【摘要】：本研究探討了不同鹽度脅迫對大彈涂魚(Boleophthalmus pectinirostris)糖代謝相關(guān)酶活性及基因表達(dá)量的影響,并分析了外源葡萄糖和二甲雙胍對高鹽脅迫下大彈涂魚糖代謝的調(diào)節(jié)作用。研究成果可為魚類人工全價(jià)配合飼料的開發(fā)提供必要的參考依據(jù)。(1)急性鹽度脅迫對大彈涂魚糖代謝的影響。實(shí)驗(yàn)共設(shè)置3個(gè)鹽度處理組:低鹽度組(0‰)、正常鹽度組(17‰,對照組)、高鹽度組(30‰),脅迫實(shí)驗(yàn)為期5d。結(jié)果發(fā)現(xiàn),低鹽度組實(shí)驗(yàn)魚肝糖原含量顯著降低;低鹽度組實(shí)驗(yàn)魚葡萄糖激酶(GK)、丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)活性最高,其次是高鹽組,對照組實(shí)驗(yàn)魚活性最低;高、低鹽度組實(shí)驗(yàn)魚磷酸烯醇式丙酮酸激酶(PEPCK)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)酶活性顯著高于對照組;高鹽組實(shí)驗(yàn)魚FBPase基因m RNA表達(dá)量顯著高于低鹽度組,對照組實(shí)驗(yàn)魚果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase)基因表達(dá)量最低;低鹽度組實(shí)驗(yàn)魚PFK基因m RNA表達(dá)量顯著高于對照組,而高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚PFK基因表達(dá)量最低。結(jié)果表明,鹽度脅迫加速了大彈涂魚肝糖原的分解,大彈涂魚通過提高糖代謝活動為機(jī)體提供能量。(2)急性鹽度脅迫下大彈涂魚肝和鰓組織糖代謝的差異。實(shí)驗(yàn)共設(shè)置2個(gè)鹽度處理組:正常鹽度組(17‰,對照組)和高鹽度組(30‰),脅迫實(shí)驗(yàn)為期24 h。結(jié)果發(fā)現(xiàn),高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚肝糖原和鰓糖原含量分別在24 h和3 h時(shí)達(dá)到最低水平,均顯著低于對照組;高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚鰓中鈉鉀ATP酶(Na+/K+-ATPase)酶活力呈先升高后降低趨勢,在6h顯著高于對照組;高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚肝PK和GP酶活力呈先升高后降低趨勢,均于3 h時(shí)達(dá)到最高,顯著高于對照組;高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚鰓PK和GP酶活力呈先升高后降低趨勢,分別于1 h和6 h時(shí)達(dá)到最高,顯著高于對照組;高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚肝GS和GP基因m RNA表達(dá)量呈先升高后降低趨勢,分別于3 h和1 h時(shí)達(dá)到最高,顯著高于對照組;高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚鰓GS、GP和NKA基因m RNA表達(dá)量呈先升高后降低趨勢,分別于3 h,1 h和12 h時(shí)達(dá)到最高,顯著高于對照組。結(jié)果表明,急性鹽度脅迫下大彈涂魚鰓組織能夠通過分解糖原為機(jī)體提供能量。(3)葡萄糖對急性鹽度脅迫下大彈涂魚糖代謝的影響。實(shí)驗(yàn)共設(shè)置2個(gè)鹽度處理組:正常鹽度組(17‰,對照組)和高鹽度組(30‰),腹腔注射葡萄糖劑量為30 mg/100g,脅迫實(shí)驗(yàn)為期12 h。結(jié)果發(fā)現(xiàn),對照組實(shí)驗(yàn)魚肝糖原含量呈先升高后降低趨勢,于1 h時(shí)達(dá)到最高,而高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚肝糖原在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間無顯著性差異;對照組實(shí)驗(yàn)魚GK、PK酶活性呈先升高后降低趨勢,分別于3 h和1 h時(shí)達(dá)到最高;高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚GK、PK和PFK酶活性呈先升高后降低趨勢,均于1 h時(shí)達(dá)到最高;對照組實(shí)驗(yàn)魚PEPCK酶活性呈逐漸降低趨勢,高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚PEPCK和FBPase酶活性呈先升高后降低再升高趨勢;高鹽度組實(shí)驗(yàn)魚PFK基因m RNA表達(dá)量最低值出現(xiàn)在6 h;高鹽度組和對照組實(shí)驗(yàn)魚PFK和FBPase基因m RNA表達(dá)量最低值出現(xiàn)在3 h。結(jié)果表明,外源補(bǔ)充葡萄糖能夠提高高鹽脅迫下大彈涂魚肝臟糖酵解的作用,而減弱糖異生的作用。(4)二甲雙胍對急性鹽度脅迫下大彈涂魚糖代謝的影響。實(shí)驗(yàn)共設(shè)置2個(gè)處理組:高鹽度組(30‰)和二甲雙胍組(30‰,10μM),脅迫實(shí)驗(yàn)為期24 h。結(jié)果表明,高鹽度組和二甲雙胍組實(shí)驗(yàn)魚肝GK的m RNA表達(dá)量呈先升高后降低趨勢,6-24 h時(shí),二甲雙胍組實(shí)驗(yàn)魚顯著高于高鹽度組;高鹽度組和二甲雙胍組實(shí)驗(yàn)魚G6Pase的m RNA表達(dá)量呈先升高后降低趨勢,6-24 h時(shí),二甲雙胍組顯著低于高鹽度組;高鹽度組和二甲雙胍組實(shí)驗(yàn)魚PEPCK的m RNA表達(dá)量呈逐漸上升趨勢,二甲雙胍組顯著低于高鹽度組。結(jié)果表明,二甲雙胍可以提高高鹽脅迫下大彈涂魚肝臟中糖酵解的作用,降低糖異生的作用,可以有效的促進(jìn)大彈涂魚對碳水化合物的利用。
【圖文】：

圖 3-1 Na+/K+-ATP 酶 mRNA 表達(dá)量Fig.3.1 The mRNA expression of Na+/K+-ATPase enzyme肝和鰓中 GS 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化無顯著性差異高鹽組鰓中 GS 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化逐漸降低，，<0.05；圖 3-2)，高鹽組肝中 GS 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間到最高水平。對照組肝和鰓中 GP 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)5；圖 3-3；圖 3-5)。高鹽海組魚鰓中 GP 的 mRNA 表達(dá)再升高，在 1h 時(shí)高鹽組 GP 的 mRNA 表達(dá)量顯著高于組中魚肝中 GP 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化先升高后降顯著高于對照組(P<0.05；圖 3-5)。

鰓中 GS 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化無顯著性差異(P＞0.05；圖3-2；圖 3-4)，高鹽組鰓中 GS 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化逐漸降低，在 24h 時(shí)顯著低于對照組(P<0.05；圖 3-2)，高鹽組肝中 GS 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化先升高后降低，在 1h 處達(dá)到最高水平。對照組肝和鰓中 GP 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化無顯著性差異(P＞0.05；圖 3-3；圖 3-5)。高鹽海組魚鰓中 GP 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化先升高后降低再升高，在 1h 時(shí)高鹽組 GP 的 mRNA 表達(dá)量顯著高于對照組(P<0.05；圖 3-3)。高鹽組中魚肝中 GP 的 mRNA 表達(dá)量隨時(shí)間變化先升高后降低，在 3h 處達(dá)到最高水平且顯著高于對照組(P<0.05；圖 3-5)。
【學(xué)位授予單位】：浙江海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S917.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2624770