本研究通過查閱相關數據庫中轉基因玉米品系中的常用遺傳轉化載體中含有的調控元件和標記基因,并結合目前國內外現有轉基因檢測標準方法,建立了基于P-CaMV 35S、T-NOS、Bar基因、Pat基因、Cp4-epsps基因、NPTⅡ基因、cry1A基因、P-Rice actin、phy結構特異性片段等9種元件/基因實時熒光PCR方法的玉米轉基因篩查策略,并對32種轉基因玉米進行篩查實驗測試,結果表明本篩查策略可覆蓋30種獨立性狀轉化體。同時還構建了包含玉米內標基因及9種目標元件/基因序列的質粒分子,經過驗證該質粒分子具有良好的可替代性,可作為陽性對照與本檢測方法配套使用。 

【文章來源】：生物技術通報. 2020,36(05)北大核心

【文章頁數】：9 頁

【部分圖文】：

玉米轉基因成分篩查陽性質粒pYMSC-1905圖譜

截止2019年11月,我國對植酸酶玉米BVLA430101發(fā)放了生產用安全證書,并且對20種國外玉米轉化體發(fā)放了進口用作加工原料安全證書,其中包括本次實驗未參與驗證的Bt11 X GA21,這21種轉化體中除DAS-40278-9外均可以被本方法覆蓋。圖3 陽性質粒分子實時熒光PCR驗證信號

圖2 陽性質粒分子3D-d PCR驗證熒光信號在轉基因作物的研發(fā)過程中,為使外源基因適合在宿主植物中進行表達,經常需要根據宿主密碼子的偏好對目標元件的密碼子進行修飾,從而造成相同名稱的基因不一定具有完全相同的核苷酸序列。因此,在設計檢測方法時必須考慮同名的基因元件其DNA序列是否有差異,檢測靶標在不同轉化事件中是否一致,能否用同樣的引物進行檢測。

【參考文獻】：
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本文編號：3071046