【目的】fruitless（fru）是昆蟲求偶和交配行為中的關(guān)鍵基因,但是其在桔小實蠅Bactrocera dorsalis中的具體功能尚不清楚。本研究旨在明確fru在桔小實蠅求偶交配行為中的作用,進(jìn)一步明確fru的生物學(xué)意義�！痉椒ā扛鶕�(jù)NCBI上桔小實蠅fru的預(yù)測序列設(shè)計兩端引物,以桔小實蠅羽化10 d已交配的成蟲頭部cDNA為模板克隆fru基因的全長cDNA,并對其編碼蛋白的結(jié)構(gòu)域進(jìn)行預(yù)測。通過實時熒光定量PCR（RT-qPCR）技術(shù)檢測該基因在桔小實蠅交配前后表達(dá)量的變化。待合成fru基因的dsRNA后,注射到羽化9 d后的桔小實蠅雄成蟲腹部進(jìn)行RNAi,分別于注射后48 h和72 h取樣,檢測fru基因的相對表達(dá)量;并于RNAi后72 h進(jìn)行求偶交配行為觀察,測定桔小實蠅的交配頻率和交配持續(xù)時間�！窘Y(jié)果】克隆獲得桔小實蠅fru的全長cDNA,長2 865 bp,編碼954個氨基酸,預(yù)測蛋白分子量104.1 kD,等點為6.01。該基因所編碼的蛋白具有特殊結(jié)構(gòu)域,分別為一個BTB （Broad-complex, Tramtrack and Bric-a-bric）結(jié)構(gòu)域和兩個... 

【文章來源】：昆蟲學(xué)報. 2020,63(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 供試?yán)ハx
    1.2 桔小實蠅頭部RNA的提取和cDNA第1鏈的合成
    1.3 桔小實蠅fru基因的cDNA克隆
    1.4 桔小實蠅fru基因序列分析
    1.5 熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測
    1.6 dsRNA的合成及注射
    1.7 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 桔小實蠅fru的全長克隆
    2.2 fru基因在桔小實蠅成蟲不同組織中的表達(dá)情況
    2.3 fru在桔小實蠅雄成蟲不同交配狀態(tài)下的表達(dá)差異檢測
    2.4 RNAi干擾效率檢測
    2.5 RNAi探究fru在求偶行為中的功能
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]Fruitless在家蠶求偶行為中的功能研究[D]. 鄭人文.西南大學(xué) 2016



本文編號：3641382