻建軍;雞柔嫩艾美耳球蟲免疫保護性研究[J];塔里木農(nóng)墾大學學報;2004年04期

7 雷連成,韓文瑜,鄭丹;大腸桿菌流行株耐藥特性對其免疫效果的影響[J];吉林農(nóng)業(yè)大學學報;2005年05期

8 趙松波;張少華;周邦信;竇永喜;孫曉林;駱學農(nóng);;重組產(chǎn)單核細胞李斯特菌溶血素的應(yīng)用研究[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年03期

9 侯艷紅;周艷君;閆麗萍;田志軍;楊漢春;童光志;;豬泛素基因與PRRSV GP5基因融合表達質(zhì)粒的構(gòu)建及其免疫效果[J];中國獸醫(yī)科學;2007年05期

10 許小琴;李迎曉;劉紅梅;韋旭斌;秦愛建;;人參皂苷Rg_1-菌體CpG對IBDV VP2基因重組真核表達質(zhì)粒免疫效果的影響[J];中國獸醫(yī)學報;2008年05期

相關(guān)會議論文 前4條

1 蔣錦琴;孫一帆;孫愛華;阮萍;嚴杰;;甲副傷寒OmpA-SpaO融合雙抗原原核表達產(chǎn)物免疫保護性研究[A];2011年浙江省醫(yī)學會醫(yī)學病毒學分會、醫(yī)學微生物與免疫學分會學術(shù)年會論文匯編[C];2011年

2 張影;張瑾;薄淑英;楊英超;辛曉芳;王國治;;弓形蟲STAg免疫小鼠后血清抗體水平的動態(tài)檢測[A];第五次全國免疫診斷暨疫苗學術(shù)研討會論文匯編[C];2011年

3 林綺萍;吳少庭;翁亞彪;袁仕善;溫見翔;張仁利;高世同;黃達娜;雷明軍;潘暉榕;秦莉;;弓形蟲有效抗原表位的篩選及其對小鼠免疫保護性的研究[A];全國新出現(xiàn)傳染病學術(shù)研討會資料匯編[C];2004年

4 范雄林;徐志凱;李元;李別虎;薛瑩;柏銀蘭;白光春;賈向志;;結(jié)核分枝桿菌Ag85B基因免疫保護性的初步研究[A];新世紀預(yù)防醫(yī)學面臨的挑戰(zhàn)——中華預(yù)防醫(yī)學會首屆學術(shù)年會論文摘要集[C];2002年

相關(guān)博士學位論文 前6條

1 楊益隆;金黃色葡萄球菌SasA蛋白免疫保護性的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2016年

2 蔣文明;豬繁殖與呼吸綜合征重組腺病毒疫苗免疫候選分子研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2007年

3 巴月;HBV DNA免疫引起多器官病理損傷及其機制的實驗研究[D];鄭州大學;2004年

4 楊利;APP apxIVA基因序列特性及rApxIVA/rTbpB亞單位復合菌苗對小鼠的免疫研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2009年

5 陳慧誠;腸道病毒71型滅活疫苗（人二倍體細胞）免疫后攻毒及未免疫攻毒恒河猴嬰猴丘腦組織的比較蛋白質(zhì)組學研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

6 劉軍;大腸桿菌O157重組弱毒疫苗的研究[D];吉林大學;2007年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 肖艷翼;俄羅斯鱘性腺潰爛病的免疫效果研究及膿包病病原的分離鑒定[D];上海海洋大學;2016年

2 劉艷春;甲型副傷寒沙門氏菌膜影的免疫保護性研究[D];昆明理工大學;2012年

3 韓磊;雞柔嫩艾美耳球蟲免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pcDNA4.0-MZ-TGF-β_4的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2006年

4 姜夏;IBDV基因疫苗的制備及免疫效果的初步研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2010年

5 武軍元;融合蛋白K88ac-STⅡ和VP4-STI對實驗小鼠的免疫效果研究[D];石河子大學;2006年

6 張平靜;共表達H5N1亞型高致病性禽流感病毒HA基因和NA基因DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫效力評估[D];福建農(nóng)林大學;2006年

7 李運娜;柔嫩艾美耳球蟲ADF基因重組卡介苗的構(gòu)建及其免疫保護性研究[D];吉林大學;2012年

8 劉彩紅;豬胸膜肺炎放線桿菌外膜蛋白PalA對滅活疫苗的免疫干擾[D];華中師范大學;2015年

9 謝昆;雞柔嫩艾美耳球蟲免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pEtK2-IL-2的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2004年

10 徐前明;雞柔嫩艾美耳球蟲免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pCDNA-TA4-IL-2的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2004年

本文編號：2639966