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水稻NRPC1/NRPC2基因調控GLK的轉基因功能驗證

發(fā)布時間:2021-03-05 07:05
  光合效率是影響水稻產量的重要因素。在本實驗室前期研究中,克隆到兩個水稻高光效基因NRPC1(negative regulator of photosynthesis and chloroplast development 1)和NRPC2(negative regulator of photosynthesis and chloroplast development 2),通過酵母雙雜實驗發(fā)現NRPC1與GLK1和GLK2都發(fā)生互作,NRPC2也與GLK1和GLK2發(fā)生相互作用。在此基礎上,通過轉基因技術獲得glk1glk2突變體、glk1glk2nrpc1突變體和GLK1/GLK2過表達材料,將其與NRPC材料進行雜交,對獲得的材料進行葉綠素含量測定及光合相關基因的表達分析,確定NRPC與GLK之間的上下游關系,闡明兩者對葉綠體發(fā)育和葉綠素合成的調控機制;利用RNA-Seq及生物信息學分析,篩選出受NRPC1基因調控的下游基因,結合定量分析檢測下游相關基因的表達量。首先,構建GLK1/GLK2的CRISPR/Cas9敲除和過表達載體,利用轉基因技術,獲得glk1glk2突變體、glk... 

【文章來源】:浙江師范大學浙江省

【文章頁數】:80 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

水稻NRPC1/NRPC2基因調控GLK的轉基因功能驗證


植物光系統I的結構模型

結構模型,植物,亞基,光系統


2.2 光系統 II光系統 II 是多亞基膜復合物,位于堆積的革蘭氏類囊體區(qū)域[4,62],藍藻中的PSII 超復合物包括 RC 蛋白 PsbA(D1)和 PsbD(D2),天線亞基 PsbB(CP47)和PsbC(CP43),膜內在小亞基(PsbE,PsbF,PsbH-M,PsbN,PsbX,PsbY,PsbZ 和PsbYcf12)和 3 個外在亞基(PsbO,PsbU 和 PsbV)(圖 1.2)。

野生型,突變體,葉綠素含量,表型


3.3 glk1glk2 和 glk1glk2nrpc1 突變體光合相關基因表達及葉綠體觀察對 glk1glk2 和 glk1glk2nrpc1 突變體株系進行葉綠素合成及光合相關基因的定量表達分析表明,與野生型相比,nrpc1 突變體表達量顯著高于野生型,但是在 glk1glk2 和 glk1glk2nrpc1 突變體中表達量遠低于野生型(圖 2.4A)。通過電鏡切片技術觀察葉綠體發(fā)育情況,發(fā)現在葉肉細胞中,與野生型相比,glk1glk2 和圖 2.3 野生型、nrpc1、glk1glk2 和 glk1glk2nrpc1 突變體表型及葉綠素含量Fig.2.3 WT, nrpc1, glk1/glk2 and glk1/glk2/nrpc1 mutant phenotypes and chlorophyll contentA:成熟期植株;B:葉綠素 a(Chla),葉綠素 b(Chlb)和類胡蘿卜素(Car)含量;*表示葉綠素含量與野生型顯著不同,t 檢驗,*P<0.05,**P<0.01。A: mature plants;B: leaf chlorophyll a(Chla), b(Chlb) and carotenoid content;*Indicates that the chlorophylcontent is significantly different from the WT, t-test,*P<0.05,**P<0.01.WT nrpc1 glk1glk2 glk1glk2nrpc1


本文編號:3064790

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