發(fā)布時間：2024-04-13 03:27

　　大豆(Glycie max)是重要的經(jīng)濟作物,屬于中度耐鹽性植物。利用現(xiàn)代育種手段,培育高耐鹽性大豆種質資源,充分利用鹽堿地等邊際土地種植大豆,以緩解大豆的進口依賴度的需求變得越來越迫切。鹽漬化土壤對植物產生的危害主要是Na+的毒害作用,植物中的SOS1蛋白(salt overly sensitive 1,SOS1)是細胞膜上的Na+/H+逆轉運蛋白,主要介導Na+外排或Na+區(qū)域化來減少Na+對細胞的危害。前期利用CRISPR/Cas9基因編輯技術已成功獲得了大豆Na+/H+逆轉運蛋白GmSOS1的突變體植株系。本研究,利用PCR、測序和CAPS分子標記技術,對已經(jīng)獲得的T3和T4代大豆突變體植株系進行檢測,并根據(jù)其突變類型進行分類,進行了耐鹽性評價及基因功能的初步分析。研究結果為探討耐鹽性差異與不同編輯位點之間的相關性,闡明大豆GmSOS1耐鹽性調控機理,獲得具有育種價值的耐鹽性大豆新種質資源奠定理論與實踐基礎。本研究的主要結果如下:(1)前期利用CRISPR/Cas9基因編輯技術,編輯大豆GmSOS1激活域和自抑制域之間的連接序列,獲得了大豆Gmsos1突變系。根據(jù)多序列比對及生...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１植物細胞中ＳＯＳ途徑示意圖ｔ５］??注：１４－３－３：?１４－３－３?蛋白；ＧＩ：?（ＧＩＧＡＮＴＥＡ）?ＧＩＧＡＮＴＥＡ?蛋白；ＳＣａＢＰ?１／８：?（ｃａｌｃｉｕｍ－ｂｉｎｄｉｎｇ??ｐｒｏｔｅｉｎｌ／８）鈣結合蛋白?１／８；?ＮＨＸ：?（Ｎａ＋／Ｈ＋ｅｘｃｈａｎｇｅｒ）鈉離子／氫質子交換蛋白，？?ＰＫＳ５／２４：?（Ｓ０Ｓ２－ｌｉｋｅ??

１．１植物中的ＳＯＳ途徑??高鹽環(huán)境下，為降低細胞內Ｎａ＋的大量積累，植物通過限制Ｎａ＋攝取、增加Ｎａ＋外??排和對細胞內Ｎａ＋的區(qū)隔等策略以降低細胞質中的Ｎａ＋濃度，維持相對較高的Ｋ＋／Ｎａ＋??比，進而保證植物的正常生命活動⑴。??在這些過程中起關鍵作用的是質膜Ｎａ＋／Ｈ＋逆....

圖１－２擬南芥ＡｔＳＯＳｌ功能域及激活機制Ｍ２３】??注：ＡｔＳＯＳｌ包括Ｎ－端跨膜域（ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ?ｄｏｍａｉｎｓ，?ＴＭ，黃色）、與ＡｔＮＨＸ８同源的胞內??

ＳＯＳ１也成為目前己知的最長的Ｎａ＋／Ｈ＋逆轉運蛋白，ＳＯＳ１蛋白Ｎ端的跨膜??區(qū)和Ｃ端位于細胞質中的長鏈尾巴共同構成了一個同源二聚體結構。ＳＯＳ１蛋白的跨膜??結構域與胞質結構域相互作用來抑制其轉運活性（圖１－２）?［２２，２３］。無鹽脅迫時，ＡｔＳＯＳｌ??的Ｃ末端自抑制域與....

圖1礴植物5051蛋白多序列比對

用擬南芥ＡｔＳＯＳｌ?（ＡＴ２Ｇ０１９８０）的信息通過ｐｈｙｔｏｚｏｍｅｌＯ同源比對獲得??（Ｇｌｙｍａ．０８Ｇ０９２０００）基因序列信息。Ｓ０Ｓ１功能域和進化樹分析顯示，大豆Ｓ０Ｓ１蛋白??和其他物種中的２２個沿基因具有高度同源的Ｎａ＋／Ｈ＋交換域，因此可能與其他已知??物種的....

圖１－５大豆遺傳轉化載體３５Ｓ：ｈＳｐＣａｓ９?－?ｐＧｍＵ６?－?ｓｇＲＮＡ構建示意圖??Ａ：ＣａＭＶ３５Ｓ啟Ｃａｓ９，?ｓＲＮＡＧｍＵ６，ＮＬＳ

接序列設計２個ｓｇＲＮＡ位點（ＳＧ１和ＳＧ２），并構建載體ｐＣＢＳＧ０４－ＧｍＵ６：ｓｇＲＮＡ－??ＣａＭＶ３５Ｓ：Ｃａｓ９，將重組載體轉入農桿菌ＥＨＡ１９５后利用子葉節(jié)轉入大豆ｗｉｌｌｉａｍｓ８２中??（圖１－５）。從ＴＯ代開始在主莖第二片復葉完全展開時（Ｖ２期）進行草丁膦抗性....

本文編號：3952411