過(guò)氧化物酶(Peroxidase,POD)是一種以鐵卟啉為輔基的金屬酶,廣泛分布于微生物、植物、動(dòng)物中。過(guò)氧化物酶種類繁多,根據(jù)其所在位置將過(guò)氧化物酶分為動(dòng)物來(lái)源、植物和微生物來(lái)源2個(gè)超家族。不同種類過(guò)氧化物酶在生物體內(nèi)參與不同生化反應(yīng)。目前對(duì)過(guò)氧化物酶的研究主要集中在植物體內(nèi)作用和體外應(yīng)用,體內(nèi)作用涉及植物的生長(zhǎng)發(fā)育、逆境脅迫、光合作用、呼吸作用以及酶促褐變等一系列方面。體外應(yīng)用中過(guò)氧化物酶在污水處理、生物傳感器制備、生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床檢測(cè)、工業(yè)釀造方面作用突出。過(guò)氧化物酶是調(diào)控植物生成發(fā)育的關(guān)鍵性酶,它能以H₂O₂為電子供體催化酚類化合物轉(zhuǎn)化為醌類化合物,醌類物質(zhì)再通過(guò)聚合作用在甘薯表面形成棕色或黑色斑點(diǎn)。當(dāng)植物受到機(jī)械損傷時(shí),過(guò)氧化物酶與酚類物質(zhì)接觸導(dǎo)致植物出現(xiàn)褐變現(xiàn)象。褐變會(huì)影響甘薯營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、口感、外觀以及造成資源浪費(fèi),而中國(guó)又是甘薯種植面積最大的國(guó)家,因此會(huì)嚴(yán)重阻礙甘薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展。研究表明,目前關(guān)于酶促褐變研究大多集中在控制和防治兩個(gè)方面,而酶促褐變發(fā)生和抑制分子機(jī)制尚不清楚,而且市面上一些抑制劑如曲酸、焦亞硫酸鈉會(huì)對(duì)人體造健康危害。...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 過(guò)氧化物酶簡(jiǎn)介
    1.2 過(guò)氧化物酶種類及其分布
    1.3 過(guò)氧化物酶研究進(jìn)展
    1.4 過(guò)氧化物酶分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
        1.4.1 過(guò)氧化物酶基因特點(diǎn)
        1.4.2 POD基因表達(dá)調(diào)控
        1.4.3 過(guò)氧化物酶的分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
    1.5 過(guò)氧化物酶的反應(yīng)機(jī)理
    1.6 過(guò)氧化物酶生理功能
        1.6.1 參與物質(zhì)氧化反應(yīng)
        1.6.2 具有清除活性氧功能
        1.6.3 木質(zhì)素和木栓質(zhì)的合成
        1.6.4 參與激素降解
        1.6.5 參與環(huán)境脅迫
    1.7 過(guò)氧化物酶的應(yīng)用
        1.7.1 過(guò)氧化物酶在環(huán)保方面應(yīng)用
        1.7.2 過(guò)氧化物酶在生物傳感器方面應(yīng)用
        1.7.3 過(guò)氧化物酶在食品中作用
        1.7.4 過(guò)氧化物酶在醫(yī)學(xué)方面應(yīng)用
        1.7.5 在有機(jī)合成和聚合物方面的應(yīng)用
    1.8 分子模擬應(yīng)用
        1.8.1 分子模擬簡(jiǎn)介
        1.8.2 同源建模
        1.8.3 分子對(duì)接研究
第2章 引言
    2.1 選題來(lái)源與選題意義
        2.1.1 選題來(lái)源
        2.1.2 選題意義
    2.2 主要研究?jī)?nèi)容
        2.2.1 過(guò)氧化物酶生物信息學(xué)分析
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)材料選擇
        2.2.3 過(guò)氧化物酶同工酶分離純化
        2.2.4 過(guò)氧化物酶同工酶酶學(xué)性質(zhì)研究
        2.2.5 過(guò)氧化物酶同工酶催化機(jī)制和抑制機(jī)制研究
        2.2.6 Shotgun質(zhì)譜鑒定同源建模分析
        2.2.7 木樨草素、植酸對(duì)過(guò)氧化物酶同工酶影響
        2.2.8 技術(shù)路線
第3章 過(guò)氧化物酶生物信息學(xué)分析
    3.1 引言
    3.2 數(shù)據(jù)檢索與分析
        3.2.1 甘薯過(guò)氧化物酶氨基酸序列
        3.2.2 甘薯過(guò)氧化物酶蛋白質(zhì)序列多重序列比對(duì)
        3.2.3 不同物種過(guò)氧化物酶基因系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析
    3.3 結(jié)果分析
        3.3.1 過(guò)氧化物酶基因數(shù)目及結(jié)構(gòu)分析
        3.3.2 過(guò)氧化物酶系統(tǒng)進(jìn)化分析
第4章 過(guò)氧化物酶同工酶分離純化
    4.1 引言
    4.2 材料與試劑
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 主要試劑
        4.2.3 主要儀器
        4.2.4 主要試劑配制
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 酶活力測(cè)定
        4.3.2 蛋白質(zhì)含量測(cè)定
        4.3.3 最佳材料篩選
        4.3.4 過(guò)氧化物酶同工酶分離純化‘忠薯1’
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 蛋白質(zhì)含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
        4.4.2 過(guò)氧化物酶同工酶分離純化
第5章 過(guò)氧化物酶同工酶酶學(xué)性質(zhì)研究
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 試驗(yàn)材料
        5.2.2 主要試劑
        5.2.3 主要儀器
        5.2.4 試驗(yàn)方法
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 過(guò)氧化物酶最適pH和pH穩(wěn)定性
        5.3.2 過(guò)氧化物酶最適溫度和熱穩(wěn)定性
        5.3.3 金屬離子對(duì)過(guò)氧化物酶影響
        5.3.4 不同化合物對(duì)過(guò)氧化物酶同工酶影響
        5.3.5 過(guò)氧化物酶同工酶Km測(cè)定
        5.3.6 過(guò)氧化物酶反應(yīng)類型鑒定
第6章 過(guò)氧化物酶同工酶質(zhì)譜鑒定和同源建模分析
    6.1 引言
    6.2 實(shí)驗(yàn)部分
        6.2.1 主要儀器和軟件
        6.2.2 主要試劑
        6.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    6.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        6.3.1 n ESI-LC-LC/MS實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        6.3.2 同源建模模板建立
        6.3.3 模型評(píng)估
        6.3.4 過(guò)氧化物酶分子對(duì)接分析
第7章 抗壞血酸等抑制劑對(duì)過(guò)氧化物酶抑制動(dòng)力學(xué)研究
    7.1 引言
    7.2 材料與試劑
        7.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        7.2.2 主要試劑
        7.2.3 主要儀器
    7.3 實(shí)驗(yàn)部分
        7.3.1 抗壞血酸等抑制劑對(duì)甘薯過(guò)氧化物酶同工酶影響
        7.3.2 各過(guò)氧化物酶同工酶抑制類型及抑制系數(shù)的測(cè)定
        7.3.3 抗壞血酸等抑制劑與過(guò)氧化物酶同工酶分子對(duì)接
    7.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        7.4.1 抗壞血酸、焦亞硫酸鈉、還原性谷胱甘肽IC50
        7.4.2 抗壞血酸對(duì)過(guò)氧化物酶的抑制類型及抑制系數(shù)測(cè)定
        7.4.3 焦亞硫酸鈉對(duì)過(guò)氧化物酶的抑制類型及抑制系數(shù)測(cè)定
        7.4.4 還原性谷胱甘肽對(duì)過(guò)氧化物酶的抑制類型及抑制系數(shù)測(cè)定
        7.4.5 分子對(duì)接分析
第8章 木樨草素、植酸對(duì)過(guò)氧化物酶抑制動(dòng)力學(xué)研究
    8.1 引言
    8.2 實(shí)驗(yàn)部分
        8.2.1 儀器與試劑
        8.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    8.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        8.3.1 木樨草素、植酸對(duì)過(guò)氧化物酶活性影響及抑制類型鑒定
第9章 植酸、木樨草素與過(guò)氧化物酶相互作用研究
    9.1 引言
    9.2 實(shí)驗(yàn)部分
        9.2.1 主要儀器、軟件和試劑
        9.2.2 試驗(yàn)方法
    9.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        9.3.1 植酸、木樨草素對(duì)過(guò)氧化物酶熒光淬滅機(jī)制研究
        9.3.2 熱力學(xué)分析
        9.3.3 能量轉(zhuǎn)移和結(jié)合距離
        9.3.4 分子對(duì)接分析
第10章 植酸、木樨草素對(duì)過(guò)氧化物酶構(gòu)象影響
    10.1 引言
    10.2 實(shí)驗(yàn)部分
        10.2.1 主要儀器與試劑
        10.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    10.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        10.3.1 同步熒光光譜分析
        10.3.2 過(guò)氧化物酶同工酶酶二級(jí)結(jié)構(gòu)的變化-圓二色譜分析
        10.3.3 傅里葉紅外光譜分析-過(guò)氧化物酶同工酶二級(jí)結(jié)構(gòu)變化
第11章 結(jié)論與展望
    11.1 結(jié)論
    11.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    11.3 展望
參考文獻(xiàn)
附錄 :縮詞略表
致謝
在校期間發(fā)表論文



本文編號(hào)：3748659