枇杷（Eriobotrya japonica Lindl.）是一種起源于中國(guó)的亞熱帶常綠果樹(shù),因其果實(shí)香甜可口、營(yíng)養(yǎng)頗豐而受到消費(fèi)者喜愛(ài)。隨著枇杷栽培面積的增加,大面積葉部病害的發(fā)生成為限制枇杷優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的主要因素。枇杷葉斑病種類(lèi)繁多,生產(chǎn)中由于病斑形態(tài)相似,且存在多種病原菌混合致病的現(xiàn)象,故無(wú)法通過(guò)傳統(tǒng)病原鑒定法全面、快速、準(zhǔn)確地鑒定其病原菌種類(lèi)。我國(guó)枇杷主要葉斑病有灰斑病、輪紋病、炭疽病、葉尖枯斑病和圓斑病等,本研究以上述5種病害為研究對(duì)象,通過(guò)結(jié)合傳統(tǒng)分離鑒定法（包括菌落特征及孢子形態(tài)觀察、rDNA-ITS序列分析和致病性測(cè)定）和Miseq高通量測(cè)序技術(shù),以期更為準(zhǔn)確地鑒定病原,并明確不同病害微生物多樣性的年周期變化及地域分布差異,為枇杷葉斑病的防治奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.分別采集重慶地區(qū)5種主要葉斑病不同時(shí)期（春、夏、秋梢生長(zhǎng)時(shí)期）的病樣進(jìn)行傳統(tǒng)分離培養(yǎng),病原菌種類(lèi)鑒定及其分離頻率統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,枇杷葉斑病不是單一致病菌引起,而是由多種病原菌混合導(dǎo)致。可能引起灰斑病的病原菌為Colletotrichum（40.00%）、Alternaria（20.00%）、Phoma（10... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市211工程院校教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

陳福如等[31]

分生孢子梗無(wú)色，分生孢子單孢，無(wú)色，橢圓形、圓柱形或棍棒狀，兩端鈍圓，內(nèi)含油滴（圖3-1-e），大小為 9.2~ 17.7 μm × 4.6~ 7.7 μm（n=30）。初步將菌株 CQYB-1 鑒定為膠胞炭疽菌 Colletotrichum gloeosporioides。圖 3-1 菌株 CQYB-1 回接癥狀及形態(tài)特征a. 對(duì)照葉片；b. 回接癥狀；c. 菌落正面；d. 菌落反面；e. 分生孢子（標(biāo)尺=20 μm）。Fig. 3-1 The pathogenicity and morphology of strain CQYB-1a. Control; b. injured inoculation by conidiophores suspension; c. obverse side of CQYB-1 colony; d. reverseside of CQYB-1 colony; e. conidia of CQYB-1 (scale = 20 μm).b. rDNA-ITS 序列分析按N-J法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，菌株CQYB-1與兩株Colletotrichum gloeosporioides（KF053200 及 KF053200）聚在一支，自展率為 94%（圖 3-2），結(jié)合供試菌株的形態(tài)學(xué)特征以及致病性測(cè)定結(jié)果，將該菌株鑒定為膠胞炭疽菌 Colletotrichumgloeosporioides。

圖 3-2 基于 rDNA-ITS 序列構(gòu)建的菌株 CQYB-1 系統(tǒng)發(fā)育樹(shù). 3-2 Phylogenetic tree of strain CQYB-1 based on the sequences of rDNA-ITS region測(cè)定孢子懸浮液造傷接種健康枇杷葉片，3 d 后開(kāi)始發(fā)�。▓D 3-1-b），病斑漸擴(kuò)展為圓形，后期病斑擴(kuò)大相連為大塊病斑，與田間發(fā)病情況基本葉的典型病斑處再次分離病原菌，從中獲得了與原接種菌株形態(tài)基本菌，以無(wú)菌水為對(duì)照的葉片則沒(méi)有發(fā)病（圖 3-1-a）。根據(jù)柯赫氏法則 CQYB-1 為枇杷葉斑病致病菌。孢菌 Alternaria alternate孢子形態(tài)特征 CQYB-24 在 PDA 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)旺盛，菌落呈灰白色（圖 3-3-c），背色（圖 3-3-d），邊緣整齊，等徑生長(zhǎng)呈同心圓形，與 PDA 培養(yǎng)基結(jié)合菌絲發(fā)達(dá)，呈絨狀，緊密交錯(cuò)。分生孢子梗單生，具分生孢子，呈鏈f），褐色，表面光滑，具橫膈膜 1~5 個(gè)，縱、斜隔膜 0~3 個(gè)，直或微彎

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]高脂肥胖對(duì)腸道微生態(tài)、短鏈脂肪酸的影響[D]. 吳水蕓.江蘇大學(xué) 2016
[2]葡萄霜霉病菌全基因組測(cè)序及候選效應(yīng)蛋白R(shí)7的功能研究[D]. 孔祥久.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[3]重慶枇杷灰斑病菌鑒定、抗性評(píng)價(jià)及防控研究[D]. 姜琬.西南大學(xué) 2014
[4]葡萄霜霉病菌快速分子檢測(cè)方法研究[D]. 秦文韜.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[5]蘋(píng)果葉片在蘋(píng)果炭疽病病害循環(huán)中的作用研究[D]. 姜蕾.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[6]沈陽(yáng)地區(qū)油松枝枯病病原鑒定及化學(xué)防治藥劑篩選[D]. 王允.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]蘋(píng)果黑星病菌的ITS-PCR分子檢測(cè)[D]. 商蓓.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[8]野生山楂上蘋(píng)果生防酵母菌的篩選[D]. 郭萍萍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008



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