中紅側溝繭蜂Microplitis mediator是棉鈴蟲Helicoverpa armigera等鱗翅目害蟲的重要寄生性天敵昆蟲,利用中紅側溝繭蜂進行生物防治既能有效控制害蟲,又符合有害生物綠色防控的宗旨。在田間,中紅側溝繭蜂主要通過敏銳的嗅覺系統(tǒng)來識別外界的信息化學物并定位寄主,而嗅覺系統(tǒng)中的氣味運載蛋白參與了初級階段的氣味識別,因此氣味運載蛋白在昆蟲嗅覺識別行為中扮演著重要角色。Niemann–Pick type C2（NPC2）蛋白是一種小分子可溶性蛋白,在脊椎動物中主要參與脂質代謝。最近有研究表明,NPC2蛋白也參與節(jié)肢動物的化學通訊,具有與氣味結合蛋白相似的功能。本文以中紅側溝繭蜂NPC2蛋白為研究對象,從RNA水平、蛋白水平和電生理水平系統(tǒng)解析了中紅側溝繭蜂NPC2蛋白的潛在功能。本試驗主要研究結果如下:1.基于前期中紅側溝繭蜂轉錄組測序結果,利用cDNA末端快速擴增技術技術獲得了兩個NPC2基因序列全長,分別命名為MmedNPC2a和MmedNPC2b,其編碼的氨基酸個數分別為148和158,兩者氨基酸序列一致性為26.09%。系統(tǒng)發(fā)育分析表明,MmedNPC2a和M... 

【文章來源】：中國農業(yè)科學院北京市

【文章頁數】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫表
第一章 引言
    1.1 信息化學物質研究現狀
        1.1.1 植物揮發(fā)物
        1.1.2 蟲害誘導植物揮發(fā)物
        1.1.3 植食性昆蟲揮發(fā)物
        1.1.4 信息化學物質對天敵的引誘作用
    1.2 昆蟲的嗅覺感受系統(tǒng)
        1.2.1 昆蟲識別揮發(fā)物的嗅覺機制
        1.2.2 昆蟲識別揮發(fā)物的觸角感器
        1.2.3 與昆蟲識別揮發(fā)物相關的可溶性蛋白
        1.2.4 昆蟲中新發(fā)現的識別氣味揮發(fā)物的可溶蛋白
    1.3 研究思路
        1.3.1 研究背景
        1.3.2 研究意義
        1.3.3 研究內容
第二章 中紅側溝繭蜂NPC2基因克隆和序列分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試昆蟲和試劑
        2.1.2 中紅側溝繭蜂總RNA的提取
        2.1.3 中紅側溝繭蜂cDNA模板的合成
        2.1.4 中紅側溝繭蜂MmedNPC2a基因全長的獲取和序列驗證
        2.1.5 序列比對和進化樹構建
        2.1.6 組織表達譜
    2.2 結果與分析
        2.2.1 中紅側溝繭蜂觸角RNA的提取
        2.2.2 MmedNPC2a和MmedNPC2b序列分析
        2.2.3 MmedNPC2a和MmedNPC2b組織表達譜分析
    2.3 本章討論
第三章 中紅側溝繭蜂NPC2蛋白的重組表達及免疫定位
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試昆蟲和試劑
        3.1.2 克隆以及表達載體的構建
        3.1.3 表達與純化
        3.1.4 蛋白抗體的制備
        3.1.5 蛋白質印跡分析
        3.1.6 膠體金免疫定位
    3.2 結果與分析
        3.2.1 原核表達結果
        3.2.2 蛋白印跡分析
        3.2.3 免疫定位結果
    3.3 本章討論
第四章 中紅側溝繭蜂MmedNPC2a的結合特性分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試昆蟲和試劑
        4.1.2 中紅側溝繭蜂MmedNPC2a蛋白的熒光競爭結合試驗
        4.1.3 中紅側溝繭蜂MmedNPC2a蛋白的三維結構預測
    4.2 結果與分析
        4.2.1 熒光競爭結合試驗
        4.2.2 MmedNPC2a蛋白的三維結構分析
    4.3 本章討論
第五章 中紅側溝繭蜂觸角對7種候選配體化合物EAG反應
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試昆蟲和試劑
        5.1.2 觸角電位試驗
        5.1.3 數據分析
    5.2 結果與分析
    5.3 本章討論
第六章 全文結論
參考文獻
致謝
作者簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3635858