蟬棒束孢作為一種名貴的傳統(tǒng)中藥,不僅具有較高的營養(yǎng)價(jià)值和藥理活性,還可作為一種具有較強(qiáng)致病作用的真菌應(yīng)用于害蟲生物防治。本文通過對從貴陽森林公園采集的蟬花(蟬棒束孢)標(biāo)本進(jìn)行分離,通過形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)方法進(jìn)行鑒定;探究不同營養(yǎng)及培養(yǎng)條件對菌株毒力的影響;研究了蟬棒束孢粗毒素對小菜蛾的殺蟲活性及作用的生理生化機(jī)制;采用UPLC-MS/MS檢測技術(shù)研究了蟬棒束孢兩個(gè)菌株間代謝物的差異及其殺蟲活性。以期為蟬棒束孢代謝物的進(jìn)一步研究和代謝物殺蟲作用機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.菌株鑒定及對小菜蛾的殺蟲活性。通過形態(tài)觀察和分子生物學(xué)鑒定,明確了供試菌株3716、GL為蟬棒束孢Isaria cicadae;蟬棒束孢對小菜蛾殺蟲活性試驗(yàn)結(jié)果表明,菌株代謝液對小菜蛾的毒力較強(qiáng),小菜蛾死亡率隨著處理時(shí)間的延長而增加,在72h時(shí)3716菌株代謝液對小菜蛾的致死率為70.00%,GL菌株代謝液對小菜蛾的致死率為78.33%;蟬棒束孢菌絲提取物對小菜蛾的毒力較小。2.高產(chǎn)毒素培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件篩選。篩選出適宜菌株生長且對小菜蛾有較強(qiáng)致病力的培養(yǎng)基為察氏培養(yǎng)基(Czapek)。通過對不同營養(yǎng)成分和...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1蟬棒束孢3716形態(tài)特征

如圖1所示,3716菌株在薩氏培養(yǎng)基上氣生菌絲豐富,羊絨狀,菌絲白色(圖1-A、B);培養(yǎng)8d后開始產(chǎn)孢,孢子無色,橢圓形小孢子,大小0.92~2.51μm×0.45~0.78μm(圖1-C),由分生孢子梗產(chǎn)孢,大小3.21~17.70μm×0.88~1.60μm(圖1-D-E....

圖2蟬棒束孢GL形態(tài)特征

如圖2所示,GL菌株在薩氏培養(yǎng)基上氣生菌絲豐富,羊絨狀,菌絲白色(圖2-A、B);培養(yǎng)8d后開始產(chǎn)孢,孢子無色,橢圓形孢子,既有大孢子也有小孢子,大小0.94~2.93μm×0.48~0.84μm(圖2-C),由分生孢子梗產(chǎn)孢,大小3.68~24.30μm×0.65~1.49μ....

圖3基于rpb1、tef-1α、nrLSU序列構(gòu)建菌株3716、GL的多基因系統(tǒng)發(fā)育樹Beauveriacaledonica作為外群,3716、GL是試驗(yàn)菌株

對供試菌株3716和GL的tef-1α、rpb1和nrLSU基因進(jìn)行擴(kuò)增和測序,分別獲得891bp、625bp、822bp和874bp、745bp、823bp個(gè)基因片段,將序列提交至GenBank數(shù)據(jù)庫,獲得3716菌株序列登錄號為MN905520、MN905521、MN905....

圖5-1QC樣本質(zhì)譜檢測TIC重疊圖

質(zhì)控樣本(QC)由樣本提取物混合制備而成,用于分析樣本在相同的處理方法下的重復(fù)性。質(zhì)量控制工作(qualitycontrol,QC)是進(jìn)行基于質(zhì)譜技術(shù)的代謝組學(xué)研究時(shí),獲得可靠且高質(zhì)量的代謝組學(xué)數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)。如圖5-1(A)、圖5-1(B)中可以看出代謝物檢測總離子流的曲線重疊性....

本文編號：3914586