水稻是世界上最重要的糧食作物,為全球貢獻了約30%的能量攝入。由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引發(fā)的稻癌瘟病對全球的稻谷產量帶來巨大的損失,每年的糧食損失可以養(yǎng)活6000萬的人口。稻瘟病菌的防治主要依賴于培育抗病品種和化學藥劑開發(fā),但該病菌易于發(fā)生變異,使抗病品種易喪失抗性。長時間使用單一的化學藥劑使病原菌產生抗藥性,導致原有的藥劑因此失去藥效。因此,如何控制稻瘟病的發(fā)生和尋找有效的防治方法一直是糧食安全生產上的難題。通過分子實驗深入的解析稻瘟病菌的致病機制,不但可以為抗病育種提供新的策略,同時也對具有特異性靶標藥物的開發(fā)具有指導意義,為稻瘟病的總體防治提供新的思路。本論文主要對致病相關的bZIP轉錄因子MoAp1和MoBzip10的靶基因進行鑒定,并對其在稻瘟病菌生長、產孢和致病過程中的功能進行分析,研究結果如下:本實驗室前期的研究結果表明,轉錄因子MoAp1作為氧化應答器參與清除活性氧的過程從而靶稻瘟病菌的致病力。本文從MoAp1的轉錄組數據中鑒定到了一個基因MoTRX2,該基因的起始密碼子上游500 bp的區(qū)域內具有MoAp1的結合位點。在敲除MoTRX2后,突...

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【部分圖文】：

圖１－２?ＭｏＡｐｌ在Ｍｏ７７ＬＹ２啟動子區(qū)結合位點分析??Ｆｉｇ．?１－２?Ｂｉｎｄｉｎｇ?ｓｉｔｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＭｏＡＰｌ?ｉｎ?ＭｏＴＲＸ２?ｐｒｏｍｏｔｅｒ?ｒｅｇｉｏｎ．??

區(qū)具有ＭｏＡｐｌ的結合位點。通過熒光定量實驗對Ｍｏ７７ＬＹ２在ＭｏＡｐｌ缺失突變體中的表??達水平進行再驗證，結果顯示在ＡＭｏｏｐ／突變體中Ｍｏ７７ＬＹ２表達量下降，這同前期轉錄??組數據相一致（圖１－２Ａ）。通過原核表達的方式獲得ＭｏＡｐｌ?：：ＧＳＴ蛋白，并利用ＧＳＴ?ｂｅａ....

圖１－５?ＭｏＴｒｘ２參與致病過程??－

?菌絲僅局限在單個水稻細胞內，不能擴展到相鄰細胞中，并且侵染菌絲分支明顯減少??（圖１－６Ｂ），這表明ＭｏＴｒｘ２參與侵染菌絲擴展過程。??＾?＾１－０）?°?，?〇＞?＾?＾０５??＾?１?Ｈｉ?＾?１?１?＿?，?１?１?１｜??Ｉｌｌｉ?ＩＩ??翻，１?＿?ａＴ￣２?Ｓ?次....

圖１－７過表達Ｍ？７７＾Ｙ２不能回補ＡＡ／ｏａ；？／的致病性缺陷??

來觀察是否能夠回補ＡＭｏｏｐ／突變體的致病力缺陷。通過熒光定??量的方法對表達菌株進行篩選，最終選擇ＡＭｏｏｐ／／Ｍｏ７７？Ｚ２＃２和ＡＭｏｏｐ／／Ｍｏ７７ＬＯ肋??兩個菌株進行致病性實驗（圖１－７Ａ）。將兩個過表達菌株、ＡＭｏａｐ／和Ｇｕｙｌｌ菌株進行??兩天的搖培

圖１－８?Ａ／ｏ７７？Ｚ２缺失突變體的生長速率減慢??

ＡＭｏ／ｒｘ２和回補菌株分別接種于ＣＭ和ＭＭ平板上，并放于２８?°Ｃ的培養(yǎng)箱中黑暗培??養(yǎng)７天，測量菌落直徑并拍照。數據顯示，當ＭｏＩＸＯ基因缺失后，在ＣＭ上生長速??度同野生相比顯著減慢（圖１－８），并且經過統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)具有極顯著（尸＜?０．０１）差異（表??１－１）。在ＭＭ培....

本文編號：3942168