發(fā)布時間：2020-06-22 07:11

【摘要】：隨著生態(tài)環(huán)境理念的倡導,生物防治越來越受重視,利用一種微生物去抑制另一種或一類微生物,可以最大限度的保護環(huán)境免受污染。本文在前期以楊樹爛皮病菌為靶標菌,從土壤樣品中篩選得到1株對其病原菌有強抑制作用的生防鏈霉菌的基礎上,對該菌株的發(fā)酵條件及抗病機理進行了較為系統(tǒng)的研究,以期開發(fā)出一種新型、高效、無毒的生物制劑,為該病害的生物防治提供新的思路和理論基礎。研究結果如下:1、對生防鏈霉菌的發(fā)酵條件進行優(yōu)化:發(fā)酵培養(yǎng)基營養(yǎng)成分篩選實驗結果表明:生防鏈霉菌可利用的碳源、氮源種類較多,最佳碳源為可溶性淀粉,最佳有機氮源為花生餅粉,無機氮源為硫酸銨。發(fā)酵培養(yǎng)基正交設計優(yōu)化實驗結果表明:最佳發(fā)酵培養(yǎng)基為可溶性淀粉70g,花生餅粉25g,酵母粉2g,硫酸銨3g,氯化鈉2.7g,碳酸鈣2.7g,水1000mL,pH7.2。搖床發(fā)酵的最佳條件為:發(fā)酵溫度28℃、初始pH7、發(fā)酵時間5d、菌株種齡5d、裝液量40m L/250mL、接種量3%。對發(fā)酵液生理生化特性研究表明菌株F57對溫度耐受性強,在28~121℃均有抑菌活性;酸堿耐受性測定表明pH4~14范圍內菌株抑菌活性較好,發(fā)酵液的貯存性和遺傳穩(wěn)定性均表現(xiàn)穩(wěn)定,具有較好開發(fā)應用價值。2、拮抗菌發(fā)酵液抑菌機理研究表明:菌株F57發(fā)酵液能抑制菌絲正常生長,可導致病原菌菌體內電解質滲漏,丙二醛含量增加,推斷該發(fā)酵液可作用于病原菌的細胞膜。對病原菌呼吸代謝酶系的研究結果表明:發(fā)酵液可抑制糖酵解途徑中的HK、PK活性,促進PFK活性提高,從而影響糖酵解順利進行;同時抑制TCA循環(huán)中的SDH活性,使TCA循環(huán)不能正常進行;促進Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP活性提高,使菌體能量轉換發(fā)生異常;還抑制GSH-Px活性,導致不能及時清除大量活性氧自由基,菌體細胞膜受損,最終導致病原菌的代謝系統(tǒng)紊亂,起到殺死和抑制病菌的作用。3、對寄主植物誘導抗性研究結果表明:噴施發(fā)酵液后,楊樹體內的抗性物質游離脯氨酸含量、類黃酮和總酚含量、可溶性蛋白含量增加,PAL活性提高,誘導了楊樹抗病性。本文首次研究了發(fā)酵液處理對楊樹體內SA和JA兩條信號傳導途徑相關基因表達變化情況,發(fā)現(xiàn)處理后楊樹的PR-1基因表達明顯上調,PAL基因在生長后期有顯著上調,COI1-1、COI1-2基因表達小幅上調,發(fā)酵液不同程度開啟了SA和JA信號途徑,誘導楊樹抗性。綜上,通過發(fā)酵條件優(yōu)化確定了生防菌搖瓶發(fā)酵最佳培養(yǎng)基配方及發(fā)酵條件,對其抗病機理研究表明生防菌發(fā)酵液既能通過提高楊樹抗性來抵御病菌侵入,同時亦可直接殺死和抑制楊樹爛皮病菌生長來起到防病效果。
【學位授予單位】：遼寧大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S763.7
【圖文】：

圖 1-1 不同碳源對菌株發(fā)酵液抑菌效果的影同有機氮源對菌株 F57 發(fā)酵液抑菌效果的影響構成微生物細胞和含氮代謝產物的營養(yǎng)物質，碳源為微生物提供能量。微生物培養(yǎng)時使用的源，常用的有機氮源包括花生餅粉、大豆餅粉粉、蛋白胨、棉籽餅粉等；無機氮源包括硫酸酸銨等硝酸鹽。本實驗中，在主要碳源為淀粉、酵母膏之外的氮源的利用率都比較高，尤以液抑菌效果最強（圖 1-2），考慮到花生餅粉，選擇花生餅粉為菌株 F57 發(fā)酵的主要有機氮

圖 1-1 不同碳源對菌株發(fā)酵液抑菌效果的影響機氮源對菌株 F57 發(fā)酵液抑菌效果的影響微生物細胞和含氮代謝產物的營養(yǎng)物質，當碳為微生物提供能量。微生物培養(yǎng)時使用的氮源常用的有機氮源包括花生餅粉、大豆餅粉、花蛋白胨、棉籽餅粉等；無機氮源包括硫酸銨、等硝酸鹽。本實驗中，在主要碳源為淀粉的前母膏之外的氮源的利用率都比較高，尤以花生菌效果最強（圖 1-2），考慮到花生餅粉的價擇花生餅粉為菌株 F57 發(fā)酵的主要有機氮源。

【參考文獻】

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1 敖曼;;楊樹人工林主要病害及其防治技術[J];農業(yè)與技術;2016年18期

2 鄭軻文;;淺談東北楊樹爛皮病的發(fā)生與防治措施[J];中國農業(yè)信息;2015年24期

3 汪巧;;植物抗病機理研究進展綜述[J];安徽農學通報;2015年08期

4 齊志利;;廊坊市楊樹主要病害種類及危害程度調查[J];現(xiàn)代農村科技;2015年05期

5 馬暉玲;房媛媛;;植物抗病性及誘導抗性在匍匐翦股穎病害防治中的應用[J];草業(yè)學報;2014年05期

6 李艷;高寶嘉;陳連濤;;植物誘導抗性的分子機制研究進展[J];河北林果研究;2013年04期

7 劉巍;

本文編號：2725378