蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一種桿狀的革蘭氏陽性菌,其產(chǎn)生的伴胞晶體蛋白對鱗翅目、鞘翅目、膜翅目和雙翅目等昆蟲具毒殺活性,Bt制劑是目前應用最為成功的微生物農(nóng)藥。同時,Bt攜帶的殺蟲基因也被成功用于構建抗蟲轉(zhuǎn)基因作物。由于長期使用導致昆蟲抗性的產(chǎn)生以及新型害蟲造成更大的危害,更多Bt資源的挖掘一直備受研究者關注。而高效的分類鑒定系統(tǒng)是新型Bt資源挖掘的關鍵。傳統(tǒng)的基于H-抗原(即鞭毛抗原)免疫反應的H-血清型分型手段被應用于上萬株Bt菌株的分類與鑒定,然而這種方式由于操作繁瑣已被停止使用。本研究擬從多個層面探究Bt H-抗原的遺傳決定因子,從而為開發(fā)高效的Bt分類鑒定系統(tǒng)提供理論基礎。同時,Bt H-抗原遺傳決定機制的闡明也能夠為其他利用H-血清型進行分類和鑒定的細菌提供依據(jù)。本研究主要從Bt鞭毛合成基因簇多樣性、參與H-抗原決定的關鍵基因的轉(zhuǎn)錄情況、關鍵基因的翻譯情況以及翻譯后修飾情況等層面系統(tǒng)性地了解Bt H-抗原的遺傳基礎。主要結(jié)果如下:(1)Bt以及所屬的蠟狀芽胞桿菌群的鞭毛合成基因簇存在豐富的多樣性。為了解Bt菌株H-血清型基因?qū)用娴?..

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【學位級別】：碩士

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圖3-2基于序列長度最長的鞭毛蛋白構建的系統(tǒng)發(fā)育樹

蘇云金芽胞桿菌H-抗原決定機制的研究21圖3-2基于序列長度最長的鞭毛蛋白構建的系統(tǒng)發(fā)育樹背景顏色代表不同的菌種：黃色背景代表蠟狀芽胞桿菌；紅色背景代表蘇云金芽胞桿菌；淺藍色背景代表蕈狀芽胞桿菌。最外圈標注了鞭毛蛋白基因的拷貝數(shù)：1-6。Fig.3-2Phylogenetictr....

圖3-3不同H-血清型Bt鞭毛蛋白基因的RT-PCR分析

蘇云金芽胞桿菌H-抗原決定機制的研究223.1RT-PCR分析轉(zhuǎn)錄水平上的差異本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)，Bt鞭毛合成基因簇的ORF分布以及hag基因的拷貝數(shù)與H血清型并無關系，某些具有不同的鞭毛合成基因簇類型及拷貝數(shù)（附表S1），但卻屬于相同的血清型。而另一些菌株具有相同或者相似的鞭....

圖3-4不同血清型Bt鞭毛蛋白的SDS-PAGE分析

蘇云金芽胞桿菌H-抗原決定機制的研究23圖3-4不同血清型Bt鞭毛蛋白的SDS-PAGE分析Fig.3-4SDS-PAGEanalysisofdifferentserotypeofBt’sflagellin3.2蛋白質(zhì)譜分析表達水平上的差異為進一步研究Bt菌株H血清型的決定因素，....

圖3-530種不同血清型Bt鞭毛蛋白基因的序列相似性百分比Fig.3-5Percentageofsequencesimilarityof30differentserotypeofBt’sflagellingene

蘇云金芽胞桿菌H-抗原決定機制的研究26圖3-530種不同血清型Bt鞭毛蛋白基因的序列相似性百分比Fig.3-5Percentageofsequencesimilarityof30differentserotypeofBt’sflagellingene我們基于鞭毛蛋白基因序列使用....

本文編號：3894106