鋅指蛋白是一類(lèi)具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子,因其具有指狀結(jié)構(gòu)特征且能結(jié)合Zn2+而得名。鋅指蛋白是個(gè)龐大的家族,根據(jù)Cys和His殘基的數(shù)目和位置可將鋅指轉(zhuǎn)錄因子分為C2H2、C8、C6、C3HC4、C2HC、C2HC5、C4、CCCH和C4HC3九種類(lèi)型,其中C2H2型是生物中發(fā)現(xiàn)的種類(lèi)最多的一類(lèi)鋅指蛋白。研究表明,植物體中的鋅指蛋白在植物生長(zhǎng)發(fā)育和耐逆性等多種生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮作用。本研究以白樺的鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子基因?yàn)檠芯繉?duì)象,對(duì)基因的表達(dá)和功能進(jìn)行了初步研究,主要研究結(jié)論如下：（1）利用qRT-PCR技術(shù),對(duì)不同脅迫條件下14個(gè)BpZFPs基因在白樺根組織中的時(shí)序表達(dá)進(jìn)行了分析,結(jié)果表明,BpZFP3、BpZFP4和BpZFP12均能夠?qū)Ω啕}、干旱脅迫作出應(yīng)答,并且在不同脅迫條件下基因的表達(dá)模式各不相同。（2）利用PCR技術(shù),克隆得到BpZFP3全長(zhǎng)基因,蛋白保守結(jié)構(gòu)域分析表明,BpZFP3屬于C2H2-Type鋅指蛋白。（3）將BpZFP3構(gòu)建到植物表達(dá)載體pGWB5質(zhì)粒中,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進(jìn)行擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化,獲得3個(gè)表達(dá)量顯著高于對(duì)照的轉(zhuǎn)基因株系,PCR檢測(cè)表明基因整合到擬南芥... 

【文章來(lái)源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【圖文】：

圖１－１巧指域結(jié)構(gòu)示意圖??梓指蛋白廣泛分布在真核生物體中組成了一個(gè)龐大的家族，因此對(duì)于巧指蛋白的分??類(lèi)方法也有多種

又稱(chēng)為ＴＦＩＩＩＡ類(lèi)型梓指或經(jīng)典巧指，它是生物中發(fā)現(xiàn)的種類(lèi)最多、研究較為透徹。??Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白的巧指區(qū)一般為ＣＸ２＿４ＣＸ３ＦＸｓＬＸ２ＨＸ３＿５Ｈ?（Ｃ表示半脫氨酸，Ｈ表示氨酸，Ｘ表示任意氨基酸，Ｐ表示苯丙氨酸，Ｌ表示亮氨酸），其中兩個(gè)Ｃｙｓ和兩個(gè)Ｈｉ與Ｚｎ２＋形成配位鍵，進(jìn)而形成一個(gè)包含片發(fā)夾和一個(gè)ａ螺旋的緊密指狀結(jié)構(gòu)。植Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白除了含有巧指結(jié)構(gòu)外，一般還含有一個(gè)核定位信號(hào)區(qū)ＮＬＳ（也稱(chēng)Ｂｂｏｘ）：是與亞細(xì)胞定位相關(guān)的功能區(qū)；一個(gè)Ｌｂｏｘ：富含Ｌｅｕ的而且可能與蛋白質(zhì)相作用有關(guān)的功能區(qū)；一個(gè)ＤＬＮ－ｂｏｘ：靠近Ｃ端的與轉(zhuǎn)錄抑制活性相關(guān)的區(qū)域（圖２）。而并不是所有的植物Ｃ２Ｈ２型蛋白都有這些功能保守區(qū)域，有些沒(méi)有ＮＬＳ，有些沒(méi)ＤＬＮ－ｂｏｘ，而有些則是沒(méi)有心６〇＾１１９１。??植物Ｃ２Ｈ２型鋒指蛋白的結(jié)構(gòu)與其他真核生物相比有兩個(gè)明顯的特征：一是植物指蛋白相鄰巧指結(jié)構(gòu)間的間隔比較長(zhǎng)，而且變化較大，而多數(shù)動(dòng)物Ｃ２Ｈ２型梓指蛋白指間的距離很短，一般只有７個(gè)氨基酸，稱(chēng)為ＨＣ連接膚；二是植物Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白ａ螺旋區(qū)一般都含有ＱＡＬＧＧＨ保守序列，這是植物鋒指蛋白所特有的，在已發(fā)現(xiàn)的有動(dòng)物鋒指蛋白中都沒(méi)有這一段序列，送表明植物Ｃ２Ｈ２巧指蛋白家族可能涉及到控植物所特有的生命過(guò)程ｔｕＤｌ。??

２．３．３不同處理后ＢｐＺＦＰ耐鹽基因在白梓不同組織中的表達(dá)模式分析??進(jìn)一步對(duì)可能參與白巧鹽脅迫應(yīng)答反應(yīng)的Ｈ個(gè)基因（曲ＺＦ／ｙ、邸ＺＦ／Ｖ和??卸巧Ｐ／２）進(jìn)行各脅迫處理不同時(shí)間后在不同組織中的表達(dá)模式分析（圖２－２、圖２－３??和圖２－４）。結(jié)果顯示，ＮａＣｌ處理后：卸ＺｆＰｊ基因在白巧根和葉（除６ｈ和１２ｈ）中均??上調(diào)表達(dá)，但葉中表達(dá)量上調(diào)趨勢(shì)明顯低于根中，而�。冢疲蛟诎讝樓o中的相對(duì)表??達(dá)量在處理的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均呈下調(diào)趨勢(shì)；卸基因的變化趨勢(shì)與�。冢疲妫昊蛳�??似，只是在ＮａＣｌ處理４８ｈ后在莖中的相對(duì)表達(dá)量有所上調(diào)，但幅度很��；邱巧乎基??因在白梢的各組織中的表達(dá)量均上調(diào)，且上調(diào)幅度隨著處理的時(shí)間延長(zhǎng)而升高；ＰＥＧ處??理后：邱巧基因在白梓根（除１２ｈ、４化和７２ｈ）和葉中的相對(duì)表達(dá)量均呈明顯上調(diào)??趨勢(shì)，而莖中只在處理短時(shí)間內(nèi)（６ｈ）稍有上調(diào)，之后便轉(zhuǎn)為下調(diào)模式；卸ＺＦ／Ｖ基因??只是在葉中表達(dá)量上調(diào)趨勢(shì)明顯高于根中，其余變化趨勢(shì)與辟記八ｙ基因相似：??邸ＺＦ尸�；虻谋磉_(dá)趨勢(shì)與公的護(hù)八／正相反，�。冢剖Ｔ诎浊筛ǔ保玻�、４化和??７化）和葉中均下調(diào)表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3337059