轉(zhuǎn)基因水稻所表達(dá)的Bt(Bacillus thuringiensis)蛋白對靶標(biāo)害蟲表現(xiàn)出高度抗性的同時,其對非靶標(biāo)生物的安全性也受到公眾的廣泛關(guān)注。在稻田生態(tài)系統(tǒng)中,轉(zhuǎn)Bt基因水稻所表達(dá)的Bt蛋白可能通過食物鏈從轉(zhuǎn)基因水稻傳遞到植食性昆蟲,再從植食性昆蟲傳遞給寄生性天敵。基于轉(zhuǎn)Bt基因水稻—靶標(biāo)害蟲—寄生性天敵三級營養(yǎng)關(guān)系來評價Bt蛋白對靶標(biāo)害蟲安全性時,由于靶標(biāo)害蟲的生長發(fā)育受到Bt蛋白的負(fù)面影響,可能導(dǎo)致寄生蜂寄主質(zhì)量下降,最終導(dǎo)致寄生蜂發(fā)育也受到不利影響,即“寄主質(zhì)量介導(dǎo)效應(yīng)”。由于“寄主質(zhì)量介導(dǎo)效應(yīng)”的存在降低了寄生性天敵安全性評價的準(zhǔn)確性。利用抗Bt蛋白的靶標(biāo)害蟲抗性品系可以規(guī)避這種效應(yīng)產(chǎn)生的不良影響,但獲得抗性品系存在周期長、費時費力、效率低等問題。麥蛾柔繭蜂是印度谷螟的主要寄生性天敵,在轉(zhuǎn)基因水稻儲存時,Bt蛋白可能通過印度谷螟的血淋巴傳遞給麥蛾柔繭蜂。因此,需要評價Bt蛋白對麥蛾柔繭蜂的安全性。本研究通過顯微注射的方法將Cry2Aa蛋白注射到印度谷螟的血淋巴中,將印度谷螟的血淋巴作為載體把Cry2Aa蛋白傳遞給麥蛾柔繭蜂。從而規(guī)避了“寄主質(zhì)量介導(dǎo)效應(yīng)”,準(zhǔn)確評價Cry...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1.前言
    1.1 轉(zhuǎn)基因作物的發(fā)展歷程及現(xiàn)狀
    1.2 轉(zhuǎn)基因水稻現(xiàn)狀
        1.2.1 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻
        1.2.2 轉(zhuǎn)其他外源基因的抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻
    1.3 轉(zhuǎn)基因抗蟲作物對非靶標(biāo)生物的安全性評價
        1.3.1 非靶標(biāo)節(jié)肢動物指示生物的選擇
        1.3.2 分段評價體系和程序
    1.4 轉(zhuǎn)Bt基因水稻對非靶標(biāo)生物的影響
        1.4.1 轉(zhuǎn)Bt基因水稻對植食性昆蟲的影響
        1.4.2 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻對捕食性天敵的影響
        1.4.3 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻對寄生性天敵的影響
        1.4.4 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻對其他昆蟲的影響
    1.5 寄主質(zhì)量介導(dǎo)效應(yīng)
    1.6 麥蛾柔繭蜂概況
    1.7 Meta分析(Meta-analysis)
    1.8 研究目的與意義
2.材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 供試水稻
        2.1.2 供試?yán)ハx
        2.1.3 供試蛋白以及主要試劑
        2.1.4 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 Bt蛋白的ELISA檢測
        2.2.2 購買的Cry2Aa蛋白殺蟲活性檢測
        2.2.3 取食T2A-1轉(zhuǎn)基因水稻后印度谷螟血淋巴中Bt蛋白的濃度
        2.2.4 Cry2Aa蛋白注射量及注射體積的確定
        2.2.5 注射Cry2Aa蛋白后在印度谷螟血淋巴中的分布情況
        2.2.6 寄主不同狀態(tài)下Cry2Aa蛋白在印度谷螟幼蟲血淋巴中的降解動態(tài)
        2.2.7 不同處理下Cry2Aa蛋白的Western Blot分析
        2.2.8 Cry2Aa蛋白在印度谷螟血淋巴中的生物活性
        2.2.9 高劑量Cry2Aa蛋白對麥蛾柔繭蜂重要生命表參數(shù)的影響
        2.2.10 高劑量的Cry2Aa蛋白對麥蛾柔繭蜂酶活的影響
        2.2.11 Cry2Aa蛋白在印度谷螟血淋巴-麥蛾柔繭蜂體內(nèi)的傳遞規(guī)律
        2.2.12 Bt蛋白對靶標(biāo)害蟲寄生性天敵安全性的Meta分析
    2.3 數(shù)據(jù)處理
3.結(jié)果與分析
    3.1 購買的Cry2Aa蛋白殺蟲活性檢測
    3.2 取食T2A-1轉(zhuǎn)基因水稻后印度谷螟血淋巴中Bt蛋白的濃度
    3.3 顯微注射最佳體積的確定
    3.4 注射Cry2Aa蛋白后在印度谷螟血淋巴中的分布情況
    3.5 寄主不同狀態(tài)下Cry2Aa蛋白在印度谷螟幼蟲血淋巴中的降解動態(tài)
    3.6 不同處理下Cry2Aa蛋白的Western Blot分析
    3.7 Cry2Aa蛋白在印度谷螟血淋巴中的生物活性
    3.8 高劑量的Cry2Aa蛋白對麥蛾柔繭蜂重要生命表參數(shù)的影響
    3.9 高劑量的Cry2Aa蛋白對麥蛾柔繭蜂酶活的影響
    3.10 Cry2Aa蛋白在印度谷螟血淋巴-麥蛾柔繭蜂體內(nèi)的傳遞規(guī)律
    3.11 Bt蛋白對靶標(biāo)害蟲寄生性天敵安全性的Meta分析
4.討論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：3777301