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‘臺(tái)綠1號(hào)’青花菜種子純度的分子鑒定和抗青花菜猝倒病的種子包衣技術(shù)開(kāi)發(fā)

發(fā)布時(shí)間:2021-06-23 09:14
  隨著青花菜(Brassica oleracea var.italica Planck)的栽培面積越來(lái)越廣,青花菜的工廠化育苗逐漸成為主流,但是青花菜的純度問(wèn)題和猝倒病的頻發(fā)制約了青花菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,為了獲得一種準(zhǔn)確、快速鑒定青花菜純度和緩解青花菜猝倒病現(xiàn)狀的方法,本文通過(guò)青花菜田間調(diào)查和SSR標(biāo)記對(duì)112份青花菜材料進(jìn)行了雜交種的純度鑒定,并對(duì)青花菜猝倒病進(jìn)行了抗猝倒病的種子包衣開(kāi)發(fā)試驗(yàn),獲得了以下主要研究結(jié)果:1.114對(duì)SSR引物對(duì)有28對(duì)具有多態(tài)性,共產(chǎn)生擴(kuò)增譜帶346條,平均每個(gè)引物對(duì)產(chǎn)生譜帶12.4條。每個(gè)引物對(duì)的多態(tài)性比率在5.1%-84.6%之間,平均每個(gè)引物對(duì)的多態(tài)性比率為30.7%。2.青花菜的田間純度鑒定結(jié)果與SSR標(biāo)記結(jié)果有一定差異。根據(jù)田間鑒定,108份青花菜材料符合‘臺(tái)綠1號(hào)’的典型特征,4份植株性狀出現(xiàn)差異,田間純度鑒定為96.43%。SSR分子標(biāo)記的純度鑒定結(jié)果表明107份青花菜的條帶具有互補(bǔ)型條帶,4份青花菜的條帶不具有互補(bǔ)型條帶,純度為95.5%,兩種鑒定結(jié)果的一致性為99.1%。3.通過(guò)常規(guī)組織分離法和核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔(ITS)區(qū)序列分析,發(fā)現(xiàn)引... 

【文章來(lái)源】:浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 青花菜概述
    1.2 蔬菜種子純度鑒定的方法和意義
        1.2.1 蔬菜種子純度鑒定的意義
        1.2.2 種子純度鑒定的發(fā)展
            1.2.2.1 形態(tài)標(biāo)記鑒定法
            1.2.2.2 生化標(biāo)記鑒定
            1.2.2.3 分子標(biāo)記鑒定法
    1.3 青花菜種子的純度鑒定
    1.4 青花菜工廠化育苗
        1.4.1 青花菜的工廠化育苗的定義
        1.4.2 青花菜工廠化育苗的意義
        1.4.3 青花菜工廠化育苗中存在的問(wèn)題
    1.5 種子包衣技術(shù)
        1.5.1 種子包衣劑的種類(lèi)及功能
            1.5.1.1 種衣劑的種類(lèi)
            1.5.1.2 種子包衣的功能
        1.5.2 種子包衣的研究概況
            1.5.2.1 種子包衣在種衣劑方面的研究
            1.5.2.2 種子包衣在功能性方面的研究
    1.6 本試驗(yàn)的依據(jù)、目的及內(nèi)容
2 青花菜種子的純度鑒定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 引物
        2.1.3 方法
            2.1.3.1 DNA提取
            2.1.3.2 DNA提取質(zhì)量檢測(cè)
            2.1.3.3 PCR擴(kuò)增體系和反應(yīng)程序
            2.1.3.4 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的聚丙烯酰胺凝膠電泳
            2.1.3.5 青花菜田間植株形態(tài)鑒定
            2.1.3.6 青花菜F1代純度鑒定及與田間鑒定一致性研究
            2.1.3.7 SSR純度鑒定的應(yīng)用
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 DNA的獲得及模板用量確定
            2.2.1.1 DNA電泳檢測(cè)結(jié)果
            2.2.1.2 DNA模板用量的確定
        2.2.2 引物的篩選情況
            2.2.2.1 引物對(duì)擴(kuò)增多態(tài)性情況
            2.2.2.2 用于青花菜純度鑒定的引物的確定
        2.2.3 利用 SSR 分子標(biāo)記對(duì)青花菜進(jìn)行純度鑒定的結(jié)果
            2.3.1 引物對(duì)FITO008的SSR純度鑒定結(jié)果
            2.3.2 引物對(duì)FITO457的SSR純度鑒定的結(jié)果
        2.2.4 青花菜田間鑒定與SSR純度鑒定比較
            2.2.4.1 青花菜田間植株形態(tài)學(xué)分析
            2.2.4.2 青花菜F1代純度鑒定及與田間鑒定一致性分析
        2.2.5 SSR純度鑒定的應(yīng)用
            2.2.5.1 用引物對(duì)FITO008對(duì)蕭山市提供的種子進(jìn)行純度鑒定的結(jié)果
            2.2.5.2 臺(tái)州市農(nóng)科院提供的“臺(tái)綠1號(hào)”純度鑒定結(jié)果
    2.3 討論
        2.3.1 SSR引物的多態(tài)性
        2.3.2 青花菜雜交種子純度鑒定
        2.3.3 SSR分子標(biāo)記在青花菜生產(chǎn)上的應(yīng)用
    2.4 結(jié)論
3 青花菜抗猝倒種子包衣
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
            3.1.2.1 病原菌的采集和分離
            3.1.2.2 病原菌致病性測(cè)定
            3.1.2.3 分子生物學(xué)鑒定
            3.1.2.4 青花菜種子包衣的處理
            3.1.2.5 包衣青花菜種子安全性檢測(cè)
            3.1.2.6 殺菌劑包衣種子對(duì)青花菜苗期猝倒病的防治效果
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 猝倒病致病菌的獲得和種子包衣處理
            3.2.1.1 病原菌形態(tài)特征
            3.2.2.2 病原菌的致病性
            3.2.2.3 病原菌核糖體DNA-ITS區(qū)
            3.2.2.4 包衣種子效果評(píng)價(jià)
        3.2.2 包衣處理對(duì)青花菜種子及籽苗質(zhì)量的影響
            3.2.2.1 包衣處理對(duì)青花菜種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)的影響.353.2.2.2 包衣處理對(duì)青花菜籽苗生長(zhǎng)的影響
            3.2.2.2 包衣處理對(duì)青花菜籽苗生長(zhǎng)的影響
            3.2.2.3 基礎(chǔ)配方包衣對(duì)青花菜種子活力的影響
        3.2.3 殺菌劑包衣對(duì)猝倒病的防效效果
            3.2.3.1 殺菌劑包衣對(duì)基質(zhì)接種病菌情況下青花菜出苗率的影響
            3.2.3.2 殺菌劑包衣對(duì)基質(zhì)接種病菌情況下青花菜病苗率的影響
            3.2.3.3 殺菌劑包衣對(duì)基質(zhì)接種病菌情況下青花菜成苗率的影響
    3.3 討論
        3.3.1 致病菌的分離和鑒定
        3.3.2 種子包衣對(duì)青花菜種子質(zhì)量的影響
        3.3.3 殺菌劑種子包衣對(duì)青花菜的猝倒病的防效效果
    3.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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[3]大豆根腐病多種病原菌的分子檢測(cè)及復(fù)合侵染規(guī)律研究[D]. 鄭培娥.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]大豆尖鐮孢菌的快速分子檢測(cè)與遺傳多樣性分析及品種抗性研究[D]. 王健生.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
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[7]應(yīng)用DNA分子標(biāo)記鑒定幾種蔬菜作物種子純度和真實(shí)性的研究[D]. 張穎.浙江大學(xué) 2008
[8]種子包衣對(duì)番茄防病壯苗效果的研究[D]. 張靜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007
[9]青花菜品種鑒定與雄性不育胞質(zhì)分析[D]. 陸信娟.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[10]甜瓜雜交種SSR指紋圖譜標(biāo)記和鑒定技術(shù)的研究[D]. 艾呈祥.華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號(hào):3244676

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