褐飛虱Nilparvata lugens(Stal),半翅目、飛虱科(Hemiptera:Delphacidae),是一種專食性水稻重大害蟲。以前研究表明藥劑誘導(dǎo)褐飛虱雄蟲的交配因子經(jīng)交配傳遞使雌蟲產(chǎn)生顯著的交配后效應(yīng),但交配后效應(yīng)的作用途徑及分子機(jī)制不清楚。基于羽化后2 d交配與未交配褐飛虱雌蟲的數(shù)字基因表達(dá)譜分析,發(fā)現(xiàn)交配后雌蟲體內(nèi)adenylyl cyclase 9(NlAC9)與 cAMP-dependent protein kinase(PKA)type Ⅰ regulatory subunit(NlPKAR)顯著上調(diào),且均屬于cAMP/PKA信號通路;進(jìn)一步研究結(jié)果表明NlAC9、NlPKAR與褐飛虱雌蟲產(chǎn)卵和種群增長有關(guān),且發(fā)現(xiàn)交配后雌蟲卵巢內(nèi)章魚胺(OA)含量顯著增加。OA是昆蟲體內(nèi)主要生物胺,具有神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)激素和神經(jīng)調(diào)質(zhì)三重作用,調(diào)控昆蟲交配、排卵、產(chǎn)卵等多種行為和生理過程。因此,本研究提出“OA響應(yīng)交配激活cAMP/PKA通路調(diào)控褐飛虱生殖”的假設(shè)。本論文主要研究結(jié)果如下:1、OA響應(yīng)雄蟲交配激活cAMP/PKA信號通路的特征(1)采用雙抗體夾心法(E1ISA)...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫及中英文對照
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 褐飛虱發(fā)生概述
    2 交配對雌蟲生殖生理的影響
    3 保幼激素對昆蟲生殖的影響
        3.1 對昆蟲生殖系統(tǒng)的影響
        3.2 對卵黃生成的影響
        3.3 對濾泡細(xì)胞開放(patency)的作用
    4 昆蟲章魚胺(Octopamine,OA)研究進(jìn)展
        4.1 OA概述
        4.2 OA對交配的響應(yīng)
        4.3 OA的生理功能及對JH合成的影響
        4.4 OA信號傳導(dǎo)及其受體功能
    5 轉(zhuǎn)錄因子CREB結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及在昆蟲中的生理功能
    6 科學(xué)問題的提出及其研究意義
    7 論文技術(shù)路線
第二章 OA響應(yīng)雄蟲交配激活cAMP/PKA信號通路
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 供試水稻
        2.2 褐飛虱全蟲與組織樣品制備
        2.3 藥劑及處理方式
        2.4 RNA提取與熒光定量
        2.5 dsRNA合成與基因沉默
        2.6 產(chǎn)卵與種群試驗(yàn)
        2.7 蛋白免疫印跡
        2.8 可溶性蛋白含量與體重測定
        2.9 卵巢解剖拍照與免疫熒光觀察
        2.10 酶聯(lián)免疫吸附測定
        2.11 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 交配對OA合成、cAMP/PKA通路以及JH合成的影響
        3.2 外源藥劑處理濃度與取樣時(shí)間篩選
        3.3 外源OA處理對cAMP/PKA通路的影響
    4 討論
第三章 OA在褐飛虱生殖中的功能
    1 引言
    2 材料與方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 不同基因時(shí)空表達(dá)特征分析
        3.2 沉默NlTβH對雌蟲生理生化參數(shù)的影響
        3.3 沉默NlTβH對雌蟲生殖和Vg合成的影響
        3.4 OA與JH互作關(guān)系
        3.5 沉默OA-cAMP信號基因?qū)β殉舶l(fā)育和Vg積累的影響
        3.6 沉默NlTβH、NlOctβ2R、NlCREB1對子代種群的影響
    4 討論
第四章 全文總結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
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本文編號：3809757