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耐鹽小冰麥篩選及分子細(xì)胞遺傳學(xué)鑒定

發(fā)布時(shí)間:2021-12-02 03:34
  PSR3628是從美國引進(jìn)的耐鹽八倍體小冰麥。本試驗(yàn)對(duì)PSR3628雜交后代株系進(jìn)行耐鹽性鑒定,篩選與耐鹽相關(guān)的EST-SSR標(biāo)記,對(duì)耐鹽及鹽敏感株系進(jìn)行順序GISH-FISH分析,為小麥耐鹽QTLs精細(xì)定位、遺傳育種奠定基礎(chǔ)。獲得的主要結(jié)果如下:(1)對(duì)雜交后代株系進(jìn)行萌發(fā)期耐鹽性鑒定,發(fā)現(xiàn)小冰麥耐鹽性鑒定的鹽脅迫適宜濃度為150 mmol/L。在A19群體(PSR3628×Begra F6,152個(gè)株系)中,利用加權(quán)隸屬函數(shù)值(D值)對(duì)其耐鹽性進(jìn)行評(píng)價(jià),可將152份株系分為5個(gè)級(jí)別:高度耐鹽(Ⅰ級(jí);20份,D值范圍為0.8068~0.6447)、耐鹽(Ⅱ級(jí);42份,D值范圍為0.6267~0.4965)、中等耐鹽(Ⅲ級(jí);55份,D值范圍為0.4922~0.3636)、鹽敏感(Ⅳ級(jí);24份,D值范圍為0.3509~0.2353)、高度鹽敏感(Ⅴ級(jí);11份,D值范圍為0.2121~0.0986)。對(duì)A17群體(PSR3628×Pavon BC1F3,226個(gè)株系)與A18群體(PSR3628×Pavon F3<... 

【文章來源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 我國鹽堿地分布及其危害概述
    1.2 植物耐鹽機(jī)理研究概況
        1.2.1 滲透平衡調(diào)節(jié)機(jī)制
        1.2.2 抗氧化防御系統(tǒng)調(diào)節(jié)機(jī)制
        1.2.3 脅迫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)
    1.3 植物耐鹽相關(guān)基因研究概況
        1.3.1 滲透調(diào)節(jié)相關(guān)基因
        1.3.2 通道蛋白相關(guān)基因
        1.3.3 抗氧化相關(guān)基因
    1.4 小麥及其近緣耐鹽基因挖掘研究進(jìn)展
        1.4.1 小麥近緣物種耐鹽基因研究概況
        1.4.2 小麥中耐鹽基因研究概況
    1.5 小麥中外源耐鹽遺傳物質(zhì)導(dǎo)入的方法
        1.5.1 小麥雙二倍體的構(gòu)建
        1.5.2 小麥異附加系的構(gòu)建
        1.5.3 異代換系
        1.5.4 異源易位系
    1.6 小麥中外源遺傳物質(zhì)的檢測(cè)
        1.6.1 形態(tài)標(biāo)記檢測(cè)
        1.6.2 細(xì)胞學(xué)標(biāo)記檢測(cè)
        1.6.3 生化標(biāo)記檢測(cè)
        1.6.4 分子標(biāo)記檢測(cè)
        1.6.5 原位雜交技術(shù)
    1.7 本研究目的及意義
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)室儀器
        2.1.3 試驗(yàn)常用試劑及其配制方法
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 最適鹽脅迫濃度篩選及親本芽期耐鹽性鑒定
        2.2.2 A19群體鹽脅迫處理
        2.2.3 A19群體指標(biāo)測(cè)定及方法
        2.2.4 A19群體耐鹽性評(píng)價(jià)
        2.2.5 A18及A17群體鹽脅迫處理
        2.2.6 A17及A18群體指標(biāo)測(cè)定及方法
        2.2.7 A17及A18群體耐鹽性評(píng)價(jià)
        2.2.8 載玻片及蓋玻片的處理
        2.2.9 根尖染色體的制備
        2.2.10 探針標(biāo)記
        2.2.11 基因組DNA的提取
        2.2.12 DNA濃度及純度檢測(cè)
        2.2.13 FISH分析
        2.2.14 封阻DNA的制備
        2.2.15 雜交信號(hào)脫洗
        2.2.16 GISH雜交
        2.2.17 SSR的引物來源
        2.2.18 標(biāo)記與性狀的相關(guān)分析
        2.2.19 PCR反應(yīng)體系及擴(kuò)增程序
        2.2.20 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 最適鹽脅迫濃度篩選
    3.2 親本芽期耐鹽性鑒定
    3.3 A19群體芽期耐鹽性鑒定
        3.3.1 鹽脅迫對(duì)種子萌發(fā)的影響
        3.3.2 各個(gè)指標(biāo)間的耐鹽性差異
        3.3.3 A19群體的綜合評(píng)價(jià)
    3.4 A17及A18群體芽期耐鹽性鑒定
    3.5 小冰麥分子標(biāo)記篩選及鑒定
        3.5.1 小冰麥EST-SSR分布特點(diǎn)
        3.5.2 EST-SSR的基元重復(fù)類型及特征
        3.5.3 EST-SSR不同核苷酸優(yōu)勢(shì)基元的特征
        3.5.4 EST-SSR的引物設(shè)計(jì)
        3.5.5 耐鹽、鹽敏感池間的多態(tài)性引物篩選
        3.5.6 耐鹽、鹽敏感池單株間引物多態(tài)性驗(yàn)證
        3.5.7 小冰麥性狀與標(biāo)記的相關(guān)分析
    3.6 小冰麥細(xì)胞學(xué)鑒定
        3.6.1 小冰麥親本PSR3628的細(xì)胞遺傳學(xué)鑒定
        3.6.2 小冰麥細(xì)胞學(xué)鑒定
第四章 討論與結(jié)論
    4.1 討論
        4.1.1 小麥芽期耐鹽性鑒定及評(píng)價(jià)指標(biāo)
        4.1.2 EST-SSR標(biāo)記的分布特點(diǎn)
        4.1.3 耐鹽分子標(biāo)記的開發(fā)利用
        4.1.4 耐鹽基因及其染色體定位
    4.2 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄 Ⅰ
附錄 Ⅱ



本文編號(hào):3527647

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