禾谷鐮刀菌（Fusariumasiaticum）是一種子囊菌綱的壞死營養(yǎng)型病原真菌,可侵染谷類作物的多個器官,引起根腐、莖腐、穗腐、葉腐等多種癥狀,并且在被侵染植物中積累DON毒素,嚴重危害食用者的健康。光照是真菌的信號分子,對真菌的生長發(fā)育、次級代謝以及致病性有著重要的影響。真菌能夠通過各種各樣的光受體對光信號進行感知,其中藍光受體WC1、WC2、VVD是真菌中重要的光受體。為了研究禾谷鐮刀菌（Fasiaticum）中藍光受體的功能,實驗室前期對藍光受體基因Faawc1和Favvd進行敲除,發(fā)現(xiàn)突變體AFawc1和ΔFavvd在生長發(fā)育和致病能力等各方面存在顯著差異。為了全面了解藍光受體在禾谷鐮刀菌中的作用,本文對另一個藍光受體基因Fawc2進行了研究,結(jié)果如下:1、對藍光受體基因Fawc2進行生物信息學分析,發(fā)現(xiàn)Fawc2基因序列與其他真菌中的wc2基因既有差異性,又有保守性,說明wc2的基因功能可能具有種屬特異性。對FaWC2的蛋白序列進行分析,發(fā)現(xiàn)它含有一個PAS結(jié)構(gòu)域進行蛋白-蛋白相互作用,一個GATA鋅指結(jié)構(gòu)域進行轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié),并且這兩個結(jié)構(gòu)域在不同真菌中具有高度的保守性。以上... 

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
綜述 真菌藍光受體WC1、WC2、VVD的研究進展
    1. 真菌中藍光受體WC1、WC2和VVD的結(jié)構(gòu)和功能
    2. WC1、WC2、VVD在物理上的相互作用以及作用模式
    3. 藍光受體WC1、WC2、VVD在真菌中發(fā)揮的作用
    4. 藍光受體WC1、WC2、VVD下游基因的研究現(xiàn)狀
    5. 本論文的研究目的與意義
1. 引言
2. 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗菌株
        2.1.2 培養(yǎng)基及配方
        2.1.3 引物信息
        2.1.4 植物材料
    2.2 方法
        2.2.1 突變體轉(zhuǎn)化片段的構(gòu)建
        2.2.2 突變體轉(zhuǎn)化子的獲得
        2.2.3 突變體轉(zhuǎn)化子的鑒定
        2.2.4 熒光定量PCR檢測基因表達
        2.2.5 菌株的培養(yǎng)
        2.2.6 菌落外觀的觀察和生長速率的測定
        2.2.7 生物量測定
        2.2.8 分生孢子的誘導與計數(shù)
        2.2.9 有性生殖過程的誘導
        2.2.10 類胡蘿卜素含量的測定
        2.2.11 光修復能力檢測
        2.2.12 不同菌株對蘆筍的致病能力
        2.2.13 不同菌株對大田小麥的致病能力
        2.2.14 不同菌株對小麥幼苗的致病能力
        2.2.15 玻璃紙穿透能力檢測
        2.2.16 實驗數(shù)據(jù)處理
3. 結(jié)果與分析
    3.1 藍光受體基因Fawc2的序列克隆和生物信息學分析
        3.1.1 Fawc2的基因序列克隆
        3.1.2 基因Fawc2的生物信息學分析
    3.2 藍光受體基因Fawc2的敲除與鑒定
    3.3 藍光受體基因Fawc2對禾谷鐮刀菌生長發(fā)育的影響
        3.3.1 藍光受體基因Fawc2缺失對菌落外觀的影響
        3.3.2 藍光受體基因Fawc2缺失對生長速率和生物量的影響
        3.3.3 藍光受體基因Fawc2缺失導致光誘導的類胡蘿卜素合成產(chǎn)生缺陷
        3.3.4 藍光受體基因Fawc2缺失導致光修復能力下降
        3.3.5 藍光受體基因Fawc2缺失導致子囊殼發(fā)育缺陷
        3.3.6 藍光受體基因Fawc2缺失導致致病能力增強
        3.3.7 藍光受體基因Fawc2缺失導致穿透能力增強
    3.4 藍光受體基因Fawc2與Fawc1、Favvd關(guān)系的初步探究
        3.4.1 藍光受體基因Fawc2缺失對突變體ΔFawc1的影響
        3.4.2 藍光受體基因Fawc2缺失對突變體AFavvd的影響
4. 討論
    4.1 基因Fawc2的生物信息學分析及功能預測
    4.2 Fawc2與Fawc1對生長發(fā)育的調(diào)節(jié)功能存在差異
    4.3 Fawc2與Fawc1對致病性的調(diào)節(jié)功能存在差異
    4.4 Fawc2與Fawc1、Favvd相互關(guān)系的初步探究
5. 總結(jié)與展望
參考文獻
附錄
致謝
攻讀碩士學位期間科研成果情況


【參考文獻】：
期刊論文
[1]植物光受體的結(jié)構(gòu)域與光化學特性研究進展[J]. 周峰.  廣東農(nóng)業(yè)科學. 2012(10)
[2]禾谷鐮刀菌產(chǎn)孢培養(yǎng)基的篩選[J]. 溫州民,羅雪云.  中國食品衛(wèi)生雜志. 1991(04)

博士論文
[1]禾谷鐮刀菌KIN1激酶的隔膜孔定位及功能[D]. 羅永平.西北農(nóng)林科技大學 2014

碩士論文
[1]禾谷鐮刀菌（Fusarium asiaticum）藍光受體基因Fawc1和Favvd的功能分析[D]. 黃麗.華東師范大學 2015



本文編號：3699153