斑翅果蠅（Drosophila suzukii）為害草莓、藍莓、櫻桃、葡萄等軟皮水果,對水果產業(yè)造成了巨大的經濟損失。與黑腹果蠅（Drosophila melanogaster）不同的是,斑翅果蠅雌蟲喜歡將卵產于新鮮、即將成熟的水果中,其嗅覺感受行為發(fā)生了改變;順-11-十八碳烯酸乙酯（11-cis-vaccenyl acetate,c VA）是果蠅屬昆蟲普遍存在的信息素,促進黑腹果蠅雌蟲交配,但在斑翅果蠅中缺失,且抑制斑翅果蠅雌蟲交配。前人研究表明,黑腹果蠅氣味結合蛋白（odorant binding proteins,OBPs）Dm OBP56h、Dm OBP69a和Dm OBP76a參與信息素行為調控,但目前關于斑翅果蠅的嗅覺分子機制尚不清楚。鑒于此,本文以斑翅果蠅為研究對象,篩選差異表達DsOBPs,原核表達純化蛋白,檢測蛋白與c VA的結合能力,利用同源建模和分子對接技術計算關鍵的結合位點,用虛擬突變分析變化的氨基酸位點,通過熒光競爭結合篩選潛在配體,為深入理解斑翅果蠅的嗅覺分子機制提供依據(jù)。主要結果如下:1.斑翅果蠅信息素結合蛋白篩選為探究斑翅果蠅中識別信息素的DsOBPs... 

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 文獻綜述
    1.1 斑翅果蠅的研究概況
        1.1.1 斑翅果蠅的發(fā)生與為害
        1.1.2 斑翅果蠅的化學生態(tài)學
        1.1.3 斑翅果蠅的防治
    1.2 果蠅信息素
        1.2.1 黑腹果蠅信息素
        1.2.2 斑翅果蠅信息素
    1.3 昆蟲氣味結合蛋白
        1.3.1 黑腹果蠅氣味結合蛋白
        1.3.2 斑翅果蠅氣味結合蛋白
    1.4 研究目的與意義
    1.5 創(chuàng)新點
技術路線
第二章 斑翅果蠅信息素結合蛋白篩選
    2.1 材料與方法
        2.1.1 轉錄組數(shù)據(jù)獲取
        2.1.2 轉錄組數(shù)據(jù)分析
    2.2 結果與分析
        2.2.1 轉錄組基因表達量
        2.2.2 DsOBPs表達量
    2.3 討論
第三章 斑翅果蠅DsOBPs基因克隆、蛋白表達與純化
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 斑翅果蠅總RNA提取
        3.1.3 第一鏈cDNA的合成
        3.1.4 引物設計
        3.1.5 斑翅果蠅DsOBPs基因克隆
        3.1.6 斑翅果蠅DsOBPs序列分析
        3.1.7 斑翅果蠅DsOBPs的原核表達
        3.1.8 斑翅果蠅DsOBPs的純化
        3.1.9 蛋白濃度測定
    3.2 結果與分析
        3.2.1 斑翅果蠅DsOBPs克隆與序列分析
        3.2.2 蛋白表達與純化
    3.3 討論
第四章 斑翅果蠅DsOBP76a與 cVA的結合機制
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 熒光猝滅
        4.1.3 同源建模
        4.1.4 分子對接
        4.1.5 虛擬突變
    4.2 結果與分析
        4.2.1 熒光猝滅
        4.2.2 同源建模
        4.2.3 分子對接
        4.2.4 虛擬突變
    4.3 討論
第五章 斑翅果蠅DsOBPs的結合特性分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 實驗材料
        5.1.2 熒光探針適合性的檢測
        5.1.3 熒光競爭性結合
    5.2 結果與分析
        5.2.1 斑翅果蠅DsOBPs與熒光探針的適合性檢測
        5.2.2 斑翅果蠅DsOBPs的熒光競爭結合
    5.3 討論
第六章 結論與展望
    6.1 結論
    6.2 展望
參考文獻
碩士期間發(fā)表的學術論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]水果害蟲鈴木氏果蠅的入侵及其防控研究進展[J]. 任路明,秦勝楠,丁心婷,萬方浩,褚棟.  生物安全學報. 2014(03)
[2]斑翅果蠅（Drosophila suzukii）研究現(xiàn)狀[J]. 張開春,閆國華,郭曉軍,王晶,張曉明,周宇.  果樹學報. 2014(04)



本文編號：3690559