杧果是著名熱帶水果,被稱為“熱帶果王”,近年來隨著杧果種植產業(yè)的持續(xù)擴增,使得杧果產區(qū)農業(yè)經濟得到快速發(fā)展,同時杧果病蟲害的種類隨著種植面積的擴大也越來越多。近兩年本課題組在廣東、四川等杧果產區(qū)病蟲害普查時發(fā)現了一種危害逐漸加重的細菌性病害。杧果的葉片和枝條在染病初期呈現不規(guī)則的黑褐色斑圈,中期病斑向四周蔓延,前期出現的癥狀與細菌性角斑病相似,但后期染病的葉片和枝條干枯壞死,與細菌性角斑病后期出現的病害癥狀完全不同,固本課題稱之為杧果細菌性干枯病。為明確該病原菌的種類,采用稀釋涂布分離法,對具有明顯癥狀的杧果病害樣品進行稀釋分離、純化,Koch法則檢測分離物接種杧果枝葉的致病性,并通過觀察分離物的形態(tài)學特征、生物學活性測定和分子生物學分析確定其分類學地位。經全基因組測序技術,預測病原菌的致病基因、耐藥基因、致病毒力和碳水化合物等相關基因,以期為明確病原菌對寄主產生的致病機理和病害防治途徑提供理論依據。主要研究內容如下:1.杧果細菌性干枯病病原菌分離及鑒定以典型的干枯病病樣為試驗材料,采用稀釋涂布法獲得NY01菌株。經過刺傷接種將NY01菌株回接到杧果的葉片和枝條上,4天后在杧果的葉片和... 

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻綜述
    1.1 杧果病害的種類
    1.2 植物病原細菌分類學研究概況
    1.3 細菌基因組學研究進展
        1.3.1 第一代測序技術
        1.3.2 第二代測序技術
        1.3.3 第三代測序技術
    1.4 本研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 供試材料
    2.2 供試培養(yǎng)基
    2.3 儀器
    2.4 試劑
    2.5 病原菌的分離
    2.6 病原菌的致病性測定
    2.7 病原菌形態(tài)學鑒定
    2.8 病原菌分子生物學鑒定
    2.9 病原菌的生物學活性測定
        2.9.1 不同碳源對病原菌生長的影響
        2.9.2 不同氮源對病原菌生長的影響
        2.9.3 不同pH對病原菌生長的影響
        2.9.4 不同溫度對病原菌生長的影響
        2.9.5 不同鹽度對病原菌生長的影響
        2.9.6 病原菌的葡萄糖氧化發(fā)酵實驗
        2.9.7 病原菌的糖、醇類發(fā)酵實驗
    2.10 NY01 菌株的全基因組測序與分析
        2.10.1 菌株培養(yǎng)收集
        2.10.2 DNA質量檢測、文庫構建和全基因組PacBio RS II測序
        2.10.3 測序數據過濾統計
        2.10.4 基因組組裝和預測
        2.10.5 公共數據庫注釋
        2.10.6 專有數據庫分析
3 結果與分析
    3.1 杧果細菌性干枯病及其病原菌的分離、鑒定
        3.1.1 杧果細菌性干枯病癥狀
        3.1.2 病原菌分離
        3.1.3 致病性測定
        3.1.4 病原菌形態(tài)學鑒定
        3.1.5 病原菌分子生物學鑒定
    3.2 病原菌的生物學特性測定
        3.2.1 不同碳源對病原菌生長的影響
        3.2.2 不同氮源對病原菌生長的影響
        3.2.3 不同pH對病原菌生長的影響
        3.2.4 不同溫度對病原菌生長的影響
        3.2.5 不同鹽度對病原菌生長的影響
        3.2.6 病原菌的葡萄糖氧化發(fā)酵實驗
        3.2.7 病原菌的糖、醇類發(fā)酵實驗
    3.3 NY01 菌株的全基因組測序及分析
        3.3.1 DNA質量檢測
        3.3.2 數據過濾統計
        3.3.3 基因組組裝和預測
        3.3.4 公共數據庫基因注釋
        3.3.5 專有數據庫分析
4 結論與討論
    4.1 主要研究結果
    4.2 討論
    4.3 有待進一步研究的問題
參考文獻
附錄1
附錄2
附錄3
附錄 4
致謝
作者簡介
導師簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]雷州半島桐花樹病害病原菌分離鑒定[D]. 孫興濤.廣東海洋大學 2017
[2]杧果葉片響應細菌性角斑病菌差異蛋白的篩選[D]. 朱飛冀.海南大學 2017
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[6]2株溶血不動桿菌全基因組測序及生物信息學分析[D]. 宋程程.天津大學 2016
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[8]芒果畸形病病原鑒定及致病機理初步研究[D]. 楊順錦.海南大學 2010
[9]一株中度嗜鹽菌的分離、鑒定及系統發(fā)育分析[D]. 王柏玲.東北師范大學 2009



本文編號：3693988