白屈菜為罌粟科白屈菜屬植物,是一種有著很高開發(fā)前景的新型藥用植物。白屈菜中的主要活性成分為白屈菜紅堿,白屈菜紅堿是一種苯并菲啶型生物堿,具有抗炎、抗真菌等生物學(xué)活性。本文研究的是白屈菜紅堿的抑菌活性及抑菌機理。分離篩選三種真菌,經(jīng)18SrDNA鑒定分別為稻黑孢菌屬、赤霉菌屬和球毛殼菌屬。將白屈菜紅堿加入PDA培養(yǎng)基中制成濃度分別為5 X 10-3 mg/mL,1.0×10-2mg/mL,1.5×10-2mg/mL,2.0×10-2mg/mL的帶藥培養(yǎng)基,利用分離得到的稻黑孢菌和赤霉菌進行白屈菜紅堿抑菌活性實驗,結(jié)果顯示隨著白屈菜紅堿濃度增加,其抑菌效果越明顯,抑菌率越高,其中當濃度為2.0×10-2mg/mL,白屈菜紅堿對稻黑孢菌的抑菌率高達95%,對赤霉菌的抑菌率為92%。本文從以下三個方面研究白屈菜紅堿的抑菌機理:（1）白屈菜紅堿對真菌細胞壁細胞膜的影響。（2）白屈菜紅堿對孢子內(nèi)ROS含量的影響。（3）白屈菜紅堿對DNA的影響。根據(jù)光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡的結(jié)果顯示白屈菜紅堿可以使稻黑孢菌菌絲產(chǎn)生褶皺,在透射電鏡下可以觀察到菌絲被白屈菜紅堿破壞產(chǎn)生的孔洞;測試水稻黑孢菌細胞壁的通透性,... 

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 白屈菜紅堿的介紹
        1.1.1 白屈菜的簡介
        1.1.2 白屈菜紅堿的簡介
    1.2 水稻黑孢菌和赤霉菌簡介
        1.2.1 水稻黑孢菌簡介
        1.2.2 赤霉菌簡介
    1.3 白屈菜紅堿的提取方法
        1.3.1 微芯片電泳分離法
        1.3.2 微波輔助萃取法
        1.3.3 大孔樹脂吸附分離純化
    1.4 白屈菜紅堿的生物學(xué)活性
        1.4.1 抗炎作用
        1.4.2 抗菌作用
        1.4.3 抗癌作用
        1.4.4 對胃潰瘍的保護作用
        1.4.5 生物防治
    1.5 白屈菜紅堿的抑菌機理研究
        1.5.1 白屈菜紅堿對細胞壁和細胞膜的作用
        1.5.2 ROS在細胞體內(nèi)的積累及其檢測
        1.5.3 白屈菜紅堿對DNA的作用
    1.6 研究的內(nèi)容與意義
2 菌種的分離篩選與鑒定
    2.1 實驗材料
        2.1.1 水稻葉片
        2.1.2 試劑與儀器
        2.1.3 溶液的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 菌株的分離篩選與純化
        2.2.2 真菌的初步分類
        2.2.3 CTAB法提取真菌DNA
        2.2.4 真菌基因組ITS區(qū)段的獲得
        2.2.5 PCR產(chǎn)物的測序及序列分析
        2.2.6 真菌包子的產(chǎn)生與收集
        2.2.7 孢子計數(shù)
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 真菌的分離純化
        2.3.2 真菌的分子生物學(xué)鑒定
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
3 白屈菜紅堿抑菌活性研究
    3.1 實驗材料
        3.1.1 菌種
        3.1.2 實驗試劑與儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 白屈菜紅堿抑菌活性檢測
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 白屈菜紅堿對兩種真菌的抑菌活性檢測
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
4 白屈菜紅堿抑菌機理研究
    4.1 實驗材料
        4.1.1 供試菌株
        4.1.2 試劑與儀器
        4.1.3 培養(yǎng)基
    4.2 試驗方法
        4.2.1 白屈菜紅堿對菌絲形態(tài)的影響
        4.2.2 白屈菜紅堿對孢子萌發(fā)率的影響
        4.2.3 白屈菜紅堿對真菌細胞壁細胞膜通透性的影響
        4.2.4 白屈菜紅堿作用后孢子內(nèi)ROS檢測
        4.2.5 DNA片段化分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 白屈菜紅堿對水稻黑孢菌菌絲及孢子形態(tài)影響
        4.3.2 白屈菜紅堿對真菌細胞壁細胞膜通透性影響
        4.3.3 白屈菜紅堿對孢子萌發(fā)率的影響
        4.3.4 白屈菜紅堿作用后孢子內(nèi)ROS檢測
        4.3.5 DNA片段化分析
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3688941