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家蠶微粒子誘導型Cas9編輯系統(tǒng)的構建

發(fā)布時間:2024-04-13 05:17
  微孢子蟲(Microsporidia)作為一類單細胞的專性寄生真菌,廣泛存在于自然界中,具有廣闊的宿主域,能夠感染脊椎動物和無脊椎動物。家蠶微粒子(Nosema bombycis)作為第一種被人類所熟知的微孢子蟲,引起家蠶微粒子病(Pébrine)是蠶絲產(chǎn)業(yè)的毀滅性病害,嚴重威脅蠶絲業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。因此,迫切需要創(chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材,培育抗性品種,為家蠶微粒子病的綠色防控提供重要保障。當前家蠶微粒子病防控還是沿用巴斯德博士提出的母蛾鏡檢法對蠶種進行檢疫,控制病原垂直傳播;用嚴格的環(huán)境消毒、桑葉消毒等措施控制病原水平傳播。這些防控措施不僅費時費力,勞動強度大,而且大量漂白粉等消毒藥劑的使用,環(huán)境污染嚴重,嚴重制約了蠶絲產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展,迫切需要家蠶微粒子病抗性品種。目前家蠶資源中未發(fā)現(xiàn)家蠶微粒子病的抗性素材,創(chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材尤為迫切。由于家蠶微粒子特異性誘導型啟動子是創(chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材的必要條件,而目前又未篩選到該類啟動子。根據(jù)家蠶微粒子的生活史特征,家蠶微粒子的分泌蛋白可作為構建家蠶微粒子誘導型啟動子的核心元件。因此,基于分泌型蛋白構建一套家蠶微粒子誘導型基因編輯系統(tǒng)...

【文章頁數(shù)】:86 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1微孢子蟲超微結構示意圖

圖1.1微孢子蟲超微結構示意圖

圖1.1微孢子蟲超微結構示意圖[45]Figure1.1Diagramofamicrosporidiansporeultrastructure[45].e);孢子內(nèi)壁(Endospore);原生質(zhì)膜(Plasmamembrane);極管(Pol定盤(Ancho....


圖1.2微孢子蟲侵染宿主方式假說[52]

圖1.2微孢子蟲侵染宿主方式假說[52]

而是將宿主細胞膜向內(nèi)擠壓出一個內(nèi)陷結構,將孢原質(zhì)釋放于內(nèi)陷結構內(nèi)部,進而形成侵染泡[46](圖1.2)。腦炎微孢子蟲的極管可利用宿主細胞的吞噬作用進入其體內(nèi),此外發(fā)現(xiàn)一些極管在進入宿主細胞時,細胞表面相應部位形成了內(nèi)陷結構。但目前仍未有直接證據(jù)表明極管是否可以通過細胞吞噬進入宿主....


圖1.3微孢子蟲生活史示意圖

圖1.3微孢子蟲生活史示意圖

圖1.3微孢子蟲生活史示意圖[52]Figure1.3Thelifecycleofmicrosporidian[52].外感染階段;Proliferativephase:裂殖增殖階段(前體階泌蛋白種胞內(nèi)寄生單細胞真核生物,其在獲取宿定程度上還會抵抗逃避宿主的免疫....


圖1.4CRISPR/Cas9基因編輯原理示意圖

圖1.4CRISPR/Cas9基因編輯原理示意圖

細菌等微生物可將相關外源基因切除,這是細菌中,CRISPR系統(tǒng)共分成3類,其中Ⅰ類和Ⅲ類需白)共同發(fā)揮作用,而Ⅱ類系統(tǒng)只需要一種Cas蛋泛應用提供了便利條件[62-63]。兩個核酸酶結構域,包括N端的類Ruc核酸酶[62]。通過一段RNA堿基互補配對識別DNA,....



本文編號:3952537

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